公开(公告)号：CN110078815B

公开(公告)日：2020-12-11

申请号：CN201910439024.X

申请日：2019-05-24

申请人： 温州医科大学

发明人： 惠琦 ,  王晓杰 ,  李校堃 ,  黄臻 ,  余丙杰 ,  杨选鑫

IPC分类号： C07K14/50 ,  C07K1/20 ,  C07K1/18 ,  C12N15/12 ,  C12N15/70

摘要： 本发明的目的是提供一种重组人酸性成纤维细胞生长因子大规模制备方法，所述方法优化了大肠杆菌BL21(DE3)plysS‑pET3c/rhFGF‑1在30L中试规模下高密度细胞发酵相关参数以及优化了rhFGF‑1的纯化工艺，实现了rhFGF‑1稳定的大规模化生产。具体地，所述方法通过优化大肠杆菌BL21(DE3)plysS‑pET3c/rhFGF‑1工程菌株，及利用曲面响应分析方法优化得到的发酵工艺，柱层析串联纯化工艺，可以获得大量高纯度的重组人酸性成纤维细胞生长因子蛋白，适宜大规模生产。

公开(公告)号：CN110078815A

公开(公告)日：2019-08-02

申请号：CN201910439024.X

申请日：2019-05-24

申请人： 温州医科大学

发明人： 惠琦 ,  王晓杰 ,  李校堃 ,  黄臻 ,  余丙杰 ,  杨选鑫

IPC分类号： C07K14/50 ,  C07K1/20 ,  C07K1/18 ,  C12N15/12 ,  C12N15/70

摘要： 本发明的目的是提供一种重组人酸性成纤维细胞生长因子大规模制备方法，所述方法优化了大肠杆菌BL21(DE3)plysS-pET3c/rhFGF-1在30L中试规模下高密度细胞发酵相关参数以及优化了rhFGF-1的纯化工艺，实现了rhFGF-1稳定的大规模化生产。具体地，所述方法通过优化大肠杆菌BL21(DE3)plysS-pET3c/rhFGF-1工程菌株，及利用曲面响应分析方法优化得到的发酵工艺，柱层析串联纯化工艺，可以获得大量高纯度的重组人酸性成纤维细胞生长因子蛋白，适宜大规模生产。

公开(公告)号：CN110157768A

公开(公告)日：2019-08-23

申请号：CN201910439025.4

申请日：2019-05-24

申请人： 温州医科大学

发明人： 惠琦 ,  王晓杰 ,  李校堃 ,  黄臻 ,  余丙杰

IPC分类号： C12Q1/02

摘要： 本发明的目的是提供一种重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)生物学活性测定方法。所述方法通过体外培养小鼠胚胎成纤维细胞(NIH 3T3细胞)，利用重组人酸性成纤维细胞生长因子可促进其生长且呈一定的剂量依赖关系，建立该生长因子的生物学活性测定方法。本发明能够快速、简便的测定重组人酸性成纤维细胞生长因子的生物学活性，能够有效的应用于重组人酸性成纤维细胞生长因子药物的质量控制。

公开(公告)号：CN115873094A

公开(公告)日：2023-03-31

申请号：CN202111163778.0

申请日：2021-09-30

申请人： 温州医科大学

发明人： 惠琦 ,  王晓杰 ,  李校堃 ,  李乐 ,  顾佳伟 ,  余丙洁 ,  黄臻 ,  林敬畏

IPC分类号： C07K14/50 ,  C07K1/22 ,  C07K1/18 ,  C07K1/14

摘要： 本发明公开了一种高纯度重组人碱性成纤维细胞生长因子的纯化方法，涉及生物化学领域，纯化方法，包括如下步骤：步骤一，初提：将菌体破碎，冰浴下将菌体与裂解液搅拌混匀，经过离心得到初提离心上清液；步骤二，配制中试层析工作液：步骤三，提纯：1)CM柱层析；2)肝素亲和层析；3)SP强阳离子交换层析；本发明通过在肝素亲和层析后选择SP强阳离子交换层析进行了最后的多聚体分离，确保工艺所获得的产品更加稳定可控。

公开(公告)号：CN115475236A

公开(公告)日：2022-12-16

申请号：CN202110666346.5

申请日：2021-06-16

申请人： 温州医科大学

发明人： 黄臻 ,  张文锋 ,  刘欢 ,  吴泽远 ,  徐伟俊 ,  闻丽彬 ,  惠琦 ,  李乐

IPC分类号： A61K38/18 ,  A61K9/06 ,  A61K47/61 ,  A61K47/36 ,  A61K47/42 ,  A61K47/18 ,  A61P17/02

摘要： 本发明公开了一种常温存用的生长因子凝胶，属于医药领域，解决了现有技术中生长因子凝胶不能常温存用的问题，解决该问题的技术方案主要包括重组人碱性成纤维细胞生长因子、透明质酸水溶液、甲基氨酸、粘多糖和多肽，透明质酸水溶液采用透明质酸钠粉末与水混合制成，其中透明质酸钠粉末的重量为0.4～0.6g，水的重量为7～9g，重组人碱性成纤维细胞生长因子的重量为0.08～0.12mg，甲基酸的重量为0.15～0.25g，粘多糖的重量为0.16～0.24g，多肽的重量为0.08～0.12g。本发明主要用于实现生长因子凝胶的常温存用。本发明还提供一种上述生长因子凝胶的制备方法。

公开(公告)号：CN113069533A

公开(公告)日：2021-07-06

申请号：CN202110251309.8

申请日：2021-03-08

申请人： 温州医科大学

发明人： 李校堃 ,  林丽 ,  惠琦 ,  吴文灿 ,  黄臻

IPC分类号： A61K38/18 ,  A61K9/06 ,  A61K47/14 ,  A61P27/02 ,  A61P25/02 ,  A61P17/02 ,  A61P7/04

摘要： 本发明公开了一种长效成纤维细胞生长因子凝胶，属于成纤维细胞生长因子领域，解决了现有技术中肌肉注射bFGF相关药物的效果不佳的问题，解决该问题的技术方案主要是长效成纤维细胞生长因子凝胶通过聚乙二醇二丙烯酸酯和纯度99％以上的rhbFGF原液混合形成，长效成纤维细胞生长因子凝胶的浓度为500000IU/mL～550000IU/mL、粘度为45～55Pa·s。本发明主要用于将长效成纤维细胞生长因子凝胶直接作用于视神经纤维，缓慢吸收，生物相容性较好，药物实现缓释，治疗效果更好。