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    一种慢病毒体外转染人造血干细胞的试剂盒及方法
    2.
    发明公开
    一种慢病毒体外转染人造血干细胞的试剂盒及方法 审中-实审 转让

    公开(公告)号：CN113025660A

    公开(公告)日：2021-06-25

    申请号：CN201911360362.0

    申请日：2019-12-25

    申请人： 深圳华大生命科学研究院

    发明人： 董国艺 ,  欧阳文杰 ,  刘超 ,  李静 ,  顾颖 ,  侯勇

    IPC分类号： C12N15/867 ,  C12N5/0789 ,  C12N5/10

    摘要： 本申请公开了一种慢病毒体外转染人造血干细胞的试剂盒及方法。本申请的试剂盒，包括细胞体外预激活培养体系和慢病毒感染培养体系；细胞体外预激活培养体系中含有浓度100‑300ng/mL的SCF、100‑300ng/mL的Flt3L、10‑500ng/mL的TPO和25‑100ng/mL的IL3；慢病毒感染培养体系中含有dmPGE2和Ploxamer407。本申请试剂盒，通过对细胞体外预激活培养体系和慢病毒感染培养体系进行优化，能稳定高效进行慢病毒感染人造血干细胞，提高病毒感染效率，降低病毒用量，降低生产成本，减轻细胞治疗产品使用者经济负担，为慢病毒体外转染人造血干细胞推广应用奠定了基础。

    一种包膜蛋白组合、含其的靶向病毒载体及制备方法
    3.
    发明授权
    一种包膜蛋白组合、含其的靶向病毒载体及制备方法 有权

    公开(公告)号：CN116970650B

    公开(公告)日：2023-12-08

    申请号：CN202311228484.0

    申请日：2023-09-22

    申请人： 深圳华大生命科学研究院 ,  深圳市禾沐基因生物技术有限责任公司

    发明人： 熊业城 ,  张婷婷 ,  欧阳文杰 ,  刘超 ,  董国艺

    IPC分类号： C12N15/867 ,  A61K48/00 ,  C07K14/115 ,  C07K19/00 ,  C12N5/10

    摘要： 本发明公开了一种包膜蛋白组合、含其的靶向病毒载体及制备方法。所述包膜蛋白组合包含RFV‑F或其变体和RFV‑RBP或其变体；所述RFV‑F的氨基酸序列的NCBI序列号为NP_899659.1；所述RFV‑RBP的氨基酸序列的NCBI序列号为NP_899660.1；RFV‑F的变体为在RFV‑F上发生了1‑80个氨基酸残基的截短；RFV‑RBP的变体为在RFV‑RBP上发生了1‑80个氨基酸残基的截短。本发明的包膜蛋白组合能有效提高递送载体工具的转导效率和特异性，还能根据靶细胞的不同进行靶向性改造。(56)对比文件Anliker B et al..Specific genetransfer to neurons, endothelial cellsand hematopoietic progenitors withlentiviral vectors《.Nature Methods》.2010,第7卷(第11期),第929-935页.Christian K Pfaller et al..Reversegenetics of Mononegavirales: How theywork, new vaccines, and new cancertherapeutics《.Virology》.2015,第479-480页.苏接瑜 等.爬行动物副黏病毒的研究进展.《黑龙江畜牧兽医》.2015,第83-85页.

    一种外泌体微量DNA的建库方法
    5.
    发明公开
    一种外泌体微量DNA的建库方法 有权

    公开(公告)号：CN109680343A

    公开(公告)日：2019-04-26

    申请号：CN201710972805.6

    申请日：2017-10-18

    申请人： 深圳华大生命科学研究院

    发明人： 王全磊 ,  商周春 ,  刘龙奇 ,  陈芳 ,  卢森 ,  高雅 ,  吴亮 ,  董国艺 ,  邓秋婷 ,  袁月 ,  刘洋

    IPC分类号： C40B50/06

    CPC分类号： C40B50/06

    摘要： 一种外泌体微量DNA的建库方法，包括：将包含转座子末端序列和标签序列的DNA序列与TN5酶包埋成TN5酶复合物；将外泌体、所述TN5酶复合物和含有IGEPAL的反应缓冲液共同孵育，使所述外泌体裂解并使外泌体DNA片段化；对片段化的外泌体DNA进行纯化，然后对纯化的外泌体DNA进行扩增，得到外泌体DNA文库。本发明实现外泌体微量DNA的TN5高通量文库构建，解决现有外泌体DNA建库技术的操作复杂、周期长、通量低等问题，为基于外泌体DNA分子诊断与应用奠定技术基础。

