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公开(公告)号：CN117050960A
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202311208912.3
申请日：2023-09-18
申请人： 长兴制药股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种突变型酮还原酶及其在高pH催化条件下的应用，在野生型酮还原酶基础上至少对3个位点进行定点突变，获得的突变型酮还原酶可将底物其中一个具有羰基的手性中心还原为R构型羟基，而另一个含有NHBoc基团的手性中心在高pH环境下转变为R构型。
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公开(公告)号：CN114045271B
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202111187996.8
申请日：2021-10-12
申请人： 长兴制药股份有限公司
摘要： 本发明公开了固定化羰基还原酶及其在制备(2R,3S)‑2‑羟基‑4‑苯基丁烷衍生物的应用，通过基因突变和增加特定肽链的方式，获得了具备在高浓度底物和有机溶剂的反应体系中实现不低于95％的转化率的固定化羰基还原酶；该酶活性受到共价结合固定化酶制法的影响非常小，可重复用于生产制备。
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公开(公告)号：CN118562905A
公开(公告)日：2024-08-30
申请号：CN202410940176.9
申请日：2024-07-15
申请人： 长兴制药股份有限公司
IPC分类号： C12P13/04
摘要： 本发明涉及生物技术的技术领域，具体为一种酶法制备2‑甲基‑L‑丝氨酸的方法，包括有以下步骤：S1：向反应体系中加入四氢叶酸、L‑丙氨酸、磷酸吡哆醛和共表达丙氨酸消旋酶和α‑甲基丝氨酸羟甲基转移酶，通入氮气开始反应，待反应体系中产生D‑丙氨酸后，流加甲醛溶液；S2：以L‑丙氨酸为底物在丙氨酸消旋酶参与下将L‑丙氨酸转化为DL‑丙氨酸。摒弃需多步反应化学合成方法，以廉价L‑丙氨酸、甲醛为原料，一步酶法制备2‑甲基‑L‑丝氨酸，该方法有操作简单、生产周期短、生产成本低、易产业化的优点。利用该方法制备获得的2‑甲基‑L‑丝氨酸可达到150‑200g/L的产物浓度，以L‑丙氨酸计算2‑甲基‑L‑丝氨酸转化率可达到85‑95%。
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公开(公告)号：CN113603632A
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN202110978885.2
申请日：2021-08-25
申请人： 长兴制药股份有限公司
IPC分类号： C07D211/62 , C12P17/12
摘要： 本发明公开了一种N‑Boc‑4‑哌啶甲酸的制备方法，包括如下步骤：将4‑哌啶甲酸加入乙醇中，室温滴加Boc酸酐，搅拌反应至溶清，继续室温反应至点板无原料；蒸发溶剂至体系呈粘稠状态后停止，加水打浆，然后过滤，将滤饼干燥。其中，4‑哌啶甲酸、Boc酸酐和乙醇质量比为100：169‑185：450‑550。4‑哌啶甲酸采用如下工艺制取：将4‑氰基吡啶进行酶催化水解得到吡啶‑4‑甲酸；将吡啶‑4‑甲酸进行高压氢化得到4‑哌啶甲酸。
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公开(公告)号：CN114807260A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210641477.2
申请日：2022-06-08
申请人： 长兴制药股份有限公司
摘要： 本发明涉及D‑色氨酸合成技术领域，具体为一种D‑色氨酸的酶法合成方式，将L‑色氨酸、溶剂、消旋剂放进反应釜装置中，然后加热搅拌，再加入拆分剂，然后升温至95℃，保温反应；将S1中所得物料进行梯度降温，每5℃为一梯度，并在所对应梯度温度保温反应一定时间。当物料加入到反应釜中后，第一电机启动带动内轴转动，搅拌管随之转动，搅拌管端部的第一齿轮和环形齿条啮合连接，进而使得搅拌管自身转动，搅拌管均匀设置有若干延伸件，延伸件转动也对物料进行搅拌，使得物料混合更加充分，从而提高了搅拌效率；在罐体的内部均匀设置有多根加热棒，加热棒延伸进物料内部，加热配合搅拌机构效率更高。
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公开(公告)号：CN114045271A
公开(公告)日：2022-02-15
申请号：CN202111187996.8
申请日：2021-10-12
申请人： 长兴制药股份有限公司
