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公开(公告)号：CN116987157B
公开(公告)日：2023-11-28
申请号：CN202311256033.8
申请日：2023-09-27
申请人： 深圳华大生命科学研究院 , 深圳市禾沐基因生物技术有限责任公司
IPC分类号： C07K14/145 , C07K19/00 , C12N15/47 , C12N15/62 , C12N15/867 , A61K48/00
摘要： 本发明公开了一种弹状病毒包膜蛋白、含其的靶向慢病毒载体及其应用。所述弹状病毒包膜蛋白包括如SEQ ID NO:1或2所示的氨基酸序列。包膜蛋白组合包含所述的弹状病毒包膜蛋白；以及靶向蛋白，所述靶向蛋白依次由以下元件组成：跨膜结构域、接头序列和单链抗体。重组慢病毒载体包含所述的包膜蛋白组合。本发明的重组慢病毒载体有效提高了针对人CD34+造血干细胞的转导效率和特异性，为将来体内递送奠定基础，增加了安全性的同时极大的降低了治疗成本，具有较大的实用价值。
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公开(公告)号：CN116934816A
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202210379697.2
申请日：2022-04-12
申请人： 深圳华大生命科学研究院
摘要： 本发明提供一种成像方法、装置、设备和系统，当需要对目标组织进行内部成像时，将目标组织固定好后，控制切片机以预设步长对目标组织进行切片，每一次切片后，采用图像采集设备对切片后的目标组织进行图像采集，得到每次切片后的目标组织截面的组织截面图像，再对所述组织截面图像进行预处理后，对组织截面图像进行连续图像配准，得到图像堆，并对所述图像堆进行三维展示。在该过程中通过调节所述预设步长的大小可以获得高分辨率的目标组织的成像，且，该过程由于是物理切割，并不会对目标组织内部细胞造成电离损伤。
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公开(公告)号：CN114231524B
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202010938129.2
申请日：2020-09-09
申请人： 深圳华大生命科学研究院
摘要： 本发明公开了一种体外制备环状DNA的方法。所述方法先根据目的线性DNA片段，设计Gibson组装连接片段，同时引入限制性内切酶Bsa Ⅰ的识别位点序列，然后将目的线性DNA片段和Gibson组装连接片段混合，进行Gibson组装，再以Gibson组装产物为模板，进行滚环扩增，纯化得到RCA产物，之后对纯化的RCA产物进行Bsa Ⅰ酶切，酶切后进行琼脂糖凝胶电泳，切胶回收与目的线性DNA片段大小一致的酶切条带，最后将酶切产物利用T4 DNA连接酶进行环化并纯化得到目的线性DNA片段的环化产物。本发明方法能够替代传统质粒，除必需元件外，仅额外引入长度为11个碱基的内切酶识别序列，将环状DNA分子量降到最低的同时降低生物安全风险，实现体外环化线性DNA片段。
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公开(公告)号：CN116970650B
公开(公告)日：2023-12-08
申请号：CN202311228484.0
申请日：2023-09-22
申请人： 深圳华大生命科学研究院 , 深圳市禾沐基因生物技术有限责任公司
IPC分类号： C12N15/867 , A61K48/00 , C07K14/115 , C07K19/00 , C12N5/10
摘要： 本发明公开了一种包膜蛋白组合、含其的靶向病毒载体及制备方法。所述包膜蛋白组合包含RFV‑F或其变体和RFV‑RBP或其变体；所述RFV‑F的氨基酸序列的NCBI序列号为NP_899659.1；所述RFV‑RBP的氨基酸序列的NCBI序列号为NP_899660.1；RFV‑F的变体为在RFV‑F上发生了1‑80个氨基酸残基的截短；RFV‑RBP的变体为在RFV‑RBP上发生了1‑80个氨基酸残基的截短。本发明的包膜蛋白组合能有效提高递送载体工具的转导效率和特异性，还能根据靶细胞的不同进行靶向性改造。(56)对比文件Anliker B et al..Specific genetransfer to neurons, endothelial cellsand hematopoietic progenitors withlentiviral vectors《.Nature Methods》.2010,第7卷(第11期),第929-935页.Christian K Pfaller et al..Reversegenetics of Mononegavirales: How theywork, new vaccines, and new cancertherapeutics《.Virology》.2015,第479-480页.苏接瑜 等.爬行动物副黏病毒的研究进展.《黑龙江畜牧兽医》.2015,第83-85页.
