跨越断裂点PCR联合多重PCR进行检测的引物组及试剂盒

    公开(公告)号:CN114807329A

    公开(公告)日:2022-07-29

    申请号:CN202210482401.X

    申请日:2022-05-05

    IPC分类号: C12Q1/6869 C12N15/11

    摘要: 本申请涉及测序技术领域,尤其涉及一种跨越断裂点PCR联合多重PCR进行基因检测的引物组及试剂盒,提供了一种跨越断裂点PCR联合多重PCR进行测序的引物组,所述引物组包括第一引物、第二引物、第三引物、第四引物及第五引物,所述第一引物从5’端到3’端依次包括特异性引物和第一测序标签,第二引物从5’端到3’端依次包括特异性引物和第二测序标签,其中,所述特异性引物包括上断裂点的正向引物和上断裂点的反向引物,下断裂点的正向引物和下断裂点的反向引物。采用该引物组可快速对样品基因的全外显子是否存在基因大面积缺失或插入进行分析,速度快,准确率高。

    同时检测多种病原体基因的方法和试剂盒

    公开(公告)号:CN115948607B

    公开(公告)日:2024-01-05

    申请号:CN202210934455.5

    申请日:2022-08-04

    摘要: 本公开描述了一种同时检测多种病原体基因的方法和试剂盒,是对各个病原体基因的靶标区域进行检测的方法和试剂盒,方法包括以下步骤:准备待测核酸样本;向待测核酸样本加入第一正向引物、第一反向引物、第二反向引物和人工质粒集合并进行第一轮PCR扩增以得到第一轮PCR扩增产物;其中,人工质粒基于靶标区域的序列设计并异于靶标区域的序列;向第一轮PCR扩增产物加入第二正向引物和第三反向引物并进行第二轮PCR扩增以得到目标文库;对目标文库进行测序以获取测序数据,测序数据包括目标文库的序列;以及基于目标文库的序列和预定拷贝数判断病原体是否被检出以及得到病原体的拷贝数。根据本公开,能够降低引物二聚体,且能够对病原体进行定量检测。

    一种用于血液直接荧光PCR扩增的反应液及其试剂盒

    公开(公告)号:CN105039538B

    公开(公告)日:2018-12-07

    申请号:CN201510406417.2

    申请日:2015-07-10

    IPC分类号: C12Q1/686

    摘要: 本发明适用于生物医学技术领域,提供了一种用于血液直接荧光PCR扩增的反应液及其试剂盒,所述PCR反应液中含有下列组分:寡肽、Brij‑58、Tween20、甲酰胺。所述血液直接荧光PCR试剂盒,包括用于血液直接荧光PCR扩增的反应液。该用于血液直接荧光PCR扩增的反应液可将未经提取、纯化处理的血液样本直接用于PCR扩增,从而避免了提取过程中的核酸损失和有毒试剂的使用,使得血液荧光PCR省时、简单方便、成本低廉且扩增效率高。

    检测耳聋易感基因突变的试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN107177688A

    公开(公告)日:2017-09-19

    申请号:CN201710507174.0

    申请日:2017-06-28

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明属于基因检测技术领域,具体涉及一种检测耳聋易感基因突变的试剂盒及其应用。该试剂盒内的PCR反应液包括17条引物单链(SEQ ID NO:1~17所示)和11条探针(SEQ ID NO:19~29所示),可以在单管PCR体系中同时检测4个耳聋易感基因的9个突变位点的基因型及1个内参基因,PCR扩增结束后经荧光PCR熔解曲线分析获知样本基因型,整个操作可在2~3小时完成,操作步骤少、耗时短、单管检测位点多、通量高、突变覆盖率高;此外本发明的试剂盒采用均相检测、闭管操作,减少了PCR产物的污染,且检测特异性高,结果易于判读。

