对大肠杆菌gloA基因进行定点定向突变的方法

    公开(公告)号:CN108795963A

    公开(公告)日:2018-11-13

    申请号:CN201810682439.5

    申请日:2018-06-27

    IPC分类号: C12N15/70 C12N15/31

    CPC分类号: C12N15/70 C07K14/245

    摘要: 本发明公开了对大肠杆菌gloA基因进行定点定向突变的方法,首先进行克隆大肠杆菌gloA基因;再构建克隆载体gloA/pSMART‑LcKan;最后构建gloA/pSMART‑LcKan质粒。本发明为了验证ZmGlyI基因的功能,排除大肠杆菌中乙二醛酶同工酶基因gloA对试验干扰,运用CRISPR/Cas9基因组编辑技术,对大肠杆菌gloA基因进行定点定向突变,使之最终在验证ZmGlyI基因的功能过程中能够被敲除。