公开(公告)号：CN116987764A

公开(公告)日：2023-11-03

申请号：CN202310703218.2

申请日：2023-06-14

申请人： 青岛农业大学

发明人： 赵美爱 ,  殷宇航 ,  宋希云 ,  孙娇

IPC分类号： C12Q1/527 ,  C12Q1/25 ,  C12N9/88 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

摘要： 本申请提供一种确定玉米乙二醛酶I金属活性中心的方法，以外源金属离子螯合脱金属离子的乙二醛酶I为底物，用MG与谷胱甘肽还原酶(GSH)混合物滴定，实现酶促反应动力学反应，研究表明玉米乙二醛酶I的活性受Ni2+和Zn2+或Co2+、Mn2+影响，可能是Ni2+和Zn2+或Co2+、Mn2+双金属离子依赖型蛋白；并且首次证明Mn2+会使真核GlyI发生酶促反应，为进一步研究该蛋白结构与功能的关系提供了科学依据。

公开(公告)号：CN108795963A

公开(公告)日：2018-11-13

申请号：CN201810682439.5

申请日：2018-06-27

申请人： 青岛农业大学

发明人： 赵美爱 ,  宋希云 ,  孙娇 ,  杨小英

IPC分类号： C12N15/70 ,  C12N15/31

CPC分类号： C12N15/70 ,  C07K14/245

摘要： 本发明公开了对大肠杆菌gloA基因进行定点定向突变的方法，首先进行克隆大肠杆菌gloA基因；再构建克隆载体gloA/pSMART‑LcKan；最后构建gloA/pSMART‑LcKan质粒。本发明为了验证ZmGlyI基因的功能，排除大肠杆菌中乙二醛酶同工酶基因gloA对试验干扰，运用CRISPR/Cas9基因组编辑技术，对大肠杆菌gloA基因进行定点定向突变，使之最终在验证ZmGlyI基因的功能过程中能够被敲除。