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公开(公告)号：CN108350447B
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN201680058388.8
申请日：2016-08-05
申请人： 龙沙有限公司
摘要： 一种分离的和/或人工pG1‑x启动子，其为由SEQ ID 1鉴别的巴斯德毕赤酵母的碳源调节型pG1启动子的功能变体，该pG1‑x启动子由长度为至少293bp的至少一部分SEQ ID 1组成或包含长度为至少293bp的至少一部分SEQ ID 1，其特征在于以下启动子区域：a)至少一个核心调节区，其包含核苷酸序列SEQ ID 2和SEQ ID 3；和b)非核心调节区，其为所述pG1‑x启动子序列内除了所述核心调节区以外的任何区域；其中所述pG1‑x启动子包含任何启动子区域中的至少一个突变和与SEQ ID 2及SEQ ID 3具有至少80％的序列一致性，和与除了SEQ ID 2及SEQ ID 3以外的任何区域具有至少50％的序列一致性；进一步的，其中所述pG1‑x启动子的特征在于相比于所述pG1启动子相同的或提高的启动子强度及诱导比率，其中启动子强度在诱导状态下，相比于所述pG1启动子提高至少1.1倍，和/或诱导比率相比于所述pG1启动子提高至少1.1倍。
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公开(公告)号：CN113423836B
公开(公告)日：2023-07-11
申请号：CN202080008585.5
申请日：2020-01-10
申请人： 龙沙有限公司
发明人： B·加塞尔 , C·雷布涅格 , M·C·弗洛里斯·维勒加斯 , D·马塔诺维赫
摘要： 一种重组宿主细胞，其包括编码FLO8蛋白的内源基因，所述FLO8蛋白包括鉴定为SEQ ID NO:1的氨基酸序列或其同源物，所述宿主细胞通过一种或多种基因修饰进行工程改造，以与所述一种或多种基因修饰之前的宿主细胞相比减少所述基因的表达，并且所述宿主细胞包括异源表达盒，所述异源表达盒包括受表达盒启动子(ECP)控制的目的基因(GOI)，所述ECP可被非甲醇碳源抑制；以及使用所述重组宿主细胞生产目的蛋白的方法。
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公开(公告)号：CN104837857A
公开(公告)日：2015-08-12
申请号：CN201380056279.9
申请日：2013-10-29
申请人： 龙沙有限公司
CPC分类号： C12P21/02 , C07K14/39 , C07K14/43595 , C07K14/765 , C07K16/00 , C07K2317/56 , C12N9/6478 , C12N15/815
摘要： 本发明公开了一种编码前导序列的分离的核酸，其具有一特定序列，以及公开了由该核酸编码的分离的前导肽、包括编码前导序列的这种核酸的表达组件，该核酸可操作地连接到编码POI的核酸序列上，本发明公开了一包括该表达组件的重组酵母宿主细胞或载体，一种在该酵母宿主细胞中生产POI的方法，以及进一步地，公开了该特定核酸用于从宿主细胞分泌POI和/或增加来自宿主细胞的POI的分泌的用途。
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公开(公告)号：CN104837857B
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201380056279.9
申请日：2013-10-29
申请人： 龙沙有限公司
摘要： 本发明公开了一种编码前导序列的分离的核酸，其具有一特定序列，以及公开了由该核酸编码的分离的前导肽、包括编码前导序列的这种核酸的表达组件，该核酸可操作地连接到编码POI的核酸序列上，本发明公开了一包括该表达组件的重组酵母宿主细胞或载体，一种在该酵母宿主细胞中生产POI的方法，以及进一步地，公开了该特定核酸用于从宿主细胞分泌POI和/或增加来自宿主细胞的POI的分泌的用途。
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公开(公告)号：CN116490517A
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202180067445.X
申请日：2021-09-30
申请人： 龙沙有限公司
IPC分类号： C07K14/47
