一种改造腈水合酶及其应用

    公开(公告)号:CN107177581B

    公开(公告)日:2020-04-28

    申请号:CN201710456875.6

    申请日:2017-06-16

    申请人: 清华大学

    摘要: 本发明公开了属于酶工程和工业微生物技术领域的一种改造腈水合酶及其应用。本发明改造腈水合酶的获得方法为:如序列表SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的α亚基的133位Pro和如序列表SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的β亚基的215位Asp分别置换为Cys,使两个亚基之间形成二硫键。本发明改造腈水合酶的抗逆性、耐热性和产物耐受性都有显著提升,并且没有导致腈水合酶活性的降低。改造腈水合酶可催化获得高浓度丙烯酰胺产物,且可以多批次回用。

    一种改造腈水合酶及其应用

    公开(公告)号:CN107177581A

    公开(公告)日:2017-09-19

    申请号:CN201710456875.6

    申请日:2017-06-16

    申请人: 清华大学

    摘要: 本发明公开了属于酶工程和工业微生物技术领域的一种改造腈水合酶及其应用。本发明改造腈水合酶的获得方法为:如序列表SEQ ID NO:2所示氨基酸序列的α亚基的133位Pro和如序列表SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的β亚基的215位Asp分别置换为Cys,使两个亚基之间形成二硫键。本发明改造腈水合酶的抗逆性、耐热性和产物耐受性都有显著提升,并且没有导致腈水合酶活性的降低。改造腈水合酶可催化获得高浓度丙烯酰胺产物,且可以多批次回用。

    一种高表达脂肽类生物表面活性剂的工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN103898038B

    公开(公告)日:2016-10-26

    申请号:CN201410124438.0

    申请日:2014-03-28

    申请人: 清华大学

    摘要: 本发明公开了属于生物技术和生物化工领域的一种高表达脂肽类生物表面活性剂的工程菌及其应用。本发明采用基因工程技术构建过表达跨膜蛋白YcxA的工程菌,强化了脂肽由细胞内向细胞外的跨膜运输,从而显著提高了脂肽的产量。本发明所得过表达脂肽载体蛋白YcxA的基因工程菌与出发菌株相比,表面活性素产量提高97%,可用于脂肽类生物表面活性剂的生产,具有良好的工业应用前景,发酵所得发酵液中脂肽产量平均为1‑5g/L。

    一种降低头孢菌素C分解的方法

    公开(公告)号:CN102533920B

    公开(公告)日:2013-10-16

    申请号:CN201110460235.5

    申请日:2011-12-31

    申请人: 清华大学

    IPC分类号: C12P35/02 C12R1/19

    摘要: 本发明属于生物工程技术领域的一种降低头孢菌素C分解的方法。采用Red重组系统,将宿主菌的β-内酰胺酶和乙酰基酯酶基因敲除,然后将头孢菌素C酰化酶基因转化入上述宿主菌,宿主菌表达头孢菌素C酰化酶,然后制备头孢菌素C酰化酶粗酶液或固定化头孢菌素C酰化酶粗酶,加入到头孢菌素C底物工作液中催化其生成7-氨基头孢烷酸。采用本发明的方法制备的CPC酰化酶,收获的粗酶在催化CPC生成7-ACA过程中,使CPC利用率提高至98%以上。

    一种腈水合酶及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN1262644C

    公开(公告)日:2006-07-05

    申请号:CN200410042576.0

    申请日:2004-05-24

    申请人: 清华大学

    摘要: 本发明公开了一种腈水合酶及其编码基因与应用,其目的是提供一种腈水合酶及其编码基因与该腈水合酶的表达方法。本发明所提供的腈水合酶,由具有序列表中SEQID №:3的氨基酸残基序列的α亚基和具有SEQ ID №:2的氨基酸残基序列的β亚基组成。本发明腈水合酶的编码基因能够在重组大肠杆菌中高效表达,所得的腈水合酶活性和稳定性高,从而为进行腈水合酶基因的定点突变和定向进化改造以及丙烯酰胺的生物转化奠定了良好基础,将在丙烯酰胺的生产中起到重要作用。

    一种腈水合酶及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN1584024A

    公开(公告)日:2005-02-23

    申请号:CN200410042576.0

    申请日:2004-05-24

    申请人: 清华大学

    摘要: 本发明公开了一种腈水合酶及其编码基因与应用,其目的是提供一种腈水合酶及其编码基因与该腈水合酶的表达方法。本发明所提供的腈水合酶,由具有序列表中SEQ ID №:3的氨基酸残基序列的α亚基和具有SEQ ID№:2的氨基酸残基序列的β亚基组成。本发明腈水合酶的编码基因能够在重组大肠杆菌中高效表达,所得的腈水合酶活性和稳定性高,从而为进行腈水合酶基因的定点突变和定向进化改造以及丙烯酰胺的生物转化奠定了良好基础,将在丙烯酰胺的生产中起到重要作用。