公开(公告)号：CN117551210A

公开(公告)日：2024-02-13

申请号：CN202311545379.X

申请日：2023-11-16

申请人： 生猪技术创新中心(重庆) ,  西南大学 ,  重庆市畜牧科学院

发明人： 李德龙 ,  余远迪 ,  杨柳 ,  杨睿 ,  许国洋 ,  付利芝 ,  周建方

IPC分类号： C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/866 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14 ,  A61P1/12 ,  C12N7/01 ,  C12R1/93

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种优化型PEDV S蛋白及其重组杆状病毒、制备与应用。本发明提供了一种优化型PEDV S蛋白，其由MP、linker、猪流行性腹泻病毒S蛋白、linker、CTB、WPRE依次连接而成。然后将SCW克隆至原核表达载体pET32a，经双酶切、胶回收后，克隆至昆虫细胞表达载体pFastBac1，制得重组载体；重组载体转化入DH10Bac感受态细胞，经蓝白斑筛选及纯化后，获得重组杆粒；最后将重组杆粒转染sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒。本发明提供了一种高表达的优化型PEDV S蛋白和重组杆状病毒，为PEDV的临床诊断方法以及亚单位疫苗的开发具有重要意义。

公开(公告)号：CN118562838A

公开(公告)日：2024-08-30

申请号：CN202410431553.6

申请日：2024-04-10

申请人： 生猪技术创新中心(重庆) ,  西南大学 ,  重庆市格晟生物技术有限责任公司

发明人： 李德龙 ,  余远迪 ,  杨柳 ,  罗杰 ,  许国洋 ,  付利芝 ,  周建方 ,  张代文

IPC分类号： C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  C07K14/165 ,  C12N15/866 ,  C12N7/01 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

摘要： 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种高免疫原性的重组蛋白、病毒样颗粒及其制备方法与应用。该重组蛋白由T1‑B‑T2、linker、蜂毒信号肽、linker、PEDV S蛋白、linker、CTB、WPRE依次连接而成，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明以G II型PEDV S基因为基础，添加几种可以提高蛋白表达量和增强免疫效果的元件，得到重组蛋白TSCW；并进一步构建重组杆状病毒表达载体BV‑TSCW，最后将BV‑TSCW与BV‑M共感染获得病毒样颗粒VLP‑TSCW。该VLP‑TCSW可以诱导更高的抗体水平。本发明为为后续PEDV疫苗的优化、设计和研发奠定了基础。