公开(公告)号：CN115322955A

公开(公告)日：2022-11-11

申请号：CN202211156088.7

申请日：2022-09-22

Applicant: 金宇保灵生物药品有限公司

Inventor： 陈坚 ,  齐志涛 ,  吉格木德 ,  陈九连 ,  张燕红 ,  孙慧 ,  王娥娥 ,  俎红丽 ,  刘玉梅 ,  赵丽霞 ,  李劼 ,  路荣 ,  方建国 ,  高艳华 ,  屠颉 ,  杨波 ,  闫聪 ,  乔煜婷 ,  田瑞霞 ,  杜宇荣 ,  李雪峰 ,  范培超 ,  刘瑞明 ,  王华 ,  张建宏

IPC: C12N5/071 ,  C12N5/02 ,  C12N7/00 ,  C12N7/02

Abstract: 本发明公开了一种全悬浮无血清型PK‑15细胞的驯化方法，属于兽用生物制品领域。本发明提供的驯化方法包括以下步骤：贴壁型PK‑15细胞的培养—全悬浮型PK‑15细胞的驯化—全悬浮无血清型PK‑15细胞的驯化，其中在培养基中含9‑11％新生牛血清的条件下将贴壁型PK‑15细胞驯化为全悬浮型PK‑15细胞，并在全悬浮无血清型PK‑15细胞的驯化步骤中逐渐降低培养基中的血清浓度至血清浓度为0％，能够驯化获得可稳定传代培养的全悬浮无血清型PK‑15细胞。利用该全悬浮无血清型PK‑15细胞可大规模悬浮培养获得TCID50达10‑7/0.1ml以上的塞内卡病毒培养液。