摘要： 本发明公开了固定化羰基还原酶及其在制备(2R,3S)‑2‑羟基‑4‑苯基丁烷衍生物的应用，通过基因突变和增加特定肽链的方式，获得了具备在高浓度底物和有机溶剂的反应体系中实现不低于95％的转化率的固定化羰基还原酶；该酶活性受到共价结合固定化酶制法的影响非常小，可重复用于生产制备。
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公开(公告)号：CN114807260B
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202210641477.2
申请日：2022-06-08
申请人： 长兴制药股份有限公司
摘要： 本发明涉及D‑色氨酸合成技术领域，具体为一种D‑色氨酸的酶法合成方式，将L‑色氨酸、溶剂、消旋剂放进反应釜装置中，然后加热搅拌，再加入拆分剂，然后升温至95℃，保温反应；将S1中所得物料进行梯度降温，每5℃为一梯度，并在所对应梯度温度保温反应一定时间。当物料加入到反应釜中后，第一电机启动带动内轴转动，搅拌管随之转动，搅拌管端部的第一齿轮和环形齿条啮合连接，进而使得搅拌管自身转动，搅拌管均匀设置有若干延伸件，延伸件转动也对物料进行搅拌，使得物料混合更加充分，从而提高了搅拌效率；在罐体的内部均匀设置有多根加热棒，加热棒延伸进物料内部，加热配合搅拌机构效率更高。
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公开(公告)号：CN114317472B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202111672331.6
申请日：2021-12-31
申请人： 长兴制药股份有限公司
IPC分类号： C12N9/06 , C12N15/53 , C12N11/089 , C12N11/091 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N9/04 , C12P17/16 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种高立体选择性亚胺还原酶及其制备方法和应用，通过对野生型气单胞菌进行定点突变，获得了高立体选择性的亚胺还原酶菌株。其可以用于麦斯明为底物生物催化制备(S)‑降烟碱；本发明进一步提供了含有葡萄糖脱氢酶的辅因子循环体系，以及利用固定化亚胺还原酶生产(S)‑降烟碱的工艺，反应体系中可以高浓度底物进行转化，转化率不小于99％，产物光学纯度不小于99.5％，无需引入助溶剂或游离酶蛋白等杂质，整个过程操作方便、产物分离更简单，且固定化酶重复利用率高。
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公开(公告)号：CN114317472A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202111672331.6
申请日：2021-12-31
申请人： 长兴制药股份有限公司
IPC分类号： C12N9/06 , C12N15/53 , C12N11/089 , C12N11/091 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N9/04 , C12P17/16 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了一种高立体选择性亚胺还原酶及其制备方法和应用，通过对野生型气单胞菌进行定点突变，获得了高立体选择性的亚胺还原酶菌株。其可以用于麦斯明为底物生物催化制备(S)‑降烟碱；本发明进一步提供了含有葡萄糖脱氢酶的辅因子循环体系，以及利用固定化亚胺还原酶生产(S)‑降烟碱的工艺，反应体系中可以高浓度底物进行转化，转化率不小于99％，产物光学纯度不小于99.5％，无需引入助溶剂或游离酶蛋白等杂质，整个过程操作方便、产物分离更简单，且固定化酶重复利用率高。
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公开(公告)号：CN116064444A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211021071.0
申请日：2022-08-24
申请人： 长兴制药股份有限公司
发明人： 俞丽燕 , 张利坤 , 杨卫华 , 严燕兵 , 汤必成 , 卢燕飞 , 吴怀春 , 倪建洲 , 葛文强 , 钱敏帆 , 孙超 , 华超 , 吴自成 , 胡钦 , 佘宇帆 , 王云 , 李淦如 , 李淼玉 , 谈聪
摘要： 本发明的一种单胺氧化酶及波普瑞韦双环脯氨酸片段的制备方法，通过对单胺氧化酶序列进行突变，改变酶分子局部区域氨基酸残基之间、酶与环境之间的相互作用，获得了具有更高转化效率的单胺氧化酶工程菌，利用单胺氧化酶和过氧化氢酶的协同增效作用，降低底物残留，实现工业化生产。在制备工艺中用焦亚硫酸钠与底物一同流加的方式加入反应体系，降低底物对酶活性的影响，提高酶的转化率。
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