公开(公告)号：CN108949744A

公开(公告)日：2018-12-07

申请号：CN201810703504.8

申请日：2018-06-15

申请人： 翁炳焕

发明人： 翁炳焕 ,  苏岚 ,  袁武锋 ,  杜雨轩 ,  王薇 ,  应俊

IPC分类号： C12N15/08 ,  C12N5/077

CPC分类号： C12N15/02 ,  C12N5/0652

摘要： 一种用于医学领域的淋系白血病融合基因检测质控参考株的制备，其特征在于，引用了B淋巴细胞刺激因子，增加了以B淋巴细胞刺激因子为诱导剂的骨髓细胞融合前培养步骤，以促使淋巴细胞系各期细胞的定向分化、增量和成熟，从而增加淋巴细胞系的融合率，而且B淋巴细胞刺激因子参与了骨髓细胞融合、杂交细胞筛选及其克隆化传代扩增的全程诱导，有利于各期淋巴细胞的分化，由此制备出能在体外无限扩增的由人骨髓细胞与鼠骨髓瘤细胞融合而制成的淋系白血病融合基因检测质控参考株，经融合基因的验证，应用于淋巴细胞白血病融合基因检测的质量控制。

公开(公告)号：CN104419724A

公开(公告)日：2015-03-18

申请号：CN201310403992.8

申请日：2013-09-01

申请人： 翁炳焕

发明人： 翁炳焕 ,  黄荷凤 ,  徐晨明 ,  鲁林荣 ,  袁武锋 ,  张燕

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C40B50/06 ,  C40B40/02

摘要： 本发明涉及用于医学研究领域的SV40LT基因诱导T淋巴细胞模型及其细胞库的构建，其主要特征是按常规以T4DNA连接酶、BamHI、pcDNA3.1(-)DNA及SV40LTag DNA构建SV40LTag-pcDNA3.1(-)重组子、以感受态大肠杆菌纯化重组子、以脂质体转染法将其导入体外培养的T淋巴细胞，使重组子与细胞的DNA整合，以G418筛选的含阳性重组子的细胞，作传代、扩大培养，筛选细胞形态、细胞生长曲线、染色体核型、裸鼠致瘤试验、转染细胞DNA中SV40大T基因检测、mRNA表达产物测定及DNA序列测定结果符合永生化细胞生物特性者作为T淋巴细胞模型冻存于液氮中，以此构建SV40LT基因诱导T淋巴细胞模型及其细胞库，以建立在体外长期传代培养T淋巴细胞的方法并用于体外研究T淋巴细胞免疫机制。