公开(公告)号：CN109234316B

公开(公告)日：2021-02-09

申请号：CN201811113109.0

申请日：2018-09-25

申请人： 肇庆华夏凯奇生物技术有限公司

发明人： 黄行许 ,  王新 ,  贾堃

IPC分类号： C12N15/90 ,  C12N15/89 ,  C12N9/22

摘要： 通过多条sgRNA共注射实现同一基因有效敲除。敲除方法包括：选定待敲除基因的编码区的至少两个目标序列，使其分别包含完整的目标密码子CAA、CAG或CGA；利用至少两个sgRNA序列来将BE3定位到相应的目标序列以使目标密码子中的目标单碱基C变成T从而相应引入终止密码子TAA或TAG、TGA以实现基因敲除；所述至少两个sgRNA序列为分别与所述至少两个目标序列互补对应的序列，其中所述至少两个sgRNA被共注射以实现同一基因的有效敲除。本发明提供了一种更高效，且具有高精确性和低脱靶效应的基因敲除方法。

公开(公告)号：CN112322655B

公开(公告)日：2023-06-30

申请号：CN202011136279.8

申请日：2020-10-22

申请人： 肇庆华夏凯奇生物技术有限公司 ,  肇庆市华师大光电产业研究院

发明人： 黄行许 ,  李广磊 ,  王新 ,  欧单凤 ,  姜瑞韬

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/55 ,  C12N15/10

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种不受基因序列限制的碱基编辑系统及其制备方法和应用；本发明基于TALEN技术，利用胞嘧啶脱氨酶结合UGI，通过不同的条件实验，找到了可以对靶位点进行碱基编辑的体系，命名为TALEN‑BE。通过在报告系统和內源基因的数据表明，TALEN‑BE系统可以实现胞嘧啶转换为胸腺嘧啶。该编辑系统的出现极大的拓展了碱基编辑的应用范围，同时TALEN技术所涉及的序列长度相对较小，可以包装进入AAV载体，从而对遗传疾病的基因治疗提供巨大的应用价值。

公开(公告)号：CN112779288A

公开(公告)日：2021-05-11

申请号：CN202110111949.9

申请日：2018-09-25

申请人： 肇庆华夏凯奇生物技术有限公司

发明人： 黄行许 ,  王新 ,  贾堃

IPC分类号： C12N15/85 ,  A01K67/027

摘要： 基因敲除及试剂盒。选定待敲除基因的编码区的至少两个目标序列，使其分别包含完整的目标密码子CAA、CAG或CGA；利用至少两个sgRNA序列来将BE3定位到相应的目标序列以使目标密码子中的目标单碱基C变成T从而相应引入终止密码子TAA或TAG、TGA以实现基因敲除；所述至少两个sgRNA序列为分别与所述至少两个目标序列互补对应的序列，其中所述至少两个sgRNA被共注射以实现同一基因的有效敲除。本发明提供了一种更高效，且具有高精确性和低脱靶效应的基因敲除方法。

公开(公告)号：CN112322655A

公开(公告)日：2021-02-05

申请号：CN202011136279.8

申请日：2020-10-22

申请人： 肇庆华夏凯奇生物技术有限公司 ,  肇庆市华师大光电产业研究院

发明人： 黄行许 ,  李广磊 ,  王新 ,  欧单凤 ,  姜瑞韬

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/55 ,  C12N15/10

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种不受基因序列限制的碱基编辑系统及其制备方法和应用；本发明基于TALEN技术，利用胞嘧啶脱氨酶结合UGI，通过不同的条件实验，找到了可以对靶位点进行碱基编辑的体系，命名为TALEN‑BE。通过在报告系统和內源基因的数据表明，TALEN‑BE系统可以实现胞嘧啶转换为胸腺嘧啶。该编辑系统的出现极大的拓展了碱基编辑的应用范围，同时TALEN技术所涉及的序列长度相对较小，可以包装进入AAV载体，从而对遗传疾病的基因治疗提供巨大的应用价值。