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公开(公告)号：CN119307532A
公开(公告)日：2025-01-14
申请号：CN202411374349.1
申请日：2024-09-29
Applicant: 苏州泓迅生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种高产GPP/FPP酿酒酵母工程菌株及其构建方法和应用，涉及合成生物学技术领域。本发明通过基因编辑技术，在酿酒酵母中引入异源的mvaE和mvaS基因，过表达内源的ERG12、ERG8、ERG19和ERG20基因，强化酿酒酵母细胞内MVA途径的代谢通量；同时，将上述基因加上过氧化物酶体的定位信号标签，在过氧化物酶体中重构MVA途径及萜类化合物前体合成路径，实现萜类化合物前体的区室化合成。此外，本发明还引入了异源的MthIPKs基因，构建IPP合成的分支通路，具有更高的能量效率、更少的酶促反应，集中MVA途径和萜类化合物合成的代谢流，进一步提高生物合成的效率和转化率。
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公开(公告)号：CN117587057A
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202311589727.3
申请日：2023-11-27
Applicant: 苏州泓迅生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种大片段DNA的酵母高效组装方法及其应用，涉及分子生物学与合成生物学技术领域。本发明通过在酵母载体上插入α‑半乳糖苷酶的MEL1基因表达盒，使转入表达盒质粒的酿酒酵母在X‑α‑Gal的平板上可以呈现出肉眼可见的蓝色菌落，便于区分重组过程中的正确阳性克隆和假阳性克隆，有效降低筛选工作量，缩短周期，且筛选成功率高达92.7％。本发明肉眼可见的蓝色、白色菌落可作为自动化设备的挑斑条件，可提升自动化筛选的效率和通量，极大增加了酵母TAR技术应用于自动化流程的可行性。
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公开(公告)号：CN116769814B
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202310717222.4
申请日：2023-06-16
Applicant: 苏州泓迅生物科技股份有限公司
Abstract: 景，具有极大的市场前景。本发明提供了一种大肠杆菌益生菌T7表达系统及其应用，以大肠杆菌益生菌Nissle1917(EcN)为原始菌株，通过基因编辑技术将噬菌体T7RNA聚合酶编码基因整合到EcN基因组中，获得EcN‑T7表达菌株，使之能够“无缝适配”目前最广泛应用的大肠杆菌表达载体；并且在EcN‑T7基础上对内毒素合成路径相关基因进行敲除，进一步降低改造菌株的内毒素水平。本发明构建的大肠杆菌益生菌T7表达系统能够高效表达外源基因，并且极大的降低了内毒素水平，不会引起细胞的(56)对比文件Comalada."MODULATION OF THE IMMUNERESPONSE WITH THE PROBIOTIC ESCHERICHIACOLI NISSLE 1917 IN LPS-INDUCED SEPTICSHOCK IN MICE"《.METHODS AND FINDINGS INEXPERIMENTAL AND CLINICAL PHARMACOLOGY》.2008,第30卷130-130.Gorzelak 等."Molecular Basis ofEssentiality of Early Critical Steps inthe Lipopolysaccharide Biogenesis inEscherichia coli K-12: Requirement ofMsbA, Cardiolipin, LpxL, LpxM and GcvB".《INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULARSCIENCES》.2021,第22卷(第10期),5099.Cheng 等."Integration of MultiplePhage Attachment Sites System to Createthe Chromosomal T7 System for ProteinProduction in Escherichia coli Nissle1917"《.JOURNAL OF AGRICULTURAL AND FOODCHEMISTRY》.2022,第70卷(第33期),10239-10247.王东宁 等.“东方鲎C因子的分段克隆及表达”《.生物化学与生物物理学报》.2002,(第1期),77-82.李晓妹.“构建双功能菌株合成肝素前体多糖和磺基转移酶的研究”《.中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》.2022,(第2期),摘要第2段，第19页图2.2，第20页第1段，第21页第1段、图2.5.王凯航.“一种内毒素合成途径抑制的整合表达型大肠杆菌菌株的构建及应用”《.中国博士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》.2021,(第8期),E059-5.