摘要： 本发明涉及一种表达目的基因(GOI)的重组真核宿主细胞，所述重组真核宿主细胞通过遗传修饰工程化以与所述一种或多种遗传修饰之前的宿主细胞相比，增加编码信使核糖核蛋白(mRNP)的翻译起始因子的两种或更多种基因(TIF基因)的表达，其中所述TIF基因至少包括编码eIF4A的基因和编码eIF4G的基因，并且其中所述TIF基因中的至少一者的表达在启动子(该启动子不同于控制所述GOI的表达的启动子)的转录控制下。
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公开(公告)号：CN105229154A
公开(公告)日：2016-01-06
申请号：CN201380076047.X
申请日：2013-12-18
申请人： 龙沙有限公司
IPC分类号： C12N15/81
CPC分类号： C12N15/815 , C07K14/39
摘要： 本发明涉及一种包含启动子的分离的核酸序列，其是一种包含SEQ ID 1所示的pCS1的核酸序列或其有功能活性的变种的天然毕赤酵母序列，该变种是一种长度变种，一种突变体或SEQ ID 1的杂合序列，或其结合，涉及包含所述启动子的表达构建物和重组细胞，还涉及在所述启动子的控制下产生感兴趣的蛋白质的方法。本发明进一步涉及一种从真核细胞中识别组成型启动子的方法，和一种包含启动子的分离的核酸序列，该启动子在与编码POI的核苷酸序列可操作的连接时，指导其在宿主细胞中的表达水平高于在高和低生长速率的天然pGAP启动子控制下的表达水平。
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公开(公告)号：CN116904331A
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202310749149.9
申请日：2020-01-10
申请人： 龙沙有限公司
发明人： B·加塞尔 , C·雷布涅格 , M·C·弗洛里斯·维勒加斯 , D·马塔诺维赫
摘要： 一种重组宿主细胞，其包括编码FLO8蛋白的内源基因，所述FLO8蛋白包括鉴定为SEQ ID NO:1的氨基酸序列或其同源物，所述宿主细胞通过一种或多种基因修饰进行工程改造，以与所述一种或多种基因修饰之前的宿主细胞相比减少所述基因的表达，并且所述宿主细胞包括异源表达盒，所述异源表达盒包括受表达盒启动子(ECP)控制的目的基因(GOI)，所述ECP可被非甲醇碳源抑制；以及使用所述重组宿主细胞生产目的蛋白的方法。
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公开(公告)号：CN113423836A
公开(公告)日：2021-09-21
申请号：CN202080008585.5
申请日：2020-01-10
申请人： 龙沙有限公司
发明人： B·加塞尔 , C·雷布涅格 , M·C·弗洛里斯·维勒加斯 , D·马塔诺维赫
摘要： 一种重组宿主细胞，其包括编码FLO8蛋白的内源基因，所述FLO8蛋白包括鉴定为SEQ ID NO:1的氨基酸序列或其同源物，所述宿主细胞通过一种或多种基因修饰进行工程改造，以与所述一种或多种基因修饰之前的宿主细胞相比减少所述基因的表达，并且所述宿主细胞包括异源表达盒，所述异源表达盒包括受表达盒启动子(ECP)控制的目的基因(GOI)，所述ECP可被非甲醇碳源抑制；以及使用所述重组宿主细胞生产目的蛋白的方法。
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公开(公告)号：CN108350447A
公开(公告)日：2018-07-31
申请号：CN201680058388.8
申请日：2016-08-05
申请人： 龙沙有限公司
CPC分类号： C12N15/815 , C12N1/16 , C12N2830/001 , C12P21/00
摘要： 一种分离的和/或人工pG1-x启动子，其为由SEQ ID 1鉴别的巴斯德毕赤酵母的碳源调节型pG1启动子的功能变体，该pG1-x启动子由长度为至少293bp的至少一部分SEQ ID 1组成或包含长度为至少293bp的至少一部分SEQ ID 1，其特征在于以下启动子区域：a)至少一个核心调节区，其包含核苷酸序列SEQ ID 2和SEQ ID 3；和b)非核心调节区，其为所述pG1-x启动子序列内除了所述核心调节区以外的任何区域；其中所述pG1-x启动子包含任何启动子区域中的至少一个突变和与SEQ ID 2及SEQ ID 3具有至少80％的序列一致性，和与除了SEQ ID 2及SEQ ID 3以外的任何区域具有至少50％的序列一致性；进一步的，其中所述pG1-x启动子的特征在于相比于所述pG1启动子相同的或提高的启动子强度及诱导比率，其中启动子强度在诱导状态下，相比于所述pG1启动子提高至少1.1倍，和/或诱导比率相比于所述pG1启动子提高至少1.1倍。
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