    高效率的测序文库的构建方法及引物组和试剂盒

    公开(公告)号:CN116064753A

    公开(公告)日:2023-05-05

    申请号:CN202211026828.5

    申请日:2018-08-28

    摘要: 本发明描述了一种高效率的测序文库的构建方法、引物组和试剂盒,构建方法包括:获得多个样本的DNA;利用第一引物、第二引物和第三引物对每个样本的DNA进行第一PCR扩增;将多个样本的扩增产物合并为一管;利用第四引物和第五引物对合并后的扩增产物进行第二PCR扩增,得到测序文库;第一引物为第一测序标签序列和扩增子特异性正向引物;第二引物为第二测序标签序列和扩增子特异性反向引物;第三引物第二测序接头序列、样本标签序列和第二测序标签序列;样本标签序列用于标记不同的样本;第四引物为第一测序接头序列和第一测序标签序列;第五引物为第二测序接头序列。根据本发明,能够提供一种高效率的测序文库的构建方法、引物组和试剂盒。

    同时检测多种病原体基因的方法和试剂盒

    公开(公告)号:CN115948607A

    公开(公告)日:2023-04-11

    申请号:CN202210934455.5

    申请日:2022-08-04

    摘要: 本公开描述了一种同时检测多种病原体基因的方法和试剂盒,是对各个病原体基因的靶标区域进行检测的方法和试剂盒,方法包括以下步骤:准备待测核酸样本;向待测核酸样本加入第一正向引物、第一反向引物、第二反向引物和人工质粒集合并进行第一轮PCR扩增以得到第一轮PCR扩增产物;其中,人工质粒基于靶标区域的序列设计并异于靶标区域的序列;向第一轮PCR扩增产物加入第二正向引物和第三反向引物并进行第二轮PCR扩增以得到目标文库;对目标文库进行测序以获取测序数据,测序数据包括目标文库的序列;以及基于目标文库的序列和预定拷贝数判断病原体是否被检出以及得到病原体的拷贝数。根据本公开,能够降低引物二聚体,且能够对病原体进行定量检测。

    目标基因的检测方法、引物组、试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN114807334A

    公开(公告)日:2022-07-29

    申请号:CN202210610543.X

    申请日:2022-05-31

    摘要: 本公开描述了一种目标基因的检测方法,包括以下步骤:针对一个或多个目标基因,从每个目标基因的基因序列中选取多个目标区域,针对每个目标区域分别设计引物组;准备多个待测核酸样本;使用引物组对各个待测核酸样本进行PCR扩增,得到目标文库;对目标文库进行测序,获取目标文库的测序数据;基于测序数据判断各个目标区域是否被检出;并且对于各个待测核酸样本,若被检出的目标区域的数量与多个目标区域的数量相比大于预设比例,则判定待测核酸样本中含有目标基因。根据本公开的检测方法,能够提高检测结果准确性。本公开还描述了一种用于检测目标基因的引物组、试剂盒及应用。

    一种结核分枝杆菌DNA的提取方法

    公开(公告)号:CN110172497B

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN201910387978.0

    申请日:2019-05-10

    IPC分类号: C12Q1/6806 C12N15/10 C12R1/32

    摘要: 本发明属于生物技术领域,尤其涉及一种结核分枝杆菌DNA的提取方法,包括步骤:获取结核分枝杆菌,对所述结核分枝杆菌进行灭活处理,得到已灭活的结核分枝杆菌;对所述已灭活的结核分枝杆菌,先进行涡旋振荡分散处理,然后进行超声分散处理,得到结核分枝杆菌分散液;对所述结核分枝杆菌分散液进行破壁处理,得到破壁产物;对所述破壁产物,先采用CTAB/NaCl溶液进行第一次抽提,然后采用酚、氯仿和异戊醇的混合液进行第二次抽提,得到抽提产物;采用异丙醇和糖原对所述抽提产物进行沉淀处理,得到结核分枝杆菌DNA。本发明提取方法,提取质量高,提取方法易于操作,适合在普通生物实验室中进行。