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公开(公告)号：CN103667227A
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201310616061.6
申请日：2013-11-23
申请人： 青岛康原药业有限公司
IPC分类号： C12N9/76
CPC分类号： C12N9/6427 , C12Y304/21001 , C12Y304/21004
摘要： 本发明公开了一种分级沉淀提取糜蛋白酶原和胰蛋白酶原的方法，其原理在于高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子，从而破坏蛋白质表面的水化层，降低其溶解度，使之从溶液中沉淀出来。而硫酸铵因其溶解度大，温度系数小和不易使蛋白质变性而应用最广。因此，本发明选择硫酸铵分级沉淀法对糜蛋白酶原和胰蛋白酶原提取工艺进行了研究、改进，特别是采用亲和层析使得制备糜蛋白酶原的收率提高到0.5％～0.6％，同时得到副产品胰蛋白酶原。
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公开(公告)号：CN102796189B
公开(公告)日：2013-06-05
申请号：CN201210281599.1
申请日：2012-08-09
申请人： 青岛康原药业有限公司
摘要： 本发明公开了一种硫酸鱼精蛋白的制备方法。《中国药典》2010年版提高了硫酸鱼精蛋白的质量标准，增加了比旋度（-65°至-85°）指标的要求。在鱼的精子中，鱼精蛋白通常以核酸-蛋白质的形态存在。采用传统的生产工艺，成品硫酸鱼精蛋白中因含核酸杂质，其比旋度仅能达到-30°，已不能满足新药典对硫酸鱼精蛋白的质量要求。本发明采用3%硫酸提取、50-79℃温水提取、乙醇沉淀、以及低温处理四种生化技术，以鲑鱼的鱼精为原料，制得硫酸鱼精蛋白，其比旋度达到-72.0°。
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公开(公告)号：CN103667226B
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201310613306.X
申请日：2013-11-23
申请人： 青岛康原药业有限公司
IPC分类号： C12N9/76
摘要： 本发明公开一种亲和层析分段洗脱纯化糜蛋白酶的方法，该方法通过以下工艺步骤：(1)多重结晶；(2)活化；(3)盐析；(4)超滤；(5)热原处理；(6)透析；(7)亲和层析；(8)冻干，制备糜蛋白酶。本发明对糜蛋白酶的生产工艺进行不断改进，特别是对各工艺参数进行反复的实验研究，不断优化，最终确立了一套更为科学的规模化生产工艺，经亲和层析纯化所得的糜蛋白酶的效价高达1500～1800iu／mg，并且各项指标均符合中国药典规定。
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公开(公告)号：CN103804487A
公开(公告)日：2014-05-21
申请号：CN201310625497.1
申请日：2013-11-24
申请人： 青岛康原药业有限公司
CPC分类号： C07K14/59
摘要： 本发明公开了一种高岭土吸附法从绝经期或绝经期后妇女的尿中提取尿促性素的方法。利用尿促性素蛋白质在等电点溶解度最低的特性，在高岭土吸附工序中，通过调尿液的pH值，使尿促性素易沉淀析出。技术方案是通过在绝经期妇女尿液中加入高岭土吸附、沉淀、脱附、沉淀、脱水、干燥步骤来实现从尿液中提取尿促性素。
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公开(公告)号：CN103724423A
公开(公告)日：2014-04-16
申请号：CN201310638654.2
申请日：2013-11-28
申请人： 青岛康原药业有限公司
CPC分类号： C07K14/59
摘要： 本发明公开了一种通过去热原纯化尿促性素的方法。利用吸附的特性，在去热原的工序中，通过加入磷酸钠溶液、醋酸钙溶液吸附热原，从而达到去除热原的效果。技术方案是绝经期妇女尿液经过盐溶、离心，树脂吸附、乙醇沉淀、干燥得到的尿促性素干粉加入纯化水、乙醇、醋酸铵等溶解，并加入磷酸钠溶液、醋酸钙液吸附，后用氢氧化钠溶液调节pH值搅拌后离心，上清液调pH值后加乙醇离心后脱水、干燥得尿促性素成品。
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公开(公告)号：CN103740677A
公开(公告)日：2014-04-23
申请号：CN201310643506.X
申请日：2013-11-30
申请人： 青岛康原药业有限公司
IPC分类号： C12N9/42
CPC分类号： C12N9/2474 , C12Y302/01035
摘要： 本发明提供了一种提取玻璃酸酶精品的方法，其特征在于，粗品经色谱分离、热原处理、冻干得玻璃酸酶精品，使玻璃酸酶精品的效价可以达到350iu/mg。
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公开(公告)号：CN103724428A
公开(公告)日：2014-04-16
申请号：CN201310625498.6
申请日：2013-11-24
申请人： 青岛康原药业有限公司
CPC分类号： C07K14/81
摘要： 本发明公开了一种树脂再生提高柱效纯化乌司他丁的方法。具体的说，就是以健康成年男性新鲜尿液为原料，经过甲壳质吸附、氨水洗脱、硫酸铵盐析、吸附柱层析以及亲和层析等现代蛋白质高端生化分离技术来制备高纯度的乌司他丁，可以将总收率提高到70％以上，总效价不低于5000iu/mg，柱效提升约50％。
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公开(公告)号：CN103667226A
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201310613306.X
申请日：2013-11-23
申请人： 青岛康原药业有限公司
IPC分类号： C12N9/76
CPC分类号： C12N9/6427 , C12Y304/21001
摘要： 本发明公开一种亲和层析分段洗脱纯化糜蛋白酶的方法，该方法通过以下工艺步骤：(1)多重结晶；(2)活化；(3)盐析；(4)超滤；(5)热原处理；(6)透析；(7)亲和层析；(8)冻干，制备糜蛋白酶。本发明对糜蛋白酶的生产工艺进行不断改进，特别是对各工艺参数进行反复的实验研究，不断优化，最终确立了一套更为科学的规模化生产工艺，经亲和层析纯化所得的糜蛋白酶的效价高达1500～1800iu／mg，并且各项指标均符合中国药典规定。
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公开(公告)号：CN103665146A
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201310648024.3
申请日：2013-11-27
申请人： 青岛康原药业有限公司
CPC分类号： C07K14/59
摘要： 本发明公开了采用DEAE柱层析提纯尿促性素的技术方法，其特征是绝经期妇女的尿液通过高岭土吸附、乙酸铵盐溶、协和树脂吸附得到尿促性素协和品，然后将尿促性素协和干粉按比例溶于配好的缓冲液中，通过DEAE树脂吸附的方法对尿促性素进一步纯化。具体步骤包括缓冲液配制、DEAE吸附、洗涤、洗脱、沉淀、干燥得尿促性素。此技术通过DEAE柱层析法提纯得到的尿促性素，其效价能够达到350iu/mg。
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