公开(公告)号：CN108130314B

公开(公告)日：2022-05-17

申请号：CN201810067517.0

申请日：2018-01-24

Applicant: 郑州大学第一附属医院

Inventor： 张毅 ,  任飞飞 ,  李砺锋 ,  赵启泰 ,  李峰 ,  平玉

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/113 ,  C12N15/90

Abstract: 本申请属于单克隆细胞培养技术领域，具体涉及一种利用基因编辑技术构建稳定表达细胞系过程中的单克隆细胞培养方法专利申请事宜。该方法以CRISPR/Cas9基因编辑技术为基础，具体包括：利用CRISPR/Cas9技术对基因组进行编辑，利用3D软纤维蛋白基质胶对筛选所得细胞进行培养等步骤。总体而言，本发明将优化后的3D软纤维蛋白基质胶培养条件用于构建单克隆细胞群，大大提高了单细胞的存活率，从而快速筛选出基因修饰一致的，遗传背景完全一样的稳定转染细胞系。特别对于那些普通培养方法难以生长的细胞，具有明显的优势，从而有利于后续实验的进行。

公开(公告)号：CN107460251A

公开(公告)日：2017-12-12

申请号：CN201710894016.5

申请日：2017-09-28

Applicant: 郑州大学第一附属医院

Inventor： 张毅 ,  张超奇 ,  曹玲 ,  刘莎莎 ,  刘裕琳 ,  何谦益 ,  王乐 ,  任飞飞 ,  沈志博 ,  宋梦佳 ,  赵启泰

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6886 ,  C12Q2600/118 ,  C12Q2600/158

Abstract: 本发明属于检测试剂盒技术领域，具体涉及一种基于FUCA1基因的胶质母细胞瘤辅助诊断、预后评价试剂盒及其使用方法，所述试剂盒包括扩增FUCA1基因的PCR引物对和扩增管家基因GAPDH的PCR引物对。本发明首次发现FUCA1基因在LGG和GBM中的转录表达水平存在显著差异，同时FUCA1的表达水平可以很好的判断胶质母细胞瘤患者的预后，Cox多因素回归分析确认FUCA1可以作为胶质母细胞瘤独立判断预后的指标。即检测FUCA1基因转录水平的表达情况，可以诊断胶质瘤患者的恶性程度及预测患者预后情况。

公开(公告)号：CN108130314A

公开(公告)日：2018-06-08

申请号：CN201810067517.0

申请日：2018-01-24

Applicant: 郑州大学第一附属医院

Inventor： 张毅 ,  任飞飞 ,  李砺锋 ,  赵启泰 ,  李峰 ,  平玉

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/113 ,  C12N15/90

Abstract: 本申请属于单克隆细胞培养技术领域，具体涉及一种利用基因编辑技术构建稳定表达细胞系过程中的单克隆细胞培养方法专利申请事宜。该方法以CRISPR/Cas9基因编辑技术为基础，具体包括：利用CRISPR/Cas9技术对基因组进行编辑，利用3D软纤维蛋白基质胶对筛选所得细胞进行培养等步骤。总体而言，本发明将优化后的3D软纤维蛋白基质胶培养条件用于构建单克隆细胞群，大大提高了单细胞的存活率，从而快速筛选出基因修饰一致的，遗传背景完全一样的稳定转染细胞系。特别对于那些普通培养方法难以生长的细胞，具有明显的优势，从而有利于后续实验的进行。

公开(公告)号：CN107447041A

公开(公告)日：2017-12-08

申请号：CN201710893865.9

申请日：2017-09-28

Applicant: 郑州大学第一附属医院

Inventor： 张毅 ,  张超奇 ,  张震 ,  宋梦佳 ,  沈志博 ,  任飞飞 ,  何谦益 ,  赵启泰 ,  李红 ,  杨波 ,  樊锐太

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6886 ,  C12Q2600/158

Abstract: 本发明具体涉及一种基于CCL8、CCL26和CXCL6基因的胶质母细胞瘤联合诊断试剂盒及其使用方法，所述试剂盒包括扩增CCL8、CCL26和CXCL6基因的PCR引物对和扩增管家基因GAPDH的PCR引物对，本发明首次发现CCL8、CCL26和CXCL6基因在LGG和GBM中的转录表达水平存在显著差异，通过检测CCL8、CCL26和CXCL6基因转录水平的表达情况，进行联合诊断，可以判断胶质瘤患者的恶性程度。