公开(公告)号：CN101602728B

公开(公告)日：2011-07-20

申请号：CN200910065455.0

申请日：2009-07-16

申请人： 郑州大学

发明人： 张秋荣 ,  刘宏民 ,  曹云峰 ,  侯桂琴 ,  王丽 ,  王俊魏

IPC分类号： C07D231/34 ,  C07D231/32 ,  A61K31/4152 ,  A61P35/00

摘要： 本发明属于药物化学合成技术领域，公开了具有抗肿瘤活性的N-取代苯环的3，5-吡唑二酮化合物、其合成方法及其用途。本发明化合物具有通式I结构，式中R1为氢、间甲基、对甲基、对位氯、对位溴；R2为对位苄氧基、对位羟基、对位氯、对位溴；R3为正丁基、异丁基、环丙甲基、苄基；R4为氢或羟基。该化合物用于治疗肿瘤疾病，经体外抗癌活性实验证明，该类化合物对多种肿瘤细胞具有明显的抑制和杀伤作用，开发成为新药后可作为活性成分可应用于临床预防和治疗癌症。

公开(公告)号：CN101954075B

公开(公告)日：2012-11-21

申请号：CN201010505085.0

申请日：2010-10-13

申请人： 郑州大学

发明人： 薛乐勋 ,  潘卫东 ,  李杰 ,  吕玉民 ,  侯桂琴

IPC分类号： A61K39/145 ,  C12N1/13 ,  C12N15/63 ,  A61P31/16

摘要： 本发明公开了一种转基因盐藻制备口服型禽流感疫苗的方法，尤其是将盐藻自身的调控元件引入并构建含有禽流感病毒HA、NA重组基因的双元表达载体，然后转化盐藻，经筛选和鉴定，确定高表达重组C3d-H5N1融合蛋白的盐藻转化藻株。再通过稳定表达C3d-H5N1融合蛋白转化藻株的放大和大规模开放培养，离心收集藻细胞，冷冻干燥，无菌条件下分装、制备成口服型禽流感疫苗胶囊。本方法制备的盐藻转化藻株，可供开放培养，因此产量高、成本低，从而实现转基因盐藻制备口服型动物禽流感疫苗的规模化生产，满足市场需求。

公开(公告)号：CN102121026A

公开(公告)日：2011-07-13

申请号：CN201010583119.8

申请日：2010-12-11

申请人： 郑州大学

发明人： 薛乐勋 ,  潘卫东 ,  侯桂琴 ,  李杰 ,  曲东京 ,  贾岩龙

IPC分类号： C12N15/65

摘要： 一种杜氏盐藻叶绿体转化载体的构建，具体是以光非依赖性的原叶绿素酸酯还原酶chlN、chlB或者chlL基因为同源片段，以氯霉素乙酰转移酶基因（CAT）和除草剂草丁膦（PPT）的抗性基因bar为筛选标记，并以atpA启动子和rbcL终止子为表达元件，构建双交换双筛选标记杜氏盐藻叶绿体转化载体。通过基因枪法或者电激法转化杜氏盐藻，再经两步法筛选实现同质化，确保外源基因在杜氏盐藻叶绿体基因组的定点整合，最终获得稳定表达外源蛋白的叶绿体转化杜氏盐藻藻株。本发明选取chlN、chlB或者chlL基因作为同源片段，可作为转化子的辅助筛选标记；选择氯霉素抗性CAT基因和草丁膦抗性bar基因共同作为筛选标记基因，有利于在较短时间内获得稳定转化株。

公开(公告)号：CN101954075A

公开(公告)日：2011-01-26

申请号：CN201010505085.0

申请日：2010-10-13

申请人： 郑州大学

发明人： 薛乐勋 ,  潘卫东 ,  李杰 ,  吕玉民 ,  侯桂琴

IPC分类号： A61K39/145 ,  C12N1/13 ,  C12N15/63 ,  A61P31/16

摘要： 本发明公开了一种转基因盐藻制备口服型禽流感疫苗的方法，尤其是将盐藻自身的调控元件引入并构建含有禽流感病毒HA、NA重组基因的双元表达载体，然后转化盐藻，经筛选和鉴定，确定高表达重组C3d-H5N1融合蛋白的盐藻转化藻株。再通过稳定表达C3d-H5N1融合蛋白转化藻株的放大和大规模开放培养，离心收集藻细胞，冷冻干燥，无菌条件下分装、制备成口服型禽流感疫苗胶囊。本方法制备的盐藻转化藻株，可供开放培养，因此产量高、成本低，从而实现转基因盐藻制备口服型动物禽流感疫苗的规模化生产，满足市场需求。

公开(公告)号：CN102604968A

公开(公告)日：2012-07-25

申请号：CN201110022878.1

申请日：2011-01-20

申请人： 郑州大学

发明人： 薛乐勋 ,  王天云 ,  潘卫东 ,  王亚峰 ,  姬翔 ,  冯英才 ,  王鹏举 ,  柴玉荣 ,  侯桂琴

IPC分类号： C12N15/31 ,  C12N15/63 ,  C07K14/405 ,  C12Q1/68 ,  G01N33/53

摘要： 一种杜氏盐藻核基质附着区结合蛋白的制备和鉴定方法。利用简并寡核苷酸PCR法以及cDNA末端快速扩增法（RACE），能够获得新的杜氏盐藻核基质附着区结合蛋白的cDNA序列。该蛋白可在大肠杆菌和/或哺乳动物细胞中表达，它定位于细胞核，能够特异结合富含A/T的核基质附着区DNA，具有调控基因表达的功能，并可用于核基质附着区相关蛋白及其基因的筛选。由于盐藻具有遗传操作简单、成本低、可保证产品的活性和质量、便于食用、生物安全性高、环保等诸多优点，因此利用转基因盐藻生产药用蛋白，将具有很好的社会和经济效益。

公开(公告)号：CN101602728A

公开(公告)日：2009-12-16

申请号：CN200910065455.0

申请日：2009-07-16

申请人： 郑州大学

发明人： 刘宏民 ,  张秋荣 ,  曹云峰 ,  侯桂琴 ,  王丽 ,  王俊魏

IPC分类号： C07D231/34 ,  C07D231/32 ,  A61K31/4152 ,  A61P35/00

摘要： 本发明属于药物化学合成技术领域，公开了具有抗肿瘤活性的N－取代苯环的3，5－吡唑二酮化合物、其合成方法及其用途。本发明化合物具有通式I结构，式中R1为氢、间甲基、对甲基、对位氯、对位溴；R2为对位苄氧基、对位羟基、对位氯、对位溴；R3为正丁基、异丁基、环丙甲基、苄基；R4为氢或羟基。该化合物用于治疗肿瘤疾病，经体外抗癌活性实验证明，该类化合物对多种肿瘤细胞具有明显的抑制和杀伤作用，开发成为新药后可作为活性成分可应用于临床预防和治疗癌症。