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公开(公告)号：CN117551700A
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202311500698.9
申请日：2023-11-13
申请人： 郑州大学第一附属医院
IPC分类号： C12N15/89 , C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/12 , A01K67/027 , A61K49/00
摘要： 本发明属于生物技术领域，公开了一种FSGS疾病模型的构建方法及应用。本发明采用CRISPR/Cas9技术和同源重组原理构建出特异性敲除Wtap基因的Wtapfl/+鼠，将该鼠与Nphs2‑Cre工具鼠杂交后获得肾脏足细胞特异性Wtap基因敲除鼠，即为FSGS疾病模型。对此FSGS疾病模型进行肾脏组织病理学分析及体重、血糖、尿ACR等一般临床指标检测，发现该疾病模型呈现FSGS病理改变，如肾小球呈现局灶节段硬化、肾小球和肾间质纤维化、肾脏足细胞数量明显减少及肾小管蛋白管型。本发明成功构建了一种FSGS疾病模型，以期为FSGS病理机制研究提供理想的动物模型，同时为肾脏疾病发病机制、筛选预防或/和治疗肾脏疾病药物的研究提供模型保障。
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公开(公告)号：CN110547256B
公开(公告)日：2021-09-21
申请号：CN201910839052.0
申请日：2019-09-05
申请人： 郑州大学第一附属医院
IPC分类号： C12N15/115 , C12Q1/686 , A01K67/027
摘要： 本发明涉及肾脏足细胞特异敲除lncRNA DLX6‑os1转基因小鼠的培育方法，可有效解决在不同肾脏疾病中研究足细胞损伤的作用机制的问题，其解决的技术方案是，通过基因工程技术对前期建立的携带FLOX‑DLX6‑os1转基因小鼠与另一种携带足细胞特异的NPHS2‑Cre基因的转基因小鼠进行多代的繁殖杂交，实现肾脏足细胞特异敲除lncRNA DLX6‑os1转基因小鼠的培育，本发明为明确lncRNA DLX6‑os1在足细胞损伤中的作用提供了非常好的动物模型，有效解决在不同肾脏疾病中研究足细胞损伤的作用机制的问题，是转基因小鼠的培育方法上的创新。
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公开(公告)号：CN110547256A
公开(公告)日：2019-12-10
申请号：CN201910839052.0
申请日：2019-09-05
申请人： 郑州大学第一附属医院
IPC分类号： A01K67/027 , C12Q1/686
摘要： 本发明涉及肾脏足细胞特异敲除lncRNA DLX6-os1转基因小鼠的培育方法，可有效解决在不同肾脏疾病中研究足细胞损伤的作用机制的问题，其解决的技术方案是，通过基因工程技术对前期建立的携带FLOX-DLX6-os1转基因小鼠与另一种携带足细胞特异的NPHS2-Cre基因的转基因小鼠进行多代的繁殖杂交，实现肾脏足细胞特异敲除lncRNA DLX6-os1转基因小鼠的培育，本发明为明确lncRNA DLX6-os1在足细胞损伤中的作用提供了非常好的动物模型，有效解决在不同肾脏疾病中研究足细胞损伤的作用机制的问题，是转基因小鼠的培育方法上的创新。
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公开(公告)号：CN110117616A
公开(公告)日：2019-08-13
申请号：CN201910444912.0
申请日：2019-05-27
申请人： 郑州大学第一附属医院
IPC分类号： C12N15/85 , C12N15/90 , A01K67/027
摘要： 本发明涉及条件性敲除lncRNA DLX6-os1转基因小鼠的培育方法，有效解决作为动物模型，适用于不同组织器官中研究该lncRNA的作用问题，构建Dlx6-os1条件敲除载体，Dlx6-os1基因，转录物：Dlx6-os1-201 ENSMUST00000159568.5，位于小鼠6号染色体上的三个外显子，以三个外显子作为条件敲除区域；将C57BL/6小鼠基因文库中RP24-276P7 and RP24-260F14的BAC克隆作为模板，进行PCR；在目的载体中，Neo位点旁插入自删除锚定位点，基因敲除区域旁插入loxP位点，DTA阴性选择；与Cre酶介导的基因重组，得基因敲除质粒载体；将基因敲除质粒载体导入ES细胞中，与多种不同器官带有Cre酶的转基因小鼠杂交，得到在不同器官中降低DLX6-os1表达水平的阳性小鼠。本发明适用于在不同组织器官中研究该lncRNA的作用，开拓了对糖尿病诊断治疗的新途径。
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