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公开(公告)号：CN102803289B
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201080026332.7
申请日：2010-06-14
申请人： 纳幕尔杜邦公司
IPC分类号： C07K14/195
CPC分类号： C12P7/6472 , C12N15/52 , C12P7/6409
摘要： 本发明描述了含油酵母解脂耶氏酵母的工程化的菌株，所述菌株能够生产包含按总脂肪酸的重量百分比计的[“％TFA”]高于50重量％的二十碳五烯酸[“EPA”](一种ω-3多不饱和脂肪酸)，并且具有至少3.1的EPA％TFA对亚油酸比值(以％TFA测量)的油。这些菌株除其他异源的Δ9延伸酶、Δ8去饱和酶、Δ5去饱和酶、Δ17去饱和酶、Δ12去饱和酶、C16/18延伸酶外，还过表达至少一种Δ9延伸酶/Δ8去饱和酶复合酶，并任选地过表达二酰基甘油胆碱磷酸转移酶、丙二酰-辅酶A合成酶和/或酰基-辅酶A溶血磷脂酰基转移酶。至少一种过氧化物酶体生物合成因子蛋白的表达被下调。主张了在所述宿主细胞中生产EPA的方法、从所述细胞获得的油、和由此生产的产品。
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公开(公告)号：CN102459627B
公开(公告)日：2015-07-29
申请号：CN201080026825.0
申请日：2010-06-14
申请人： 纳幕尔杜邦公司
CPC分类号： C12P7/6481 , C12N9/1029 , C12N15/815 , C12P7/6427 , C12P7/6472
摘要： 基于酰基-辅酶A：溶血磷脂酰基转移酶[“LPLAT”](例如Ale1、LPAAT、LPCAT)的过表达，本文提供了用于在生产长链多不饱和脂肪酸[“LC-PUFA”]的含油重组微生物宿主细胞中提高C18-C20延伸转化效率和/或Δ4去饱和转化效率的方法。生产宿主细胞和通过本发明的方法生产的油类也受权利要求书保护。
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公开(公告)号：CN1842598A
公开(公告)日：2006-10-04
申请号：CN200480024629.4
申请日：2004-06-23
申请人： 纳幕尔杜邦公司
IPC分类号： C12N15/81
CPC分类号： C12P7/6427 , C12N9/0008 , C12N9/90 , C12N15/815 , C12P7/6472
摘要： 业已发现与解脂耶氏酵母甘油醛－3－磷酸脱氢酶(gpd)和磷酸甘油酸变位酶(gpm)基因相连的启动子区对含油酵母内的异源基因表达尤其有效。本发明所述启动子区已被证实可驱动参与生成ω－3和ω－6脂肪酸的基因的高水平表达。
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公开(公告)号：CN102216464B
公开(公告)日：2014-11-26
申请号：CN200980143092.6
申请日：2009-08-28
申请人： 纳幕尔杜邦公司
CPC分类号： C12P7/6472 , C12P7/6427 , C12P7/6463
摘要： 公开了通过降低异源三聚SNF1蛋白激酶活性提高真核细胞中总脂质含量、多不饱和脂肪酸总含量[“PUFA”]、和/或去饱和脂肪酸对饱和脂肪酸的比率的方法。优选地，编码SNF1蛋白激酶的Snf1χ-亚基、Gal83β-亚基或Snf4 γ-亚基的染色体基因、编码Sak1、Hxk2、Glk1或Reg1的上游调节基因、或编码Rme1、Cbr1或Snf3的下游基因在含油酵母解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)的PUFA生产菌株中被操纵，导致其总脂质含量高于包含异源三聚SNF1蛋白激酶活性不降低的亲本菌株。
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公开(公告)号：CN102459627A
公开(公告)日：2012-05-16
申请号：CN201080026825.0
申请日：2010-06-14
申请人： 纳幕尔杜邦公司
CPC分类号： C12P7/6481 , C12N9/1029 , C12N15/815 , C12P7/6427 , C12P7/6472
摘要： 基于酰基-辅酶A：溶血磷脂酰基转移酶[“LPLAT”](例如Ale1、LPAAT、LPCAT)的过表达，本文提供了用于在生产长链多不饱和脂肪酸[“LC-PUFA”]的含油重组微生物宿主细胞中提高C18-C20延伸转化效率和/或Δ4去饱和转化效率的方法。生产宿主细胞和通过本发明的方法生产的油类也受权利要求书保护。
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公开(公告)号：CN102171345A
