适用于家蚕表达的改造具有促进细胞增殖因子基因及其表达载体和应用

    公开(公告)号:CN108642059A

    公开(公告)日:2018-10-12

    申请号:CN201810421158.4

    申请日:2018-05-04

    申请人: 西南大学

    IPC分类号: C12N15/12 C12N15/85

    摘要: 本发明涉及适用于家蚕表达的改造具有促进细胞增殖因子基因及其表达载体和应用,该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,其编码的氨基酸如SEQ ID NO.1所示,将改造具有促进细胞增殖因子基因与分泌型丝胶1基因启动子和分泌型丝胶1基因终止子构成表达框,并用增强子hr3增强表达,同时连入piggyBac转座臂和荧光筛选标记基因构建表达系统,该表达系统能够在家蚕丝腺中高效表达具有活性的促进细胞增殖因子,获得具有促进细胞增殖的蚕丝,有巨大的开发价值。

    家蚕PABP结合蛋白互作因子基因BmPaip1及其重组表达载体和应用

    公开(公告)号:CN103060334A

    公开(公告)日:2013-04-24

    申请号:CN201310030799.4

    申请日:2013-01-28

    申请人: 西南大学

    IPC分类号: C12N15/12 C12N15/63 C12N15/85

    摘要: 本发明公开了家蚕PABP结合蛋白互作因子基因BmPaip1,其核酸序列如SEQIDNO.3所示,该基因的编码框长1194bp,由8个外显子构成,编码398个氨基酸,理论蛋白分子量为44kDa,等电点pI=5.02;通过SMART在线软件分析发现家蚕BmPaip1的氨基酸序列中第100至398位与真核生物的eIF4G蛋白高度同源,通过在昆虫细胞中表达检测,发现转家蚕BmPaip1基因的细胞中能显著提高报告基因LUC的表达水平,因此家蚕BmPaip1基因能够与eIF4E和eIF4A结合形成翻译起始复合物,可以用于提高外源基因的翻译效率。

    具有促进细胞增殖活性的FGF1丝胶蛋白凝胶的制备方法及其产品

    公开(公告)号:CN108578771A

    公开(公告)日:2018-09-28

    申请号:CN201810301860.7

    申请日:2018-04-04

    申请人: 西南大学

    摘要: 本发明涉及具有促进细胞增殖活性的FGF1丝胶蛋白凝胶的制备方法及其产品,其制备方法步骤如下:利用转人FGF1基因蚕丝提取含人FGF1蛋白的丝胶蛋白,得含人FGF1蛋白的丝胶蛋白溶液,然后经复性后再用水透析得FGF1丝胶蛋白水溶液,离心获得FGF1丝胶蛋白水凝胶,然后在4℃放置,化学交联剂交联或诱导剂诱导形成FGF1丝胶蛋白凝胶材料,值得的凝胶材料具有促进细胞增殖的活性,在组织工程学中具有广阔的应用潜力。

    改造的人酸性成纤维细胞生长因子基因及其重组载体和应用

    公开(公告)号:CN104513821B

    公开(公告)日:2017-06-06

    申请号:CN201310450300.5

    申请日:2013-09-27

    申请人: 西南大学

    摘要: 本发明公开了一种改造的人酸性成纤维细胞生长因子基因,其核苷酸序列如SEQ IDNO.1第25位至第450位所示,该序列根据家蚕的密码子偏好性进行设计,能够在家蚕中正常表达和翻译;本发明还公开了含改造的人酸性成纤维细胞生长因子基因的重组载体,该重组表达载体含有增强子hr3和分泌型丝胶1基因启动子Ser1,能够在家蚕中部丝腺细胞特异表达人酸性成纤维细胞生长因子,并将重组蛋白分泌至蚕丝的丝胶层中,其获得的蚕丝具有生物活性,直接使用具有促进细胞增殖的功能,是一种良好的医用材料。

    实现家蚕转基因长期稳定性的piggyBac载体及其制备方法

    公开(公告)号:CN103923941B

    公开(公告)日:2016-08-24

    申请号:CN201410177428.3

    申请日:2014-04-29

    申请人: 西南大学

    IPC分类号: C12N15/85 C12N15/66

    摘要: 本发明公开了实现家蚕转基因长期稳定性的piggyBac载体及其制备方法,piggyBac载体含有3个末端反向重复序列,位于中间位置的末端反向重复序列为193bp且与左侧末端反向重复序列的方向相同,其制备方法简单,制得的piggyBac载体在转座酶的作用下外侧2个末端反向重复序列插入到家蚕基因组中,然后由转座酶激活中间位置的末端反向重复序列和右侧末端反向重复序列,进而删除中间位置的转座子,从而剩下只有一个末端反向重复序列的转座子,该转座子不能被转座酶激活,从而长期稳定存在于宿主中,实现转基因的长期稳定性;为转基因家蚕素材在实际生产中提供稳定性保障。