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公开(公告)号：CN1230530C
公开(公告)日：2005-12-07
申请号：CN01812996.X
申请日：2001-07-17
申请人： 诺和酶股份有限公司
CPC分类号： C12N9/88
摘要： 本发明公开了具有β-螺旋结构的细胞壁降解酶的变体，该变体在如下方式确定的位置中具有至少一个替代，所述方式是：鉴定可能属于堆积的所有残基；将该堆积表征为内部的或外部的；基于亲代或野生型酶堆积残基的主要特征和/或其相对于β-螺旋的取向(内部的或外部的)，将该堆积表征为极性的、疏水性的或芳香族/杂芳香族的；将堆积中的所有堆积位置优化为疏水性脂肪族氨基酸、疏水性芳香族氨基酸或极性氨基酸，实施方式是将一个或所有位置突变为属于以上其中一组的氨基酸；通过DSC或应用相关试验如浸轧汽蒸染色应用试验，测量变体的热稳定性；然后选择稳定化的变体。优选当与包含SEQ ID NO：2氨基酸序列的果胶酸裂解酶比对时具有保守氨基酸残基D111、D141或E141、D145、K165、R194和R199的野生型亲代果胶酸裂解酶(EC 4.2.2.2)的变体。
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公开(公告)号：CN1443237A
公开(公告)日：2003-09-17
申请号：CN01812996.X
申请日：2001-07-17
申请人： 诺和酶股份有限公司
CPC分类号： C12N9/88
摘要： 本发明公开了具有β－螺旋结构的细胞壁降解酶的变体，该变体在如下方式确定的位置中具有至少一个替代，所述方式是：鉴定可能属于堆积的所有残基；将该堆积表征为内部的或外部的；基于亲代或野生型酶堆积残基的主要特征和/或其相对于β－螺旋的取向(内部的或外部的)，将该堆积表征为极性的、疏水性的或芳香族/杂芳香族的；将堆积中的所有堆积位置优化为疏水性脂肪族氨基酸、疏水性芳香族氨基酸或极性氨基酸，实施方式是将一个或所有位置突变为属于以上其中一组的氨基酸；通过DSC或应用相关试验如浸轧汽蒸染色应用试验，测量变体的热稳定性；然后选择稳定化的变体。优选当与包含SEQ ID NO：2氨基酸序列的果胶酸裂解酶比对时具有保守氨基酸残基D111、D141或E141、D145、K165、R194和R199的野生型亲代果胶酸裂解酶(EC 4.2.2.2)的变体。
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