公开(公告)号：CN112708684A

公开(公告)日：2021-04-27

申请号：CN202011503796.4

申请日：2020-12-17

申请人： 福建医科大学附属第一医院

发明人： 张文明 ,  钟光贤 ,  陈锦元 ,  魏洪翔 ,  方心俞 ,  林建华

IPC分类号： C12Q1/689 ,  C12Q1/6862 ,  C12Q1/14 ,  C12N15/11

摘要： 本发明公开一种超敏感的电化学LCR传感器用于检测关节液中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，包括如下步骤：（1）根据MecA基因的保守系列设计特异性的两条双链短探针（S‑dsDNA）。（2）在LCR反应体系中，以MecA基因为模板，通过DNA连接酶将两条短系列的探针连接形成长的双链DNA（L‑dsDNA）。接着以L‑dsDNA模板，进行循环扩增形成大量L‑dsDNA。（3）将形成的带有巯基及生物素修饰的L‑dsDNA通过金‑硫键固定于BSA修饰的金电极上，通过滴加亲和素‑PolyHRP与L‑dsDNA上的生物素结合，最后将电极置于含TMB和H2O2的底液中，在HRP的催化下，H2O2能氧化TMB产生电化学信号。本方法具有经济、快速、高灵敏度及特异性等优点，可用于单碱基突变系列的检测，并且实现了对关节假体周围感染病人关节液中MRSA的检测。

公开(公告)号：CN109735629A

公开(公告)日：2019-05-10

申请号：CN201811460859.5

申请日：2018-12-01

申请人： 甘肃出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心

发明人： 王溪桥 ,  满岳 ,  周小平 ,  尤佳 ,  王军平 ,  文朝慧

IPC分类号： C12Q1/6888 ,  C12Q1/6862

摘要： 本发明提供了一种用于检测猪源性成份的锁式探针-实时荧光PCR试剂盒及其检测方法。本试剂盒利用特异的锁式探针(plp)同样品核酸进行等温扩增连接，利用锁式探针上的taqman荧光探针位点，采用Real-Time PCR技术，通过Ct值对特异性连接后的环状常务进行定性分析，结果准确直观，省时省力；比普通PCR的灵敏度高，可用于检测低微含量的动物源性样品，检测DNA的阈值达到50 fg/μl；试剂耗材成本较低，适用于出入境口岸检疫部门及食品安全检测实验室大批量检测业务以及科研院所的检测研究。

公开(公告)号：CN114717300B

公开(公告)日：2024-06-14

申请号：CN202111640916.X

申请日：2021-12-29

申请人： 长庚大学

发明人： 吳旻憲 ,  陳志祐

IPC分类号： C12Q1/686 ,  C12Q1/6862 ,  C12Q1/6848 ,  C12M1/38 ,  C12M1/34 ,  C12M1/02 ,  C12M1/00

摘要： 本发明系为核酸扩增方法及其装置暨核酸检测方法与其装置，核酸扩增装置包括反应单元、能量激发单元、操作单元和辅助冷却单元，反应单元内包括待测物、一种或多种固相载体及核酸扩增反应液，各固相载体都具有功能化的特异性表面配体，以提供进行目标待测物纯化分离与核酸扩增反应，透过控制能量激发单元的能量输出与启闭时序，产生反应温度(热)循环，藉此循环期间在各固相载体周遭形成原位环境，并在原位环境内进行原位核酸扩增反应而产生扩增反应物，本发明并以此装置进行核酸扩增方法，另利用核酸检测方法与其装置，对扩增反应物进行检测。

公开(公告)号：CN115772568A

公开(公告)日：2023-03-10

申请号：CN202211000633.3

申请日：2022-08-19

申请人： 福建医科大学附属第一医院

发明人： 陈锦元 ,  刘爱林 ,  杨良永 ,  林新华 ,  陈元仲

IPC分类号： C12Q1/6886 ,  C12Q1/6862 ,  C12N15/11

摘要： 本发明提供一种检测慢性粒细胞白血病BCR/ABL融合基因的引物及试剂盒，包括LCR引物CP，SP，T1，T2，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1‑SEQID NO:4所示，或如SEQ ID NO:5‑SEQ ID NO:8所示。该引物检测限低和单碱基错配区分的能力强。

公开(公告)号：CN114717300A

公开(公告)日：2022-07-08

申请号：CN202111640916.X

申请日：2021-12-29

申请人： 长庚大学

发明人： 吳旻憲 ,  陳志祐

IPC分类号： C12Q1/686 ,  C12Q1/6862 ,  C12Q1/6848 ,  C12M1/38 ,  C12M1/34 ,  C12M1/02 ,  C12M1/00

摘要： 本发明系为核酸扩增方法及其装置暨核酸检测方法与其装置，核酸扩增装置包括反应单元、能量激发单元、操作单元和辅助冷却单元，反应单元内包括待测物、一种或多种固相载体及核酸扩增反应液，各固相载体都具有功能化的特异性表面配体，以提供进行目标待测物纯化分离与核酸扩增反应，透过控制能量激发单元的能量输出与启闭时序，产生反应温度(热)循环，藉此循环期间在各固相载体周遭形成原位环境，并在原位环境内进行原位核酸扩增反应而产生扩增反应物，本发明并以此装置进行核酸扩增方法，另利用核酸检测方法与其装置，对扩增反应物进行检测。