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公开(公告)号：CN116769814A
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202310717222.4
申请日：2023-06-16
Applicant: 苏州泓迅生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种大肠杆菌益生菌T7表达系统及其应用，以大肠杆菌益生菌Nissle1917(EcN)为原始菌株，通过基因编辑技术将噬菌体T7RNA聚合酶编码基因整合到EcN基因组中，获得EcN‑T7表达菌株，使之能够“无缝适配”目前最广泛应用的大肠杆菌表达载体；并且在EcN‑T7基础上对内毒素合成路径相关基因进行敲除，进一步降低改造菌株的内毒素水平。本发明构建的大肠杆菌益生菌T7表达系统能够高效表达外源基因，并且极大的降低了内毒素水平，不会引起细胞的免疫反应，简化了下游应用的操作，降低了生产成本，且能够拓展大肠杆菌活菌制剂的应用场景，具有极大的市场前景。
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公开(公告)号：CN115960733A
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202211134853.5
申请日：2022-09-19
Applicant: 苏州泓迅生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种用于大片段DNA组装的基因工程酵母菌、构建方法及其应用，涉及分子生物学与合成生物学技术领域。本发明提供了一种用于大片段DNA组装的基因工程酵母菌Synbio‑Sc1、Synbio‑Sc2和Synbio‑Sc3。经实验证实，本发明的基因工程酵母菌能够高效组装高达60kb的大片段DNA，组装效率高达63.5％～93.8％，极大的提升了大片段DNA的组装效率和合成上限，同时也可降低生产成本，对于基因合成与合成生物学DNA构建的工业研究与生产具有重要意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114717207A
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN202210436102.2
申请日：2022-04-25
Applicant: 苏州泓迅生物科技股份有限公司
IPC: C12N9/00 , C12N9/16 , C12N9/14 , C07K14/395 , C12N15/55 , C12N15/31 , C12N9/12 , C12P19/34 , C12N15/12 , C12N15/13 , C12N15/50
Abstract: 本发明提供了一种酵母细胞同源重组酶系、DNA体外组装试剂及其应用，属于分子生物学与合成生物学技术领域。本发明提供利用酵母细胞同源重组酶系以及部分原核细胞表达重组酶制备DNA体外组装试剂，利用所述DNA体外组装试剂对两端带有同源臂的DNA片段进行体外组装，实现快速体外单链DNA与双链DNA组装构建。实验证明，本发明提供的方法在1h内单次可以实现4～40条单链引物或2～6个双链片段的无缝组装，具有高效快速特点，较Gibsonassembly组装具有明显优势。
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公开(公告)号：CN118773255A
公开(公告)日：2024-10-15
申请号：CN202411167410.5
申请日：2024-08-23
Applicant: 苏州泓迅生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种重组全长III型人源化胶原蛋白的制备方法及应用，涉及基因工程与蛋白质工程技术领域。本发明将人III型胶原蛋白α1链成熟肽氨基酸全长序列通过基因工程密码子序列优化与表达载体合成后，转入HEK293F宿主细胞进行重组表达，获得分泌高表达菌株或细胞株，产物经纯化后获得重组全长III型人源化胶原蛋白。本发明通过合成生物学工程化策略，成功实现了重组全长III型人源化胶原蛋白的高效制备，通过密码子优化和重组载体设计，显著提高了胶原蛋白在HEK293F细胞中的表达水平；所得重组胶原蛋白在修复与再生医学、医学美容填充材料以及功能性化妆品材料中具有广泛应用潜力。
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公开(公告)号：CN115960733B
公开(公告)日：2023-11-24
申请号：CN202211134853.5
申请日：2022-09-19
Applicant: 苏州泓迅生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种用于大片段DNA组装的基因工程酵母菌、构建方法及其应用，涉及分子生物学与合成生物学技术领域。本发明提供了一种用于大片段DNA组装的基因工程酵母菌Synbio‑Sc1、Synbio‑Sc2和Synbio‑Sc3。经实验证实，本发明的基因工程酵母菌能够高效组装高达60kb的大片段DNA，组装效率高达63.5％～93.8％，极大的提升了大片段DNA的组装效率和合成上限，同时也可降低生产成本，对于基因合成与合成生物学DNA构建的工业研究与生产具有重要意义。
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公开(公告)号：CN116837053A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310729480.4
申请日：2023-06-20
Applicant: 苏州泓迅生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种无细胞体系全酶法微环DNA的制备方法及其应用，通过构建含有基因治疗表达框架的重组质粒，经过聚合酶体外扩增，在整合酶的作用下分离成微环DNA和骨架载体，然后利用限制性内切酶将骨架载体切除线性DNA，再用核酸外切酶进一步降解掉线性DNA，达到彻底去除骨架载体的目的，从而获得高纯度的微环DNA。本发明采用无细胞体系的全酶法DNA复制体系制备高纯度微环DNA，较细胞内制备方法具有重复性好、纯度高、成本低的优势。
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公开(公告)号：CN114717207B
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202210436102.2
申请日：2022-04-25
Applicant: 苏州泓迅生物科技股份有限公司
IPC: C12N9/00 , C12N9/16 , C12N9/14 , C07K14/395 , C12N15/55 , C12N15/31 , C12N9/12 , C12P19/34 , C12N15/12 , C12N15/13 , C12N15/50
Abstract: 本发明提供了一种酵母细胞同源重组酶系、DNA体外组装试剂及其应用，属于分子生物学与合成生物学技术领域。本发明提供利用酵母细胞同源重组酶系以及部分原核细胞表达重组酶制备DNA体外组装试剂，利用所述DNA体外组装试剂对两端带有同源臂的DNA片段进行体外组装，实现快速体外单链DNA与双链DNA组装构建。实验证明，本发明提供的方法在1h内单次可以实现4～40条单链引物或2～6个双链片段的无缝组装，具有高效快速特点，较Gibsonassembly组装具有明显优势。
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