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公开(公告)号：CN116411053A
公开(公告)日：2023-07-11
申请号：CN202111672573.5
申请日：2021-12-31
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
摘要： 本发明公开了KPC型碳青霉烯酶基因检测试剂盒、组合物及其应用。本发明具体地公开了包括特异性扩增KPC型碳青霉烯酶基因的引物对和crRNA的组合物，含有该组合物的试剂盒以及利用该组合物进行核酸检测的方法。本发明采用PCR技术联合CRISPR‑Cas13a技术检测KPC型碳青霉烯酶基因的方法，通过设计、构建、筛选，最终提供一段用于检测KPC型碳青霉烯酶基因的靶向该序列的特异性crRNA，本发明提供的方法简便、快速、具有较高的灵敏度和特异性。可用于临床快速鉴定产碳青霉烯酶菌株，从而对患者进行合理的抗生素治疗，以缩短治疗周期。有着非常重要的临床应用前景和开发价值。
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公开(公告)号：CN114959107A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202110200314.6
申请日：2021-02-23
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12N15/113 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了基于RAA‑CRISPR‑Cas13a技术检测乙型肝炎病毒DNA的试剂盒。本发明提供了用于检测乙型肝炎病毒DNA的成套引物组，由RAA引物对和crRNA组成；所述RAA引物对根据SEQ ID No.1所示核苷酸序列设计；所述crRNA包括锚定序列和向导序列，所述锚定序列能够与Cas蛋白结合，所述向导序列与所述RAA引物对的扩增产物序列相匹配。本发明采用RAA技术与CRISPR‑Cas13a技术结合方法，通过设计、构建、筛选，最终提供一段用于HBV DNA检测的RAA引物序列及靶向该序列的特异性crRNA，本发明方法简便、快速、具有极高的灵敏度和特异性。灵敏度达到10拷贝/μL。
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公开(公告)号：CN113063937A
公开(公告)日：2021-07-02
申请号：CN202110279377.5
申请日：2021-03-16
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
IPC分类号： G01N33/543 , G01N21/31 , G01N21/78
摘要： 本发明属于生物医药技术领域，提供了慢加急性肝衰竭预后评价的标志物及其应用，所述标志物包含热休克蛋白70或抗热休克蛋白70抗体。以包含热休克蛋白70的试剂盒用于ACLF的预后评价，其检测方法具有灵敏度高、特异性强、成本低等特点，且操作简单、快捷，可为ACLF患者预后评价提供可靠依据。
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公开(公告)号：CN113493855B
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202010195047.3
申请日：2020-03-19
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种基于RAA‑CRISPR‑cas13a检测HBV cccDNA的试剂盒。本发明提供了一种核酸分子组合物，由引物F1、引物R1和特异crRNA组成；引物F1为序列表的序列1所示的单链DNA分子；引物R1为序列表的序列2所示的单链DNA分子；特异crRNA为序列表的序列3所示的单链RNA分子。本发明将跨缺口引物、RAA扩增和基于CRISPR‑Cas13a系统的可视化检测结合在一起用于HBV cccDNA检测，扩增速度快、稳定性高、特异性强、灵敏度高、通量高、成本低，能实现对乙肝的早期检测和药物疗效的有效监测，为乙肝的个体化治疗奠定坚实的基础。
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公开(公告)号：CN110343785A
公开(公告)日：2019-10-18
申请号：CN201910716750.1
申请日：2019-08-05
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
摘要： 本发明公开了基于PCR-CRISPR-cas13a检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的试剂盒。本发明提供了一种用于检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的试剂盒，含有Cas13a蛋白和crRNA，或者二者形成的复合体；所述crRNA包括用于与Cas13a蛋白结合的锚定序列和靶向乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA跨缺口区靶序列的向导序列；所述乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA跨缺口区靶序列如SEQ ID No.4所示。本发明是采用PCR技术联合CRISPR-Cas13a技术检测HBV cccDNA，以此方法开发的HBV cccDNA新型检测试剂盒，具有特异性强、灵敏度高的特点，有着非常重要的临床应用前景和开发价值。
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公开(公告)号：CN118056913A
公开(公告)日：2024-05-21
申请号：CN202211444550.3
申请日：2022-11-18
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
