公开(公告)号：CN102740896B

公开(公告)日：2014-08-27

申请号：CN201180008318.9

申请日：2011-02-04

申请人： 霍夫曼-拉罗奇有限公司

发明人： F·黑塞 ,  E·赫斯 ,  S·米勒 ,  E·M·特罗斯特-格罗斯

IPC分类号： A61K47/48 ,  C07K14/65 ,  C07K5/10

CPC分类号： C07K14/65 ,  A61K47/48215 ,  A61K47/60 ,  C07K1/1075 ,  C07K5/1019 ,  C12P21/06

摘要： 本文报道了制备与一个聚乙二醇缀合的多肽的方法，所述方法包括a)提供编码表达构建体的核酸，所述核酸在5′至3′方向上包含编码多肽的核酸，以及编码胰蛋白酶位点SEQ ID NO：01的核酸，b)在细胞中表达a)的核酸，并且从细胞和/或培养基回收表达构建体，c)给目标肽提供于C末端赖氨酸残基处与聚乙二醇共价缀合的氨基酸序列SEQ ID NO：02，d)将表达构建体和目标肽与胰蛋白酶突变体D189K，K60E，N143H，E151H温育，并且e)从温育混合物回收并由此产生与一个聚乙二醇缀合的多肽。

公开(公告)号：CN102740896A

公开(公告)日：2012-10-17

申请号：CN201180008318.9

申请日：2011-02-04

申请人： 霍夫曼-拉罗奇有限公司

发明人： F·黑塞 ,  E·赫斯 ,  S·米勒 ,  E·M·特罗斯特-格罗斯

IPC分类号： A61K47/48 ,  C07K14/65 ,  C07K5/10

CPC分类号： C07K14/65 ,  A61K47/48215 ,  A61K47/60 ,  C07K1/1075 ,  C07K5/1019 ,  C12P21/06

摘要： 本文报道了制备与一个聚乙二醇缀合的多肽的方法，所述方法包括：a)提供编码表达构建体的核酸，所述核酸在5′至3′方向上包含编码多肽的核酸，以及编码胰蛋白酶位点SEQ ID NO：01的核酸，b)在细胞中表达a)的核酸，并且从细胞和/或培养基回收表达构建体，c)给目标肽提供于C末端赖氨酸残基处与聚乙二醇共价缀合的氨基酸序列SEQ ID NO：02，d)将表达构建体和目标肽与胰蛋白酶突变体D189K，K60E，N143H，E151H温育，并且e)从温育混合物回收并由此产生与一个聚乙二醇缀合的多肽。