公开(公告)号：CN110551682B

公开(公告)日：2023-06-09

申请号：CN201810557944.7

申请日：2018-06-01

申请人： 深圳华大生命科学研究院

发明人： 刘田宾 ,  李静 ,  孙海汐 ,  李勇 ,  顾颖 ,  沈玥

IPC分类号： C12N5/073

摘要： 本发明公开了用于动物胚胎解离的试剂盒和方法。本发明公开的用于动物胚胎解离的试剂盒包括名称分别为酶解溶液C、酶解溶液D和酶解溶液E的试剂；酶解溶液C由细胞松弛素储存液和TrypLE消化液组成，二者的体积比为3:47‑3:97；酶解溶液D为由胎牛血清、链霉蛋白酶溶液和TCM‑HEPES缓冲溶液组成的液体，三者的体积比为1:1:1‑1:2:1；酶解溶液E由细胞松弛素储存液和Accutase细胞分离液组成，二者的体积比为3:47‑3:97。实验证明，利用本发明的试剂盒和方法解离动物胚胎解离效率高，可以解离现有方法不能解离的物种胚胎，适用于不同发育阶段的胚胎，还可以减少解离过程中的对细胞造成的伤害。

公开(公告)号：CN110551682A

公开(公告)日：2019-12-10

申请号：CN201810557944.7

申请日：2018-06-01

申请人： 深圳华大生命科学研究院

发明人： 刘田宾 ,  李静 ,  孙海汐 ,  李勇 ,  顾颖 ,  沈玥

IPC分类号： C12N5/073

摘要： 本发明公开了用于动物胚胎解离的试剂盒和方法。本发明公开的用于动物胚胎解离的试剂盒包括名称分别为酶解溶液C、酶解溶液D和酶解溶液E的试剂；酶解溶液C由细胞松弛素储存液和TrypLE消化液组成，二者的体积比为3:47-3:97；酶解溶液D为由胎牛血清、链霉蛋白酶溶液和TCM-HEPES缓冲溶液组成的液体，三者的体积比为1:1:1-1:2:1；酶解溶液E由细胞松弛素储存液和Accutase细胞分离液组成，二者的体积比为3:47-3:97。实验证明，利用本发明的试剂盒和方法解离动物胚胎解离效率高，可以解离现有方法不能解离的物种胚胎，适用于不同发育阶段的胚胎，还可以减少解离过程中的对细胞造成的伤害。

公开(公告)号：CN113046835A

公开(公告)日：2021-06-29

申请号：CN201911376706.7

申请日：2019-12-27

申请人： 深圳华大生命科学研究院

发明人： 李静 ,  孙海汐 ,  刘超 ,  周子恒 ,  杨林 ,  欧阳文杰 ,  刘田宾 ,  董国艺 ,  顾颖 ,  侯勇

IPC分类号： C40B50/06 ,  C12Q1/6869

摘要： 一种检测慢病毒插入位点的测序文库构建方法和慢病毒插入位点检测方法，其中测序文库构建方法包括：从慢病毒感染的细胞中提取基因组DNA；对基因组DNA进行片段化并处理成适于接头连接的形式；在片段化基因组DNA的两端连接上不对称双链接头，其包括长链序列和短链序列；对接头连接产物进行第一轮PCR扩增；对第一轮PCR扩增的产物进行第二轮PCR扩增；对第二轮PCR扩增的产物进行环化，得到适于上机测序的环化测序文库。本发明具有操作简单、实验时间短、成本低、起始量少、通量高、可分析方面多等特点，可以更好地进行基因治疗中病毒插入位点的准确分析与评估。

公开(公告)号：CN117760819A

公开(公告)日：2024-03-26

申请号：CN202211131525.X

申请日：2022-09-16

申请人： 深圳华大生命科学研究院

发明人： 刘田宾 ,  林旭仪 ,  孙海汐 ,  李洁 ,  吴言 ,  董国艺 ,  李建康 ,  顾颖

IPC分类号： G01N1/36 ,  G01N1/42 ,  G01N1/28

摘要： 本发明提供了一种包埋模具、包埋方法及相关应用。该包埋模具呈底面封闭的方型漏斗状，且包埋模具内壁上标记有刻度线。通过将模具设置为底面封闭的方型漏斗状，从底至上开口逐渐增大，因而便于满足不同尺寸大小的组织包埋，提高了该模具的适用范围或使用灵活性。在模具内壁上标记刻度线，便于在该模具进行包埋时，根据待包埋组织的尺寸大小预先铺设到特定刻度位置的包埋剂，这样同样有利于使获得的组织包埋块中组织材料保持平衡而非倾斜状态，进而有利于后续获得完整切片或者特定平面的切片。

公开(公告)号：CN111378613B

公开(公告)日：2024-01-09

申请号：CN201811609987.1

申请日：2018-12-27

申请人： 深圳华大生命科学研究院 ,  青岛华大基因研究院

发明人： 王晨 ,  黎瀚博 ,  刘田宾 ,  刘姗姗 ,  范广益 ,  顾颖 ,  刘心 ,  徐讯

IPC分类号： C12N5/071

摘要： 剪碎，先加入试剂D处理，再加入试剂E处理；骨骼本发明公开了一种两栖类动物细胞解离试 组织，切碎，用试剂F处理。本发明可以应用到各剂盒。本发明的试剂盒包括以下试剂：试剂C含有 种两栖动物肢体皮肤、肌肉，骨骼组织的单细胞胶原酶Ⅰ和分散酶Ⅱ，浓度依次为43000‑53000U/ 研究。100ml、90‑110units/100ml；试剂D含有胶原酶Ⅰ，浓度为55000‑65000U/100ml。试剂E含有胰蛋白酶和金属离子螯合剂，浓度依次为120000‑180000USPU/100ml、0.03‑0.07g/100ml。试剂F含有胶原酶Ⅱ，浓度为50000‑55000U/100ml。本发

公开(公告)号：CN111378613A

公开(公告)日：2020-07-07

申请号：CN201811609987.1

申请日：2018-12-27

申请人： 深圳华大生命科学研究院 ,  青岛华大基因研究院

发明人： 王晨 ,  黎瀚博 ,  刘田宾 ,  刘姗姗 ,  范广益 ,  顾颖 ,  刘心 ,  徐讯

IPC分类号： C12N5/071

摘要： 本发明公开了一种两栖类动物细胞解离试剂盒。本发明的试剂盒包括以下试剂：试剂C含有胶原酶Ⅰ和分散酶Ⅱ，浓度依次为43000-53000U/100ml、90-110units/100ml；试剂D含有胶原酶Ⅰ，浓度为55000-65000U/100ml。试剂E含有胰蛋白酶和金属离子螯合剂，浓度依次为120000-180000USPU/100ml、0.03-0.07g/100ml。试剂F含有胶原酶Ⅱ，浓度为50000-55000U/100ml。本发明还保护一种解离两栖动物组织获得单细胞的方法：皮肤组织，剪碎，用试剂C处理；肌肉组织，剪碎，先加入试剂D处理，再加入试剂E处理；骨骼组织，切碎，用试剂F处理。本发明可以应用到各种两栖动物肢体皮肤、肌肉，骨骼组织的单细胞研究。