公开(公告)号：CN118667930A

公开(公告)日：2024-09-20

申请号：CN202410843728.4

申请日：2024-06-27

申请人： 河北大学

发明人： 张江艳 ,  景朝迪 ,  成永强 ,  谢志欣

IPC分类号： C12Q1/6862

摘要： 本发明属于分子检测诊断技术领域，具体涉及一种不对称连接酶链式反应结合多组分核酸酶实时定量检测核酸的方法。本发明根据目标核酸设计两对连接探针和两个Partzyme；以DNA核酸为模板及/或以RNA核酸经连接反应生成的长链DNA为模板，在DNA连接酶的作用下进行不对称连接酶链式反应（LCR），生成含有单链DNA的LCR产物；两个Partzyme识别单链DNA，组装形成有活性的MNAzyme并切割信号探针，实时监测切割所产生的荧光信号，实现目标核酸的实时定量检测。本发明提供了一种新的LCR实时检测方法，同时兼备LCR的特异性连接和MNAzyme的双特异性识别特性，特异性好，并且具有实现多重检测的潜力。

公开(公告)号：CN115109855A

公开(公告)日：2022-09-27

申请号：CN202210274079.1

申请日：2022-03-20

申请人： 福建医科大学附属第一医院

发明人： 刘周杰 ,  陈锦元 ,  杨良永 ,  林新华 ,  许雄伟

IPC分类号： C12Q1/6888 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/6862

摘要： 本发明公开一种连接酶结合核酸外切酶“零背景”检测CYP2C19*2基因型的电化学方法。特点是选用生物样品检测中稳定性较强的电活性指示剂亚甲蓝（MB）修饰信号探针，作为电信号来源，结合两种酶促反应特异性扩增、剪切的特性，仅当CYP2C19*2存在时，MB修饰长ssDNA才会被指数扩增出来，随后，此ssDNA通过“倒立型”结构形式被具有筛选ssDNA特性的高密度DNA自组装单分子层捕获杂交，MB靠近金电极表面，发生电子传递，最后，使用方波伏安法（SWV）搜集电信号。在人全血临床样品检测中，本发明可区分CYP2C19*2的三种基因型，且实现了“零背景”空白检测。此外，本发明对如何降低检测背景信号具有较为重要的设计参考价值，同时可为个体化药物基因型检测方法提供新思路、新方向。

公开(公告)号：CN114561493A

公开(公告)日：2022-05-31

申请号：CN202210227948.5

申请日：2022-03-08

申请人： 武汉兰丁云医学检验实验室有限公司

发明人： 郝宗杰 ,  曹得华 ,  李仲娟 ,  龙莉 ,  严姗 ,  李荣 ,  刘赛 ,  庞宝川 ,  孙小蓉

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/6862 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

摘要： 本发明涉及一种快速新冠病毒N501Y突变变体的检测方法，通过引物设计，引物SL1和SL2可以完全与正常型H1N1的DNA，而引物SL1和SL2与突变型DNA存在一个碱基差异。当高温连接酶的催化下，只有SL1和SL2连接成一条完整的茎环状结构时，才是后续LAMP基因扩增循环的起始结构。连接反应的产物（茎环状结构产物），用LAMP方法进行核酸扩增，根据LAMP反应产生颜色变化进行结果判读。本发明基于RNA连接酶技术，无需反转录技术，且反应时间短，连接时间（15分钟）和LAMP反应（15分钟）合计30分钟；能够精准识别一个碱基的差异；设备要求简单，无需荧光定量PCR仪，反应只需金属浴；LAMP结果可视化，终点判定简单。

公开(公告)号：CN106434871B

公开(公告)日：2020-08-18

申请号：CN201610651714.8

申请日：2012-05-17

申请人： 德克斯特里蒂诊断公司

发明人： R·特布鲁根 ,  Y·刘 ,  J·R·吉尔德斯 ,  C·H·金 ,  M·R·阿比迪

IPC分类号： C12Q1/6809 ,  C12Q1/6834 ,  C12Q1/6855 ,  C12Q1/6862

摘要： 本发明提供用于检测存在于样品中的一个或多个核酸目标的组合物、设备和方法。本发明的方法包括利用两个或更多个接合探针，这些接合探针以可逆方式彼此紧密结合目标核酸并且具有互补的反应性接合部分。当这些探针已经按适当定向结合到目标上时，其能够经历自发化学接合反应，得到接合产物，对这种接合产物直接进行检测，或扩增这种接合产物以产生扩增子，然后对这些扩增子进行检测。本发明还提供用以稳定样品RNA以使得降解不会显著影响分析结果的方法。

公开(公告)号：CN106755306B

公开(公告)日：2019-08-20

申请号：CN201611020857.5

申请日：2016-11-21

申请人： 陕西师范大学

发明人： 李正平 ,  严景丽 ,  刘伟亮

IPC分类号： C12Q1/6862 ,  C12Q1/25

摘要： 本发明公开了一种连接酶在检测N6甲基腺嘌呤中的应用，其中所述的连接酶是T3 DNA连接酶或T4 RNA连接酶2。本发明首次发现与腺嘌呤(A)相比，N6甲基腺嘌呤(m6A)可以抑制T3 DNA连接酶和T4 RNA连接酶2的连接活性，基于该特性，以RNA(含的A的RNA和含有m6A的RNA)为模板，建立了基于连接‑聚合酶链式反应定量测定m6A百分比含量的方法。本发明操作简单、灵敏度高、特异性好，能够用于信使RNA、长非编码RNA、核糖体RNA、转运RNA和小RNA等RNA中m6A百分比含量测定。