    包埋模具、包埋方法及相关应用
    6.
    发明公开
    包埋模具、包埋方法及相关应用 审中-实审

    公开(公告)号：CN117760819A

    公开(公告)日：2024-03-26

    申请号：CN202211131525.X

    申请日：2022-09-16

    申请人： 深圳华大生命科学研究院

    发明人： 刘田宾 ,  林旭仪 ,  孙海汐 ,  李洁 ,  吴言 ,  董国艺 ,  李建康 ,  顾颖

    IPC分类号： G01N1/36 ,  G01N1/42 ,  G01N1/28

    摘要： 本发明提供了一种包埋模具、包埋方法及相关应用。该包埋模具呈底面封闭的方型漏斗状，且包埋模具内壁上标记有刻度线。通过将模具设置为底面封闭的方型漏斗状，从底至上开口逐渐增大，因而便于满足不同尺寸大小的组织包埋，提高了该模具的适用范围或使用灵活性。在模具内壁上标记刻度线，便于在该模具进行包埋时，根据待包埋组织的尺寸大小预先铺设到特定刻度位置的包埋剂，这样同样有利于使获得的组织包埋块中组织材料保持平衡而非倾斜状态，进而有利于后续获得完整切片或者特定平面的切片。

    一种外泌体微量DNA的建库方法
    9.
    发明授权
    一种外泌体微量DNA的建库方法 有权

    公开(公告)号：CN109680343B

    公开(公告)日：2022-02-18

    申请号：CN201710972805.6

    申请日：2017-10-18

    申请人： 深圳华大生命科学研究院

    发明人： 王全磊 ,  商周春 ,  刘龙奇 ,  陈芳 ,  卢森 ,  高雅 ,  吴亮 ,  董国艺 ,  邓秋婷 ,  袁月 ,  刘洋

    IPC分类号： C40B50/06

    摘要： 一种外泌体微量DNA的建库方法，包括：将包含转座子末端序列和标签序列的DNA序列与TN5酶包埋成TN5酶复合物；将外泌体、所述TN5酶复合物和含有IGEPAL的反应缓冲液共同孵育，使所述外泌体裂解并使外泌体DNA片段化；对片段化的外泌体DNA进行纯化，然后对纯化的外泌体DNA进行扩增，得到外泌体DNA文库。本发明实现外泌体微量DNA的TN5高通量文库构建，解决现有外泌体DNA建库技术的操作复杂、周期长、通量低等问题，为基于外泌体DNA分子诊断与应用奠定技术基础。

    治疗β-球蛋白功能缺失的重组慢病毒载体及制备方法和应用
    10.
    发明公开
    治疗β-球蛋白功能缺失的重组慢病毒载体及制备方法和应用 有权 转让

    公开(公告)号：CN113046392A

    公开(公告)日：2021-06-29

    申请号：CN201911379764.5

    申请日：2019-12-27

    申请人： 深圳华大生命科学研究院

    发明人： 欧阳文杰 ,  刘超 ,  董国艺 ,  李静 ,  顾颖 ,  侯勇

    IPC分类号： C12N15/867 ,  C12N15/12 ,  A61K48/00 ,  A61K31/7088 ,  A61P7/06

    摘要： 本申请公开了一种治疗β‑球蛋白功能缺失的重组慢病毒载体及制备方法和应用。本申请的重组慢病毒载体，其基因元件由依序连接的左侧慢病毒长末端重复序列、慢病毒逆响应元件、中心多嘌呤序列、β‑球蛋白基因的基因座调控序列、第87位苏氨酸突变为谷氨酰胺的β‑球蛋白基因和右侧慢病毒长末端重复序列组成。本申请的重组慢病毒载体，通过基因元件的优化和改进，提高了基因转导效率，且在造血干细胞向红系分化过程中可以高效表达β‑球蛋白基因，从而可以有效降低病毒使用量，在增加安全性的同时，降低治疗成本。本申请的重组慢病毒载体为β‑球蛋白功能缺失导致的β‑地中海贫血和镰刀型贫血提供了一种新的治疗工具和方案。