一种生产PHB的运动发酵单胞菌的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN114196607A

    公开(公告)日:2022-03-18

    申请号:CN202111642567.5

    申请日:2021-12-29

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,尤其涉及一种生产PHB的运动发酵单胞菌的构建方法及其应用。本发明以运动发酵单胞菌ZM4为出发菌株,首先利用基因工程的手段改造菌株,引入密码子优化后的外源PHB合成的三个必需基因phaA,phaB,phaC,与四环素诱导型启动子(Ptet)一起构成操纵子整合到质粒上,然后以质粒的形式导入运动发酵单胞菌ZM4中,得到具备PHB生产能力的菌株,并测定含量。然后通过增加启动子强度及增加PHB合成基因拷贝数、过表达辅因子供给相关基因、引入外源乙醇利用途径来逐步提高PHB的含量。

    运动发酵单胞菌的工程菌株、制备方法及应用

    公开(公告)号:CN118256412B

    公开(公告)日:2024-09-27

    申请号:CN202410388959.0

    申请日:2024-04-01

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本申请涉及运动发酵单胞菌的技术领域,具体涉及运动发酵单胞菌的工程菌株、制备方法及应用。所述工程菌株为所述运动发酵单胞菌的含有可表达的外源基因AaBFS,所述AaBFS编码法尼烯合酶;含有可表达的内源基因dxs1,所述dxs1编码4‑磷酸甲基赤藓糖醇(MEP)途径的DXP合酶;含有可表达的内源基因IspG,所述IspG编码MEP途径的HMBPP合酶;或含有可表达的内源基因IspH,所述IspH编码MEP途径的HMBPP还原酶中至少一项的菌株。该工程菌株能够利用Entner‑Doudoroff(ED)途径生成磷酸甘油醛和丙酮酸,进而通过MEP途径利用磷酸甘油醛和丙酮酸合成法尼烯前体法尼酰焦磷酸和β‑法尼烯。

    一种运动发酵单胞菌基因表达严谨调控系统的构建方法和应用

    公开(公告)号:CN114774453B

    公开(公告)日:2023-04-21

    申请号:CN202210248136.9

    申请日:2022-03-14

    Applicant: 湖北大学

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,尤其涉及一种运动发酵单胞菌基因表达严谨调控系统的构建方法和应用。本发明尝试在运动发酵单胞菌中构建T7表达系统,用于严谨调控线路的构建,帮助解析有毒基因的功能及实现代谢途径在运动发酵单胞菌中的严谨调控;同时也将构建可以在运动发酵单胞菌与大肠杆菌中使用的穿梭质粒,方便质粒的构建及提高外源基因在运动发酵单胞菌中的表达效率,为后续蛋白的表达与分泌及代谢工程途径优化调控奠定基础。

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