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公开(公告)号：CN116218913A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202310023897.9
申请日：2023-01-09
申请人： 湖南丰晖生物科技有限公司
发明人： 胡清云
IPC分类号： C12N15/867 , C12N5/0735 , C12N5/071
摘要： 本发明公开一种原代细胞专用慢病毒感染试剂盒及其使用方法与应用，涉及慢病毒病毒感染原代细胞培养技术领域。本发明公开的原代细胞专用慢病毒感染试剂盒，包括A、B、C三种组分，所述A组分中含有95％DMEM/F12基础培养基和5％胎牛血清；所述B组分中含有250μg/ml支原体抑制剂和5000U/ml青‑链霉素；所述C组分中含有50～200mg/ml Pluronic F‑127。本发明提供的原代细胞专用慢病毒感染试剂盒，其在慢病毒感染原料细胞的过程中使用时，能够显著提高原代细胞感染效率，增加原代细胞感染的成功率，且不影响细胞状态和特性，使感染后的细胞状态更好，并降低了细胞受到污染的概率。
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公开(公告)号：CN113584085A
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202110737586.X
申请日：2021-06-30
申请人： 湖南丰晖生物科技有限公司
IPC分类号： C12N15/867 , A61K48/00
摘要： 本发明公开了一种针对悬浮细胞的慢病毒载体及其应用，属于生物技术领域。本发明中的慢病毒载体是以pLVX‑EGFP‑IRES‑Puro为框架，插入了Ubi启动子和Cbh启动子。该慢病毒载体普遍适用于悬浮细胞的表达，表达效率高效、稳定，能够极大程度地提升悬浮细胞中的过表达效果，且表达过程简单易行，易于推广。
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公开(公告)号：CN112574992A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202011502423.5
申请日：2020-12-17
申请人： 湖南丰晖生物科技有限公司
IPC分类号： C12N15/113 , C12N15/867 , C12N15/67 , C12N15/66
摘要： 本发明公开了一种circRNA过表达成环载体DNA序列及其构建方法与应用。所述DNA序列包括如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。本发明方案的circRNA过表达成环载体DNA序列能够普遍适用于各种circRNA的成环表达，表达效率高效、稳定，提高了circRNA成环的成功率；且该序列能应用于普通真核表达、慢病毒表达、腺病毒表达、逆转录病毒表达、原核表达，操作简单易行，易于推广。
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公开(公告)号：CN113980916B
公开(公告)日：2024-11-05
申请号：CN202111136995.0
申请日：2021-09-27
申请人： 湖南丰晖生物科技有限公司
IPC分类号： C12N7/02
摘要： 本发明涉及一种慢病毒的纯化方法，该纯化方法是在纯化的浓缩过程中使用一定浓度的PEG(添加KCl或NaCl)按比例与病毒上清进行混合，离心，得到慢病毒沉淀；用PBS溶解，对获得的慢病毒悬液进行核酸酶Benzonase酶切处理；添加鱼精蛋白进行沉淀慢病毒，添加1mol/L NaCl溶解病毒，离心，得到初纯化的慢病毒悬液；再经过蔗糖密度梯度离心，获得纯化的慢病毒。本发明制得的慢病毒纯化液无外源因子污染，细胞宿主蛋白、宿主DNA残留度低，安全性好，纯度和滴度高，可达到动物实验及临床要求。
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公开(公告)号：CN109295103A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811276840.5
申请日：2018-10-30
申请人： 湖南丰晖生物科技有限公司
IPC分类号： C12N15/867 , C12N5/10 , C12N7/01
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种慢病毒载体及其在构建永生化细胞中的应用。本发明通过慢病毒感染将不同永生化关键基因有选择、针对性整合到目的细胞基因组中，不仅提高了永生化效率，而且不会使细胞中产生有害副产物。由于同时导入了两种永生化基因，使该质粒载体的应用范围扩大了，可以适用于更多的细胞种类，并且两组基因诱导永生化的机制有差异，能够互补提高永生化效率。加入了诱导型启动子，可以通过诱导剂来控制TERT的表达，降低了细胞的癌变可能，能更好控制细胞的永生化过程。
