融合蛋白的应用和细胞融合的方法

    公开(公告)号:CN116334070A

    公开(公告)日:2023-06-27

    申请号:CN202310116463.3

    申请日:2023-02-15

    申请人: 天津大学

    摘要: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及融合蛋白的应用和细胞融合的方法。本发明提供了DENV2E蛋白和VSV G蛋白在酿酒酵母原生质体与哺乳动物细胞的融合中的应用,所述哺乳动物细胞包括HEK293T。与PEG介导的融合相比,本发明制备的FUS1与HEK293T融合效率分别提高了5.25倍、5.83倍;本发明制备的FUS2与HEK293T的融合效率分别提高了1.31倍、2.78倍。

    均匀施加载荷的培养方法及生物反应器

    公开(公告)号:CN101130752A

    公开(公告)日:2008-02-27

    申请号:CN200710058576.3

    申请日:2007-08-03

    IPC分类号: C12M3/00 C12N15/08

    摘要: 本发明公开了一种均匀施加载荷的培养方法及生物反应器。包括具备O2、CO2和温度调节、细胞培养的培养箱,及保持培养液新鲜的灌流等条件和培养液中加入活性因子,其特征在于将培养物固定于培养室底板;在培养期间,培养物受到均匀滚动载荷和/或均匀滑动载荷作用,其中,滚动加载过程中不同锥度的滚体接触处可形成对培养物扭转载荷作用。本发明的有益效果是:均匀施加载荷促进培养物形态、结构的匀质生长,为培养物大批量培养、保证相同质量提供一种新方法。另外针对不同组织培养还可施加扭转载荷作用。如对关节软骨的培养,扭转载荷作用可反映活体关节伸曲时内旋与外旋的过程。此种加载条件更接近某些组织生长发育的力学环境。

    为转基因克隆动物提供高表达细胞核的方法

    公开(公告)号:CN101008016A

    公开(公告)日:2007-08-01

    申请号:CN200610048016.5

    申请日:2006-10-10

    摘要: 本发明提供一种为转基因克隆动物提供高表达细胞核的方法,解决载体中乳腺启动子难以在成纤维细胞中发挥作用,并且由此而产生的难以鉴别外源基因表达水平的问题;主要是采取细胞融合方法,用转染人生长激素基因的鼠胚成纤维细胞与具备分泌功能的人乳腺癌细胞株MCF-7/S细胞相融合,融合细胞具备了乳腺启动子(βLG)发挥作用的条件,使融合细胞分泌人生长激素;本发明暂时避开了一系列有待解决的理论问题,在融合后放免分析中即可筛选出在转基因细胞水平上表达量较高的细胞克隆作为核供体,简便易行,大大节省人力物力。

    人肝癌转移亚克隆细胞系及其建立方法

    公开(公告)号:CN1563376A

    公开(公告)日:2005-01-12

    申请号:CN200410019057.2

    申请日:2004-04-20

    申请人: 南开大学

    IPC分类号: C12N15/08 C12N13/00

    摘要: 本发明公开了一种人肝癌转移亚克隆细胞系及其建立方法,所述人肝癌转移亚克隆细胞系是用下述方法建立的:将人肝癌细胞H7402单细胞悬液接种于SCID鼠;确认转移部位为肺脏;原代培养;传代培养,当细胞传代到第三代以后,将培养液中的胎牛血清浓度降为10%,细胞生长良好,形态逐渐均一,即建立了一种来源于亲本人肝癌细胞H7402的肝癌转移亚克隆细胞系,并与亲本细胞形成配对关系,为肝癌细胞转移的研究提供新的实验材料;可用于筛选肝癌转移相关基因;可用于筛选肝癌转移相关蛋白;可用于筛选抗肿瘤转移药物;可用于肿瘤转移分子机理的研究;可用于进行肿瘤转移DNA疫苗的研究。