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公开(公告)号：CN113046835A
公开(公告)日：2021-06-29
申请号：CN201911376706.7
申请日：2019-12-27
申请人： 深圳华大生命科学研究院
IPC分类号： C40B50/06 , C12Q1/6869
摘要： 一种检测慢病毒插入位点的测序文库构建方法和慢病毒插入位点检测方法，其中测序文库构建方法包括：从慢病毒感染的细胞中提取基因组DNA；对基因组DNA进行片段化并处理成适于接头连接的形式；在片段化基因组DNA的两端连接上不对称双链接头，其包括长链序列和短链序列；对接头连接产物进行第一轮PCR扩增；对第一轮PCR扩增的产物进行第二轮PCR扩增；对第二轮PCR扩增的产物进行环化，得到适于上机测序的环化测序文库。本发明具有操作简单、实验时间短、成本低、起始量少、通量高、可分析方面多等特点，可以更好地进行基因治疗中病毒插入位点的准确分析与评估。
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公开(公告)号：CN117051046A
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202310980286.3
申请日：2023-08-04
申请人： 深圳华大生命科学研究院 , 深圳市禾沐基因生物技术有限责任公司
IPC分类号： C12N15/867 , C12N15/65 , C12Q1/6881
摘要： 本发明涉及生物工程领域，具体涉及一种慢病毒载体及其应用。本发明提供一种慢病毒载体，所述慢病毒载体的功能元件的3’UTR区域包括10‑30bp的随机序列，并基于慢病毒载体开发了一种细胞标记技术，可以在单细胞层面实现对细胞基因组DNA和转录组RNA的同时标记。
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公开(公告)号：CN116987157A
公开(公告)日：2023-11-03
申请号：CN202311256033.8
申请日：2023-09-27
申请人： 深圳华大生命科学研究院 , 深圳市禾沐基因生物技术有限责任公司
IPC分类号： C07K14/145 , C07K19/00 , C12N15/47 , C12N15/62 , C12N15/867 , A61K48/00
摘要： 本发明公开了一种弹状病毒包膜蛋白、含其的靶向慢病毒载体及其应用。所述弹状病毒包膜蛋白包括如SEQ ID NO:1或2所示的氨基酸序列。包膜蛋白组合包含所述的弹状病毒包膜蛋白；以及靶向蛋白，所述靶向蛋白依次由以下元件组成：跨膜结构域、接头序列和单链抗体。重组慢病毒载体包含所述的包膜蛋白组合。本发明的重组慢病毒载体有效提高了针对人CD34+造血干细胞的转导效率和特异性，为将来体内递送奠定基础，增加了安全性的同时极大的降低了治疗成本，具有较大的实用价值。
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公开(公告)号：CN116970650A
公开(公告)日：2023-10-31
申请号：CN202311228484.0
申请日：2023-09-22
申请人： 深圳华大生命科学研究院 , 深圳市禾沐基因生物技术有限责任公司
IPC分类号： C12N15/867 , A61K48/00 , C07K14/115 , C07K19/00 , C12N5/10
摘要： 本发明公开了一种包膜蛋白组合、含其的靶向病毒载体及制备方法。所述包膜蛋白组合包含RFV‑F或其变体和RFV‑RBP或其变体；所述RFV‑F的氨基酸序列的NCBI序列号为NP_899659.1；所述RFV‑RBP的氨基酸序列的NCBI序列号为NP_899660.1；RFV‑F的变体为在RFV‑F上发生了1‑80个氨基酸残基的截短；RFV‑RBP的变体为在RFV‑RBP上发生了1‑80个氨基酸残基的截短。本发明的包膜蛋白组合能有效提高递送载体工具的转导效率和特异性，还能根据靶细胞的不同进行靶向性改造。
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公开(公告)号：CN114231524A
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202010938129.2
申请日：2020-09-09
申请人： 深圳华大生命科学研究院
摘要： 本发明公开了一种体外制备环状DNA的方法。所述方法先根据目的线性DNA片段，设计Gibson组装连接片段，同时引入限制性内切酶Bsa Ⅰ的识别位点序列，然后将目的线性DNA片段和Gibson组装连接片段混合，进行Gibson组装，再以Gibson组装产物为模板，进行滚环扩增，纯化得到RCA产物，之后对纯化的RCA产物进行Bsa Ⅰ酶切，酶切后进行琼脂糖凝胶电泳，切胶回收与目的线性DNA片段大小一致的酶切条带，最后将酶切产物利用T4 DNA连接酶进行环化并纯化得到目的线性DNA片段的环化产物。本发明方法能够替代传统质粒，除必需元件外，仅额外引入长度为11个碱基的内切酶识别序列，将环状DNA分子量降到最低的同时降低生物安全风险，实现体外环化线性DNA片段。
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公开(公告)号：CN117051046B
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202310980286.3
申请日：2023-08-04
申请人： 深圳华大生命科学研究院 , 深圳市禾沐基因生物技术有限责任公司
IPC分类号： C12N15/867 , C12N15/65 , C12Q1/6881
摘要： 本发明涉及生物工程领域，具体涉及一种慢病毒载体及其应用。本发明提供一种慢病毒载体，所述慢病毒载体的功能元件的3’UTR区域包括10‑30bp的随机序列，并基于慢病毒载体开发了一种细胞标记技术，可以在单细胞层面实现对细胞基因组DNA和转录组RNA的同时标记。
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