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公开(公告)号：CN102174509A
公开(公告)日：2011-09-07
申请号：CN201010602185.5
申请日：2011-02-18
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明公开了一种应用于群落分析的植物内生菌基因组总DNA的提取及纯化方法。首先将表面除菌后的新鲜植物组织剪碎研磨至糊状后浸泡在灭菌的磷酸盐缓冲液中，经恒温摇床震荡1小时使微生物细胞从植物组织中脱离出来，静置，悬浮液转入离心管中离心收集微生物菌体，然后加入裂解液振荡混匀使DNA从细胞中释放，再经氯仿-异戊醇反复抽提蛋白，异丙醇离心沉淀和70％冰乙醇洗涤，用DNA特异离心吸附柱纯化得到的粗提基因组总DNA，最后再利用特殊引物进行PCR扩增即可回收得到高质量的用于后续分析的植物内生菌特异性DNA片段。本发明方法具有简单、有效、高质量、污染小等优点，为全面完整地研究植物内生菌群落结构提供了高质量的保证。
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公开(公告)号：CN102965312A
公开(公告)日：2013-03-13
申请号：CN201210466119.9
申请日：2012-11-19
Applicant: 湖南大学
IPC: C12N1/20 , C12N1/04 , C02F3/34 , C12R1/38 , C02F101/20
Abstract: 本发明提供了一种提高细菌重金属吸附能力的修饰方法、吸附剂及其应用。该方法采用戊二醛作为交联剂，将聚烯丙基胺盐酸盐（PAA/HCl）连接到植物内生菌Pseudomonas sp.LK9菌体表面上，使其表面带有大量的氨基，从而提高其对重金属吸附效果。得到的吸附剂对重金属Pb2+、Cd2+、Cu2+的最大吸附量分别为269.9mg/g、145.0mg/g和148.0mg/g，比未修饰的LK9吸附剂分别增加了192.98mg/g、121.85mg/g和128.35mg/g。本发明具有方法简单，操作简便，吸附效果显著、快速，环保等特点，在重金属污染水处理方面具有很大的应用潜力。
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公开(公告)号：CN101441167A
公开(公告)日：2009-05-27
申请号：CN200810107515.6
申请日：2008-12-19
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明提供了一种用于重金属对微生物最小抑制浓度快速测定的方法。分别配制加入重金属离子梯度浓度的适于微生物生长的液体培养基，再在无菌条件下，将处于对数生长期的菌种接入灭菌的上述液体培养基中培养，紫外分光光度法测定OD值；多次测定OD值没有增长变化的浓度即为最小抑制浓度。该法利于快速筛选菌种的需要，测定重金属对细菌的抑制性更可靠。
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公开(公告)号：CN102174509B
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201010602185.5
申请日：2011-02-18
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明公开了一种应用于群落分析的植物内生菌基因组总DNA的提取及纯化方法。首先将表面除菌后的新鲜植物组织剪碎研磨至糊状后浸泡在灭菌的磷酸盐缓冲液中，经恒温摇床震荡1小时使微生物细胞从植物组织中脱离出来，静置，悬浮液转入离心管中离心收集微生物菌体，然后加入裂解液振荡混匀使DNA从细胞中释放，再经氯仿-异戊醇反复抽提蛋白，异丙醇离心沉淀和70％冰乙醇洗涤，用DNA特异离心吸附柱纯化得到的粗提基因组总DNA，最后再利用特殊引物进行PCR扩增即可回收得到高质量的用于后续分析的植物内生菌特异性DNA片段。本发明方法具有简单、有效、高质量、污染小等优点，为全面完整地研究植物内生菌群落结构提供了高质量的保证。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102994411B
公开(公告)日：2014-04-30
申请号：CN201210295180.1
申请日：2012-08-17
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明提供了一种可处理废水中重金属污染的微生物及吸附剂和应用。从超积累植物龙葵内分离出的内生菌LK9具有Cd、Cu、Pb抗性，将该菌扩大培养收集后制备成粉末吸附剂，可用于处理重金属污染废水。处理重金属污染废水时，将所述的内生菌LK9吸附剂投加到废水中，经离心沉淀或过滤出吸附剂，发现对Cd2+、Cu2+、Pb2+等重金属离子均有较强吸附能力，其中对Pb2+的去除效果尤其显著，达到90%以上。本发明与其他吸附剂相比具有快速、吸附率高、操作简便、经济、适用范围广等特点，在重金属污染水处理方面具有很大的应用潜力。
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公开(公告)号：CN103013864A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201210509358.8
申请日：2012-12-03
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明首次提供一种利用聚丙烯胺盐酸盐双层修饰细菌的方法、吸附剂及其应用方法。该方法依次采用戊二醛、4-溴丁酰氯作为交联剂，将聚烯丙基胺盐酸盐（PAA/HCl）双层连接到细菌表面，从而显著提高其对重金属的去除能力。按本发明方法修饰细菌LK9所得吸附剂LK9-G-PAA-B-PAA对重金属Pb2+的最大吸附量为483.19mg/g，比未修饰的LK9吸附剂增加了406.23mg/g，比单层修饰吸附剂LK9-G-PAA增大213.29mg/g，且1g/L的该吸附剂剂量对300mg/L以下的重金属Pb2+去除率可达99%。本发明吸附剂吸附能力显著，环保，对重金属污染水处理具有很大的应用潜力，且微生物修饰方法提供一个可双层或多层修饰微生物的新思路。
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公开(公告)号：CN102994411A
公开(公告)日：2013-03-27
申请号：CN201210295180.1
申请日：2012-08-17
Applicant: 湖南大学
Abstract: 本发明提供了一种可处理废水中重金属污染的微生物及吸附剂和应用。从超积累植物龙葵内分离出的内生菌LK9具有Cd、Cu、Pb抗性，将该菌扩大培养收集后制备成粉末吸附剂，可用于处理重金属污染废水。处理重金属污染废水时，将所述的内生菌LK9吸附剂投加到废水中，经离心沉淀或过滤出吸附剂，发现对Cd2+、Cu2+、Pb2+等重金属离子均有较强吸附能力，其中对Pb2+的去除效果尤其显著，达到90%以上。本发明与其他吸附剂相比具有快速、吸附率高、操作简便、经济、适用范围广等特点，在重金属污染水处理方面具有很大的应用潜力。
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