东莨菪内酯的酶法制备方法
    6.
    发明公开

    公开(公告)号:CN115927500A

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202211038918.6

    申请日:2022-08-29

    Abstract: 本发明涉及一种东莨菪内酯的酶法制备方法,具体包括先制备含有F6’H1基因和阿魏酰辅酶A合成酶基因的重组基因工程菌;再将重组基因工程菌活化、发酵后,以阿魏酸为底物再发酵培养转化得东莨菪内酯。经基因序列优化后,本发明首次将阿魏酰辅酶A合成酶和F6’H1酶同时构建在大肠杆菌中且实现二者同时高效的功能性共表达。建立了以价格低廉、安全低毒可持续的阿魏酸为底物,通过“两个酶‑两步催化‑一锅合成”的方式快速高效便捷合成具有高附加值的产物东莨菪内酯。本发明以1mM阿魏酸为底物催化12h后,生产摩尔产率达到86.5%,获得以阿魏酸为底物生产东莨菪内酯最高产量166.28mg/L,催化过程简单、环保,具有广阔的工业化应用前景。

    6-甲基香豆素在杀蚜剂中的应用及其杀蚜剂

    公开(公告)号:CN112293417A

    公开(公告)日:2021-02-02

    申请号:CN202011217173.0

    申请日:2020-11-04

    Applicant: 西南大学

    Abstract: 本发明公开了6‑甲基香豆素在杀蚜剂中的应用及其杀蚜剂,属于农药领域,6‑甲基香豆素杀蚜剂用于杀死叶蚜类害蚜,尤其是针对棉蚜、桃蚜、萝卜蚜、甘蓝蚜或瓜蚜,所述杀蚜剂包括6‑甲基香豆素、溶剂、乳化剂、增溶剂。本发明制备的含有6‑甲基香豆素的杀蚜剂与其他商品杀蚜剂相比,杀蚜效果不相上下,具有广阔的开发前景和应用价值,是一种有效可行的新型杀蚜剂。同时6‑甲基香豆素来源广泛、制备工艺简单,有利于降低杀蚜剂成本,利于推广。

    朱砂叶螨钙调蛋白基因的克隆、原核表达和蛋白纯化方法

    公开(公告)号:CN111394359A

    公开(公告)日:2020-07-10

    申请号:CN202010208089.6

    申请日:2020-03-23

    Applicant: 西南大学

    Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,尤其涉及朱砂叶螨钙调蛋白基因的克隆、原核表达和蛋白纯化方法,通过提取朱砂叶螨的总RNA,转录获得其cDNA,采用RT-PCR方法从朱砂叶螨中扩增出特有基因朱砂叶螨钙调蛋白基因,克隆测序后,以获得的朱砂叶螨钙调蛋白基因全长为模板,用CaM上下游引物扩增获得目的片段,分别使用Bam HI和Sma I酶切pGEX-6P-1(+)载体和目的片段,利用同源重组的方法将目的片段连接到载体上,抽提获得TcCaM-pGEX-6P-1(+)质粒,转入BL21感受态细胞中,进行IPTG诱导蛋白表达,采用SDS-PAGE鉴定获得分子量为19kDa的朱砂叶螨钙调蛋白。本发明构建了朱砂叶螨钙调蛋白基因的重组表达载体,通过原核系统表达了钙调蛋白的重组蛋白,为今后朱砂叶螨钙调蛋白基因的体外研究奠定了基础。

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