公开(公告)日：2011-08-31
申请号：CN200980139225.2
申请日：2009-07-30
申请人： 纳幕尔杜邦公司
CPC分类号： C12N9/0083 , C12N9/0071 , C12P7/6427 , C12Y114/19003
摘要： 本发明涉及Δ6去饱和酶，它具有将亚油酸[“LA”；18:2ω-6]转化成γ-亚麻酸[“GLA”；18:3ω-6]和/或将α-亚麻酸[“ALA”；18:3ω-3]转化成十八碳四烯酸[“STA”；18:4ω-3]的能力。公开了包含此类编码Δ6去饱和酶的片段的分离核酸片段和重组构建体、以及使用这些在含油酵母中的Δ6去饱和酶制备长链多不饱和脂肪酸[“PUFA”]的方法。
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公开(公告)号：CN102197047B
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN200980136806.0
申请日：2009-09-18
申请人： 纳幕尔杜邦公司
IPC分类号： C07K14/00
CPC分类号： C12N9/0071 , C12P7/6427
摘要： 本发明涉及突变Δ5去饱和酶，其具有使二高-γ亚麻酸[DGLA；20:3ω-6]转化为花生四烯酸[ARA；20:4ω-6]和/或使二十碳四烯酸[ETA；20:4ω-3]转化为二十碳五烯酸[EPA；20:5ω-3]的能力并且在细胞色素b5-样结构域的HPGG基序中有至少一个突变。公开了分离的核酸片段和包含编码Δ5去饱和酶的此类片段的重组构建体，以及用这些突变Δ5去饱和酶在含油酵母中制备长链多不饱和脂肪酸[“PUFAs”]的方法。
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公开(公告)号：CN102171345B
公开(公告)日：2013-09-25
申请号：CN200980139225.2
申请日：2009-07-30
申请人： 纳幕尔杜邦公司
CPC分类号： C12N9/0083 , C12N9/0071 , C12P7/6427 , C12Y114/19003
摘要： 本发明涉及Δ6去饱和酶，它具有将亚油酸[“LA”；18:2ω-6]转化成γ-亚麻酸[“GLA”；18:3ω-6]和/或将α-亚麻酸[“ALA”；18:3ω-3]转化成十八碳四烯酸[“STA”；18:4ω-3]的能力。公开了包含此类编码Δ6去饱和酶的片段的分离核酸片段和重组构建体、以及使用这些在含油酵母中的Δ6去饱和酶制备长链多不饱和脂肪酸[“PUFA”]的方法。
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公开(公告)号：CN102803289A
公开(公告)日：2012-11-28
申请号：CN201080026332.7
申请日：2010-06-14
申请人： 纳幕尔杜邦公司
IPC分类号： C07K14/195
CPC分类号： C12P7/6472 , C12N15/52 , C12P7/6409
摘要： 本发明描述了含油酵母解脂耶氏酵母的工程化的菌株，所述菌株能够生产包含按总脂肪酸的重量百分比计的[“％TFA”]高于50重量％的二十碳五烯酸[“EPA”](一种ω-3多不饱和脂肪酸)，并且具有至少3.1的EPA％TFA对亚油酸比值(以％TFA测量)的油。这些菌株除其他异源的Δ9延伸酶、Δ8去饱和酶、Δ5去饱和酶、Δ17去饱和酶、Δ12去饱和酶、C16/18延伸酶外，还过表达至少一种Δ9延伸酶/Δ8去饱和酶复合酶，并任选地过表达二酰基甘油胆碱磷酸转移酶、丙二酰-辅酶A合成酶和/或酰基-辅酶A溶血磷脂酰基转移酶。至少一种过氧化物酶体生物合成因子蛋白的表达被下调。主张了在所述宿主细胞中生产EPA的方法、从所述细胞获得的油、和由此生产的产品。
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公开(公告)号：CN102216464A
公开(公告)日：2011-10-12
申请号：CN200980143092.6
申请日：2009-08-28
申请人： 纳幕尔杜邦公司
CPC分类号： C12P7/6472 , C12P7/6427 , C12P7/6463
摘要： 公开了通过降低异源三聚SNF1蛋白激酶活性提高真核细胞中总脂质含量、多不饱和脂肪酸总含量[“PUFA”]、和/或去饱和脂肪酸对饱和脂肪酸的比率的方法。优选地，编码SNF1蛋白激酶的Snf1χ-亚基、Gal83β-亚基或Snf4 γ-亚基的染色体基因、编码Sak1、Hxk2、Glk1或Reg1的上游调节基因、或编码Rme1、Cbr1或Snf3的下游基因在含油酵母解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)的PUFA生产菌株中被操纵，导致其总脂质含量高于包含异源三聚SNF1蛋白激酶活性不降低的亲本菌株。
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