一种发酵生产洛伐他汀的土曲霉的培养与保存方法

    公开(公告)号:CN114958625B

    公开(公告)日:2023-12-19

    申请号:CN202210795097.4

    申请日:2022-07-07

    IPC分类号: C12N1/14 C12N1/04 C12R1/66

    摘要: 本申请提供了一种发酵生产洛伐他汀的土曲霉的培养与保存方法,1)取一支土曲霉甘油冷冻管,采用无菌划线法接种至平板培养基上,然后培养,获取单菌落;2)挑选单菌落至无菌试管中,然后加入已灭菌的氯化钠溶液和无菌玻璃珠,然后振荡粉碎;3)吸取菌悬液至斜面培养基上,将菌悬液涂布均匀,然后培养;4)向成熟后的菌种斜面加入无菌水,然后转移至甘油溶液中,然后涡旋混匀,得到甘油菌悬液;5)分装至冷冻管中;6)冷冻保存;对平板培养基与斜面培养基的配方和菌种保存进行优化,土曲霉发酵能力提高了40%‑60%,菌种稳定,甘油菌悬液的均一性良好,操作简易,成本低,原材料与设备来源广泛,适合大规模工业化生产。

    一种发酵生产洛伐他汀的土曲霉的培养与保存方法

    公开(公告)号:CN114958625A

    公开(公告)日:2022-08-30

    申请号:CN202210795097.4

    申请日:2022-07-07

    IPC分类号: C12N1/14 C12N1/04 C12R1/66

    摘要: 本申请提供了一种发酵生产洛伐他汀的土曲霉的培养与保存方法,1)取一支土曲霉甘油冷冻管,采用无菌划线法接种至平板培养基上,然后培养,获取单菌落;2)挑选单菌落至无菌试管中,然后加入已灭菌的氯化钠溶液和无菌玻璃珠,然后振荡粉碎;3)吸取菌悬液至斜面培养基上,将菌悬液涂布均匀,然后培养;4)向成熟后的菌种斜面加入无菌水,然后转移至甘油溶液中,然后涡旋混匀,得到甘油菌悬液;5)分装至冷冻管中;6)冷冻保存;对平板培养基与斜面培养基的配方和菌种保存进行优化,土曲霉发酵能力提高了40%‑60%,菌种稳定,甘油菌悬液的均一性良好,操作简易,成本低,原材料与设备来源广泛,适合大规模工业化生产。

    一种麦角菌的培养与保存方法

    公开(公告)号:CN114437934A

    公开(公告)日:2022-05-06

    申请号:CN202210262658.4

    申请日:2022-03-17

    IPC分类号: C12N1/04 C12N1/14 C12R1/645

    摘要: 本申请提供了一种麦角菌的培养与保存方法,先将麦角菌接种至斜面培养基上进行培养,然后当麦角菌生长成熟后刮下菌丝,然后将菌丝转移至无菌容器中,加适量无菌水,然后采用高速剪切混合的方法制成菌悬液,然后向菌悬液中加入甘油溶液,然后将甘油菌悬液分装至冷冻管中,然后冷冻保存;使用高剪切分散乳化机对麦角菌的菌丝团进行高效高速剪切,并混合制备均质的菌悬液,能够满足菌种的主菌种库和工作菌种库应为均质菌液的要求,解决了麦角菌的菌丝团硬度大、菌丝生长致密与不易分散的难题;生长速度提高了20%~30%,发酵代谢产物中麦角酸的含量提高了140%~170%;操作简易,成本低,原材料与设备来源广泛,适合大规模工业化生产。

    一种测定硫酸庆大霉素发酵液效价的方法

    公开(公告)号:CN115184288A

    公开(公告)日:2022-10-14

    申请号:CN202210857533.6

    申请日:2022-07-20

    IPC分类号: G01N21/31 G01N1/28

    摘要: 本申请提供了一种测定硫酸庆大霉素发酵液效价的方法,1)取庆大霉素发酵液,用浓硫酸酸化至pH=1.5‑2.0;2)过滤,用氢氧化钠溶液中和滤液至pH=7.3±0.5;3)量取中和后的溶液至离心管中,加雷氏盐溶液然后离心;4)水洗沉淀、离心;5)加入丙酮水溶液溶解沉淀物,离心,取上清液,采用紫外可见分光光度法测定吸光度;6)称取硫酸庆大霉素标准品,按上述相同处理方法制取上清液,得到溶液单位效价与吸光度关系的标准曲线和线性回归方程;7)根据待测溶液的吸光度和线性回归方程,计算得到庆大霉素发酵液的效价;准确度高,标准品效价回收率达到95.0%~105.0%,操作简易、成本低,适合大规模工业化生产检验。