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公开(公告)号：CN105441594A
公开(公告)日：2016-03-30
申请号：CN201610047577.7
申请日：2016-01-25
申请人： 湖南农业大学 , 中国烟草中南农业试验站 , 湖南省烟草公司长沙市公司
CPC分类号： C12Q1/701
摘要： 一种检测烟草轻型绿花叶病毒(Tobacco mild green mosaic virus,TMGMV)的RT-PCR引物及其方法，本发明根据GenBank发布的TMGMV核苷酸序列的高保守区所设计引物，该引物对烟草轻型绿花叶病毒是特异的，除了特异性好之外，还具有对不同的TMGMV分离物覆盖率最高的特点，能有效检测到不同的TMGMV分离物，检测结果更加准确，而且检测时不需加辅助引物，更加方便。本发明的检测方法可适用于批量茄科作物TMGMV的分子检测，在降低了检测成本，减少了工作量的同时，保留了快速、准确、灵敏度高等优势。
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公开(公告)号：CN108004159A
公开(公告)日：2018-05-08
申请号：CN201711162238.4
申请日：2017-11-20
申请人： 中国烟草中南农业试验站 , 湖南农业大学
摘要： 本发明公开了一种拮抗烟草黑胫病菌的克雷伯氏菌、筛选方法及应用，所述克雷伯氏菌为抗烟草黑胫病菌的拮抗菌株，该拮抗菌株已在中国武汉武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号CCTCC NO：M2017672。通过本发明提供的技术方案筛选得到所述拮抗菌株，能有效拮抗烟草黑胫病菌，进而达到防治烟草黑胫病的作用。
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公开(公告)号：CN108148774A
公开(公告)日：2018-06-12
申请号：CN201711162237.X
申请日：2017-11-20
申请人： 中国烟草中南农业试验站 , 湖南农业大学
摘要： 本发明公开了一种拮抗烟草黑胫病菌的醋酸钙不动杆菌、筛选方法及应用，所述醋酸钙不动杆菌为抗烟草黑胫病菌的拮抗菌株，该拮抗菌株已在中国武汉武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号CCTCC NO：M2017671。本发明提供的技术方案通过筛选得到所述拮抗菌株，能有效拮抗烟草黑胫病病原菌，进而达到防治烟草黑胫病的作用。
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公开(公告)号：CN107858316B
公开(公告)日：2019-11-08
申请号：CN201711415228.7
申请日：2017-12-23
申请人： 湖南农业大学 , 中国烟草中南农业试验站
摘要： 本发明公开了一种拮抗烟草黑胫病菌的嗜麦芽窄食单胞菌、筛选方法及应用，所述嗜麦芽窄食单胞菌为烟草黑胫病菌的拮抗菌株，该拮抗菌株已在中国武汉武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号CCTCC NO：M2017673。本发明提供的技术方案通过筛选得到所述拮抗菌株，能有效拮抗烟草黑胫病病原菌，进而达到防治烟草黑胫病的作用。
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公开(公告)号：CN107858316A
公开(公告)日：2018-03-30
申请号：CN201711415228.7
申请日：2017-12-23
申请人： 湖南农业大学 , 中国烟草中南农业试验站
摘要： 本发明公开了一种拮抗烟草黑胫病菌的嗜麦芽窄食单胞菌、筛选方法及应用，所述嗜麦芽窄食单胞菌为烟草黑胫病菌的拮抗菌株，该拮抗菌株已在中国武汉武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号CCTCC NO：M2017673。本发明提供的技术方案通过筛选得到所述拮抗菌株，能有效拮抗烟草黑胫病病原菌，进而达到防治烟草黑胫病的作用。
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公开(公告)号：CN106496034A
公开(公告)日：2017-03-15
申请号：CN201610914573.4
申请日：2016-10-20