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公开(公告)号：CN113774025B
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202110985456.8
申请日：2021-08-26
申请人： 湖南丰晖生物科技有限公司
IPC分类号： C12N5/09
摘要： 本发明涉及一种结直肠癌顺铂耐药株的构建方法，属于生物工程技术领域。本发明提供了一种新型的耐药株构建方法，将磁珠分选法与常规的耐药株筛选法结合，选用P‑糖蛋白(P‑gp)作为耐药靶点，用其编码基因ABCB1的抗体标记细胞，通过磁珠分选将具备耐药性的细胞群从亲本株中分离出来。该方法构建周期短、成功率高、构建菌株耐药性稳定。
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公开(公告)号：CN110495450A
公开(公告)日：2019-11-26
申请号：CN201910907391.8
申请日：2019-09-24
申请人： 湖南丰晖生物科技有限公司
IPC分类号： A01N1/02
摘要： 本发明提供了一种细胞冻存运输液及其应用，所述细胞冻存运输液的组分以质量百分数计，包括：1～15％PLL-COOH(0.65)、3～9％海藻糖、0.5～2.5％葡萄糖、15～35％人血白蛋白、0.005～0.02％复方氨基酸溶液、55～70％的0.9％氯化钠注射液和余量为水。该细胞冻存运输液，将细胞冻存液和细胞运输液统一为一种，减少了操作流程，节约成本和时间。
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公开(公告)号：CN110269833A
公开(公告)日：2019-09-24
申请号：CN201910489249.6
申请日：2019-06-05
申请人： 湖南丰晖生物科技有限公司
摘要： 本发明公开了一种含脐带间充质干细胞制剂及其制备方法和应用，通过了大量的实验摸索和验证，本发明选择第3-10代的脐带间充质干细胞作为原材料，并通过先用机械法分散组织，再用含胶原蛋白酶I、胶原蛋白酶II、胰蛋白酶的混合酶短时间、多次数的处理方法，保证了分离的脐带间充质干细胞的活力。采用含DMEM/F12(无酚红)、10％FBS、20种氨基酸和8种维生素的脐带间充质干细胞制剂专用培养基，通过收集多次细胞培养上清液和细胞裂解物上清液的混合液，获得了更多的脐带间充质干细胞活性蛋白和活性因子，节省了制备成本，满足工业上对干细胞产品制剂需求。本发明制备的脐带间充质干细胞制剂能够促进表皮细胞和皮肤成纤维细胞增殖，安全无毒副作用，不过敏，应用于美容护肤产品效果显著。
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公开(公告)号：CN113584085B
公开(公告)日：2023-05-12
申请号：CN202110737586.X
申请日：2021-06-30
申请人： 湖南丰晖生物科技有限公司
IPC分类号： C12N15/867 , A61K48/00
摘要： 本发明公开了一种针对悬浮细胞的慢病毒载体及其应用，属于生物技术领域。本发明中的慢病毒载体是以pLVX‑EGFP‑IRES‑Puro为框架，插入了Ubi启动子和Cbh启动子。该慢病毒载体普遍适用于悬浮细胞的表达，表达效率高效、稳定，能够极大程度地提升悬浮细胞中的过表达效果，且表达过程简单易行，易于推广。
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公开(公告)号：CN115305235A
公开(公告)日：2022-11-08
申请号：CN202211039309.2
申请日：2022-08-29
申请人： 湖南丰晖生物科技有限公司
IPC分类号： C12N5/078 , C12N5/0786 , G01N15/14
摘要： 本发明公开一种巨噬细胞诱导破骨细胞的方法、破骨细胞检测试剂盒及应用，涉及医学与生物技术领域。本发明公开的巨噬细胞诱导破骨细胞的方法包括：采用LPS、M‑CSF、IL‑6、FBS、DMEM和双抗配制巨噬细胞培养基，细胞铺板，培养巨噬细胞；采用M‑CSF、RANKL和IL‑6配制破骨细胞培养基，细胞铺板，诱导活化为破骨细胞；将破骨细胞进行TRAP染色；采用流式检测多核细胞比例；还公开了用于巨噬细胞诱导破骨细胞的破骨细胞检测试剂盒。本发明提供的巨噬细胞诱导破骨细胞的方法，大大缩短了诱导周期，成本低，诱导成功率高。
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