公开(公告)号：CN114921497A

公开(公告)日：2022-08-19

申请号：CN202210532235.X

申请日：2022-05-17

Applicant: 郑州大学第一附属医院

Inventor： 张毅 ,  李璞璞 ,  陈新峰

IPC: C12N15/867 ,  C12N5/10 ,  C12N15/62 ,  A61K39/00 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了一种双靶向CD19/CD38嵌合抗原受体T细胞的制备方法和应用，该种双靶向CD19/CD38嵌合抗原受体慢病毒表达质粒的制备步骤如下：（1）按照中心法则，获得所述CAR的编码序列DNA；（2）以PCDH质粒为表达载体，对其进行EcoRI/Sall双酶切，然后利用T4 DNA连接酶将步骤（1）中的编码序列DNA整合重组进入PCDH质粒中；（3）将步骤（2）中的连接产物转化STABL3感受态细胞，筛选、扩大培养后进一步提取质粒，即可获得重组后的慢病毒表达质粒，它通过制备成CAR‑T细胞进行应用。本发明既可以靶向CD19抗原也能靶向CD38抗原，规避了CAR‑T细胞因为其中一种抗原的缺失或下调导致肿瘤细胞逃逸，CAR‑T细胞治疗无效。

公开(公告)号：CN114990069B

公开(公告)日：2023-09-22

申请号：CN202210532292.8

申请日：2022-05-17

Applicant: 郑州大学第一附属医院

Inventor： 张毅 ,  李璞璞 ,  陈新峰

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12N15/12 ,  A61K35/17 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了一种过表达SLC43A2的嵌合抗原受体T细胞的制备方法和应用，该过表达SLC43A2的嵌合抗原受体T细胞慢病毒表达质粒的制备步骤如下：（1）按照中心法则，获得所述CAR的编码序列DNA；（2）以PCDH质粒为表达载体，对其进行EcoRI/Sall双酶切，然后利用T4 DNA连接酶将步骤（1）中的编码序列DNA整合重组进入PCDH质粒中；（3）将步骤（2）中的连接产物转化STABL3感受态细胞，筛选、扩大培养后进一步提取质粒，即可获得重组后的慢病毒表达质粒，它通过制备成CAR‑T细胞进行应用。本发明不仅可以杀伤CD19阳性的肿瘤细胞，还增加了CART19细胞摄取甲硫氨酸的能力，增强了其扩增能力以及杀伤功能，增加了对肿瘤细胞的清除能力。

公开(公告)号：CN114990069A

公开(公告)日：2022-09-02

申请号：CN202210532292.8

申请日：2022-05-17

Applicant: 郑州大学第一附属医院

Inventor： 张毅 ,  李璞璞 ,  陈新峰

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12N15/12 ,  A61K35/17 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了一种过表达SLC43A2的嵌合抗原受体T细胞的制备方法和应用，该过表达SLC43A2的嵌合抗原受体T细胞慢病毒表达质粒的制备步骤如下：（1）按照中心法则，获得所述CAR的编码序列DNA；（2）以PCDH质粒为表达载体，对其进行EcoRI/Sall双酶切，然后利用T4 DNA连接酶将步骤（1）中的编码序列DNA整合重组进入PCDH质粒中；（3）将步骤（2）中的连接产物转化STABL3感受态细胞，筛选、扩大培养后进一步提取质粒，即可获得重组后的慢病毒表达质粒，它通过制备成CAR‑T细胞进行应用。本发明不仅可以杀伤CD19阳性的肿瘤细胞，还增加了CART19细胞摄取甲硫氨酸的能力，增强了其扩增能力以及杀伤功能，增加了对肿瘤细胞的清除能力。