申请人： 中国烟草中南农业试验站 , 湖南农业大学
摘要： 本发明公开了一种同时从烟叶中提取分离绿原酸和芸香苷的方法。称取过60目筛的烟叶粉末样品200g，以料液比1:20溶解于水中，温度50℃，搅拌提取120min。收集滤液用石油醚萃取除脂溶性杂质，即得绿原酸、芸香苷提取液。提取液上柱进行绿原酸及芸香苷的柱层析分离，先用5倍提取液体积的水洗脱，直至洗脱液中无糖检测出。用水洗脱后，改换洗脱液为不同浓度的乙醇梯度洗脱。分别收集10-15％浓度的乙醇洗脱液和30-40％浓度的乙醇洗脱液得到绿原酸溶液和芸香苷溶液。该方法节省了原料和试剂，降低了开发成本，达到良好的分离效果。
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公开(公告)号：CN108148774B
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN201711162237.X
申请日：2017-11-20
申请人： 中国烟草中南农业试验站 , 湖南农业大学
摘要： 本发明公开了一种抗烟草黑胫病菌的醋酸钙不动杆菌、筛选方法及应用，所述醋酸钙不动杆菌为抗烟草黑胫病菌的拮抗菌株，该拮抗菌株已在中国武汉武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏，保藏号CCTCC NO：M2017671。本发明提供的技术方案通过筛选得到所述拮抗菌株，能有效拮抗烟草黑胫病病原菌，进而达到防治烟草黑胫病的作用。
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公开(公告)号：CN106496034B
公开(公告)日：2019-07-12
申请号：CN201610914573.4
申请日：2016-10-20
申请人： 中国烟草中南农业试验站 , 湖南农业大学
摘要： 本发明公开了一种同时从烟叶中提取分离绿原酸和芸香苷的方法。称取过60目筛的烟叶粉末样品200g，以料液比1:20溶解于水中，温度50℃，搅拌提取120min。收集滤液用石油醚萃取除脂溶性杂质，即得绿原酸、芸香苷提取液。提取液上柱进行绿原酸及芸香苷的柱层析分离，先用5倍提取液体积的水洗脱，直至洗脱液中无糖检测出。用水洗脱后，改换洗脱液为不同浓度的乙醇梯度洗脱。分别收集10‑15％浓度的乙醇洗脱液和30‑40％浓度的乙醇洗脱液得到绿原酸溶液和芸香苷溶液。该方法节省了原料和试剂，降低了开发成本，达到良好的分离效果。
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公开(公告)号：CN104131032B
公开(公告)日：2015-12-09
申请号：CN201410362991.8
申请日：2014-07-28
申请人： 湖南农业大学 , 湖南省烟草公司长沙市公司
摘要： 一种使烟草获得马铃薯Y病毒抗性的方法，该方法是首先制备含VIGS载体的根癌农杆菌；该VIGS载体的靶标序列为马铃薯Y病毒CP序列，如Seq ID No.1所示；再于烟苗剪叶后，喷施上述根癌农杆菌和PBNTRA6根癌农杆菌的混合菌液，使根癌农杆菌侵染剪叶烟苗，通过侵染将CP基因片段导入烟草。本发明同时提供一种以马铃薯Y病毒基因为靶标的上述VIGS载体。本发明以种植普通烟草为试材，以烟田危害广泛的马铃薯Y病毒为靶标病毒进行具体实验验证，实验数据显示，导入CP基因的烟草获得良好的PVY病毒抗性。
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公开(公告)号：CN104531756A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410544639.6
申请日：2014-10-15
申请人： 湖南省烟草公司长沙市公司 , 湖南农业大学
摘要： 一种使烟草获得马铃薯Y病毒抗性的方法，该方法是首先制备含VIGS载体的根癌农杆菌；该VIGS载体的靶标序列为马铃薯Y病毒HC-Pro序列；再于烟苗剪叶后，喷施上述根癌农杆菌和PBNTRA6根癌农杆菌的混合菌液，使根癌农杆菌侵染剪叶烟苗，通过侵染将HC-Pro基因片段导入烟草。本发明同时提供一种以马铃薯Y病毒基因为靶标的上述VIGS载体。本发明以种植普通烟草为试材，以烟田危害广泛的马铃薯Y病毒为靶标病毒进行具体实验验证，实验数据显示，导入HC-Pro基因的烟草获得良好的PVY病毒抗性。
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