    多肽药物的高效基因工程生产方法

    公开(公告)号:CN1121411C

    公开(公告)日:2003-09-17

    申请号:CN99120613.4

    申请日:1999-12-13

    申请人: 刘建宁

    发明人: 孙自勇 刘建宁

    摘要: 本发明用真核或原核细胞表达低分子量多肽活性物质。在核酸水平上,利用DNA限制性内切酶中的同尾酶具有识别水解不同DNA序列,但产生相同的粘性末端,且当二者的粘性末端连接后,该位点不再能被同尾酶识别的特性,将编码目标肽段的DNA分子串联重复,构成多聚体,并根据目标肽段的氨基酸组成及序列特点,在各DNA单体分子间插入适当的核苷酸序列,这些特定的核苷酸序列在翻译为氨基酸后,成为使串联重复目标肽段的多聚体断裂为单体的加工位点。

    用于哺乳动物基因表达的人杂合宿主细胞

    公开(公告)号:CN1339063A

    公开(公告)日:2002-03-06

    申请号:CN99814299.9

    申请日:1999-12-08

    发明人: M·S·曹

    IPC分类号: C12N15/01 C12N15/02 C12N15/08

    CPC分类号: C12N5/163 C12N2510/02

    摘要: 人/人杂合细胞可通过人胚胎肾细胞(293S)和改良非洲淋巴瘤细胞(2B8)的融合制备。融合细胞可用作重组表达哺乳动物基因的宿主细胞。使用这些称作HKB的人肾-和B-细胞杂合克隆进行哺乳动物基因表达的优势包括(ⅰ)细胞是免疫球蛋白表达阴性的,(ⅱ)细胞在摇瓶或发酵罐中的无血浆蛋白的培养基(添加或不添加重组胰岛素)中作为悬浮培养物容易培养,(ⅲ)细胞极易为DNA转染,以及(ⅳ)细胞分泌高水平异源重组蛋白,如重组单克隆抗体、可溶性ICAM-1、rIL-4和rFVIII。

    向植物细胞中导入外源DNA的方法及由其获得的融合细胞

    公开(公告)号:CN116987690A

    公开(公告)日:2023-11-03

    申请号:CN202210450378.6

    申请日:2022-04-26

    IPC分类号: C12N15/08 C12N15/09

    摘要: 本发明提供了一种向植物细胞中导入外源DNA的方法及由其获得的融合细胞。其中,所述方法包括:(1)分别获得拟南芥原生质体和酵母原生质体:(2)将拟南芥原生质体与酵母原生质体混匀,使发生融合;其中,所述酵母原生质体与所述拟南芥原生质体的用量比为(40~60):1。本发明突破性地实现了酵母和拟南芥细胞的融合技术,并能实现后续融合培养物的稳定培养,后续细胞再生培养可形成细胞团,且细胞状态正常。本发明为实现植物大尺度片段DNA的转移和植物人工染色体的合成奠定了关键技术基础,也为研究不同细胞融合机制提供了一种新模型。

    一种SP2/0无血清驯化培养方法
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116875552A

    公开(公告)日:2023-10-13

    申请号:CN202311093335.8

    申请日:2023-08-29

    发明人: 朱晓黎

    IPC分类号: C12N5/09 C12N5/20 C12N15/08

    摘要: 本发明公开了一种SP2/0无血清驯化培养方法,以速降贴壁培养驯化方式从血清浓度10%下降到3%;再转为缓降悬浮培养方式,从血清浓度3%下降为0;同步测试1640/CD‑051:1配比的培养基配方,并额外加入8ug/ml转铁蛋白,6ug/ml胰岛素,12umol/L乙醇胺及HEPES、牛血清白蛋白诸种添加剂成分,从而成功驯化出一株悬浮培养的无血清SP2/0细胞,后期在细胞融合阶段验证成功。本发明基于对SP2/0细胞的降血清和无血清驯化,挑选优化合适的培养基组合,添加补充成分,改变培养方式,从源头上解决了含血清培养导致的各种后续风险,大大降低鼠单抗开发的成本,提高开发成功率。