摘要： 本发明公开了基于RAA‑CRISPR‑Cas13a检测KPC型碳青霉烯酶基因试剂盒。具体地公开了包括特异性扩增KPC型碳青霉烯酶基因的引物对和crRNA的试剂盒及其检测KPC型碳青霉烯酶基因的方法。本发明采用RAA技术联合CRISPR‑Cas13a技术检测KPC型碳青霉烯酶基因的方法简便、快速、具有较高的灵敏度和特异性，灵敏度可达到单个拷贝级别，有效杜绝了反应中非目的扩增片段的假阳性事件发生，可用于临床快速鉴定产碳青霉烯酶菌株，从而对患者进行合理的抗生素治疗，以缩短治疗周期，同时本发明试剂盒有助于在偏远地区开展POCT检测，有效监测和控制耐药菌株的扩散，有着重要的临床应用前景和开发价值。
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公开(公告)号：CN114959110A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202110213143.0
申请日：2021-02-25
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
摘要： 本发明公开了一种基于PCR‑CRISPR‑Cas13a检测乙型肝炎病毒前基因组RNA的试剂盒。本发明提供了核酸分子组合物，由引物HR‑RT、引物F、引物R和特异crRNA组成；引物HR‑RT为SEQ ID No.1所示的单链DNA分子；引物F为SEQ ID No.2所示的单链DNA分子；引物R为SEQ ID No.3所示的单链DNA分子；特异crRNA为SEQ IDNo.4所示的单链RNA分子。本发明还保护一种检测乙型肝炎病毒的方法：(1)提取受试者血液样本的总RNA，采用引物HR‑RT进行逆转录，得到cDNA；(2)采用引物F和引物R组成的引物对进行PCR扩增；(3)采用特异crRNA进行基于CRISPR‑Cas13a系统的可视化检测。本发明具有非常重要的临床应用前景和开发价值。
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公开(公告)号：CN118056914A
公开(公告)日：2024-05-21
申请号：CN202211444567.9
申请日：2022-11-18
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
IPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/686 , C12N15/11 , C12N15/113 , C12R1/01 , C12R1/19 , C12R1/22 , C12R1/385 , C12R1/42
摘要： 本发明公开了基于PCR/RAA‑CRISPR‑Cas13a检测NDM型碳青霉烯酶基因试剂盒。所述试剂盒包括特异性扩增NDM型碳青霉烯酶基因的引物对和crRNA。本发明构建了PCR或RAA技术联合CRISPR‑Cas13a技术检测NDM型碳青霉烯酶基因的方法，该方法简便、快速、具有较高的灵敏度和特异性，灵敏度可达到单个拷贝级别，可用于临床快速鉴定产碳青霉烯酶菌株，从而对患者进行合理的抗生素治疗，以缩短治疗周期，另一方面其便捷的检测特点可有助于在偏远地区开展POCT检测，从而有效监测和控制耐药菌株的扩散，有着非常重要的临床应用前景和开发价值。
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公开(公告)号：CN110343785B
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN201910716750.1
申请日：2019-08-05
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
摘要： 本发明公开了基于PCR‑CRISPR‑cas13a检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的试剂盒。本发明提供了一种用于检测乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的试剂盒，含有Cas13a蛋白和crRNA，或者二者形成的复合体；所述crRNA包括用于与Cas13a蛋白结合的锚定序列和靶向乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA跨缺口区靶序列的向导序列；所述乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA跨缺口区靶序列如SEQ ID No.4所示。本发明是采用PCR技术联合CRISPR‑Cas13a技术检测HBV cccDNA，以此方法开发的HBV cccDNA新型检测试剂盒，具有特异性强、灵敏度高的特点，有着非常重要的临床应用前景和开发价值。
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公开(公告)号：CN114959108A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202110200329.2
申请日：2021-02-23
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12N15/113 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种基于RCA‑PCR‑CRISPR‑cas13a检测HBV cccDNA的试剂盒。本发明提供了核酸分子组合物，包括特异引物对、特异crRNA和特异引物组。特异引物对由序列10所示DNA分子和序列11所示DNA分子组成；特异crRNA为序列9所示的RNA分子；特异引物组由8种引物组成，依次如序列1至序列8所示。应用核酸分子组合物检测HBV cccDNA的方法：(1)提取受试者肝脏组织的总DNA，然后进行PSAD消化；(2)采用所述特异引物组进行RCA扩增；(3)采用所述特异引物对进行PCR扩增；(4)进行基于CRISPR‑Cas13a系统的可视化检测；所述CRISPR‑Cas13a系统的crRNA为所述特异crRNA。本发明具有非常重要的临床应用前景和开发价值。
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