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    Verfahren zur Trennung von Verbänden maligner Zellen und Verbänden aus Stromazellen einer ex vivo Malignomgewebeprobe
    65.
    发明公开
    Verfahren zur Trennung von Verbänden maligner Zellen und Verbänden aus Stromazellen einer ex vivo Malignomgewebeprobe 有权
    一种用于恶性细胞的组织和基质细胞协会从离体Malignomgewebeprobe分离过程

    公开(公告)号：EP2634249A1

    公开(公告)日：2013-09-04

    申请号：EP12006938.0

    申请日：2012-10-07

    申请人： FLACOD GmbH

    发明人： Granzow, Christof, Prof. Dr.

    IPC分类号： C12N5/00 ,  G01N33/50

    CPC分类号： G01N33/5011 ,  C12N5/0093 ,  G01N2500/10

    摘要： In dem Verfahren wird eine Malignomgewebeprobe ex vivo gereinigt, zerkleinert, in Kulturmedium suspendiert, einer Behandlung mit Kollagenase unterworfen und das Kollagenaseaufschlußprodukt wird zentrifugiert. Das gewonnene Pellet wird in Kulturmedium mittels eines Aufsauginstruments resuspendiert, dabei mehrmals aufgesogen und wieder zurückgegeben, und in ein Kulturgefäß überführt. Die so gewonnene Resuspension wird mikroskopisch mit Phasenoptik hinsichtlich Zellverbänden analysiert, die aufgrund ihres phänotypischen Erscheinungsbildes als Verband maligner Zellen oder als Verband von Endothelzellen oder als Verband von Fibroblasten identifizierbar sind, und die indentifizierten Zellverbände werden separiert.

    摘要翻译： 恶性细胞和基质细胞从一个提示恶性肿瘤组织样品簇的簇的离体的分离，包括（a）清洁和粉碎提示恶性肿瘤组织样本成1-4毫米3>件，（b）中悬浮切碎的组织在培养基中， （c）中在36-37℃下]ç将所得到的悬浮液用胶原酶处理（即胶原酶消化），（D）在50倍克在室温下离心5分钟来获得胶原酶消化产物，（e）分离沉淀 并从产品的上清液中（d）中获得。 分离的恶性细胞和基质细胞在体外包括：（a）清洁一提示恶性肿瘤组织样品簇集群和压碎提示恶性肿瘤组织样本成1-4毫米3>件，（b）中悬浮切碎的组织在培养基中， （c）使在所得的悬浮液（即，消化胶原酶）（b）至胶原酶在36-37 [度]下以在室温50X克离心获得胶原酶消化产物（c）中进行5分钟的处理，（d）中 温度，（e）分离沉淀物，并从（d）中获得的产物的上清，（F）移液，并通过在吸收仪器由一个移液管尖端几次重悬由（E）在培养基中的小球，优选 ，优选4-6次，并移液和传递环到培养容器中，（G）相对于通过使用（优选与相光学倒置显微镜）的显微镜分析所述再悬浮（f）中获得的至少一个小区相关联的 ，在恶性细胞中的关联，其可以被 由它的内皮细胞的表型外观，或或协会确定可通过在成纤维细胞可以通过其表型外观和（h）分离所述识别的细胞簇被识别的关联其表型外观来识别。 因此独立权利要求中包括：（1）检查在离体的提示恶性肿瘤组织样品的恶性细胞的化疗剂和/或放射治疗剂的反应，包括使所述提示恶性肿瘤组织样本进入工艺如所提到的上述和分析细胞的确 被标识为恶性细胞簇; 和（2）检查化学治疗剂和/或放射治疗剂对前的提示恶性肿瘤组织样本体内包括孵育化学治疗剂和/或放射治疗剂与所述提示恶性肿瘤组织样品的生长抑制效应，分析细胞的数量和 /或细胞集落，和确定性采矿化疗和/或放射治疗剂，其中，所述提示恶性肿瘤组织样品消化成基质细胞，并使用上述方法恶性细胞的IC 50值，与化学治疗剂和/或放射治疗孵化前 剂和仅恶性肿瘤细胞温育与化学治疗剂和/或放射治疗剂和药物的IC 50值进行了分析。 ACTIVITY：血管生成抑制剂; 抑制细胞生长。 无生物数据给出。 作用机理：没有给出。

    METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATING DISEASE
    67.
    发明公开
    METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATING DISEASE 有权
    方法和组合物疾病治疗

    公开(公告)号：EP2043662A2

    公开(公告)日：2009-04-08

    申请号：EP07870731.2

    申请日：2007-07-26

    申请人： Intrexon Corporation

    发明人： REED, Thomas D. ,  BEECH, Robert P.

    IPC分类号： A61K31/711 ,  A61K48/00 ,  C12N5/00 ,  C12N15/00

    CPC分类号： C12N5/0093 ,  A61K38/45 ,  A61K48/00 ,  C12N5/0647 ,  C12N2501/724 ,  C12N2510/00 ,  C12Y204/02036

    摘要： The present invention relates to methods and compositions for treating a subject comprising destroying diseased cells in the subject. The methods comprise obtaining a population of cells from a subject and determining the activity of at least one disease marker gene within the population of the obtained cells. A polynucleotide molecule that encodes a polypeptide that is lethal to the cells is then introduced into the cells, where the expression of the lethal polypeptide is controlled by the promoter of at least one of the disease marker genes previously identified. After introduction of the polynucleotide, the cells are treated with conditions to induce expression of the lethal polypeptide to destroy the cells that are expressing the disease marker gene(s). After destruction of the diseased cells, the remaining live cells, which did not express the lethal polypeptide to an extent necessary to kill the cells, are separated from the dead cells, and the live cells are restored to the subject.

    Natural killer cell lines and methods of use
    68.
    发明公开
    Natural killer cell lines and methods of use 失效
    NatürlicheKillerzelllinien und Verfahren zu ihrer Verwendung

    公开(公告)号：EP1690927A1

    公开(公告)日：2006-08-16

    申请号：EP06008030.6

    申请日：1998-04-30

    申请人： Klingemann, Hans

    发明人： Klingemann, Hans

    IPC分类号： C12N5/00 ,  C12N5/08 ,  C12N5/22 ,  C12N15/00 ,  C12N15/63 ,  C12N15/85 ,  A01N63/00

    CPC分类号： C12N5/0093 ,  A61K2035/124 ,  C07K14/55 ,  C12N5/0646 ,  C12N2510/00

    摘要： The invention relates to a natural killer cell line termed NK-92. The invention provides a vector for transfecting a mammalian cell which includes a nucleic acid sequence encoding a cytokine that promotes the growth of NK-92. Additionally, the invention provides an NK-92 cell, or an NK-92 cell modified by transfection with a vector conferring advantageous properties, which is unable to proliferate and which preserves effective cytotoxic activity. The invention further provides a modified NK-92 cell that is transfected with a vector encoding a cytokine that promotes the growth of NK-92 cells. The cell secretes the cytokine upon being cultured under conditions that promote cytokine secretion, and furthermore secretes the cytokine in vivo upon being introduced into a mammal. In a significant embodiment, the cytokine is interleukin 2. The present invention also provides methods of purging cancer cells from a biological sample, of treating a cancer ex vivo in a mammal, and of treating a cancer in vivo in a mammal employing a natural killer cell, such as NK-92 itself, an NK-92 cell which is unable to proliferate and which preserves effective cytotoxic activity, or natural killer cells transfected with a vector encoding a cytokine.

    摘要翻译： 本发明涉及一种称为NK-92的天然杀伤细胞系。 本发明提供了用于转染哺乳动物细胞的载体，其包括编码促进NK-92生长的细胞因子的核酸序列。 此外，本发明提供了NK-92细胞或通过转染赋予赋予有利性质的载体而修饰的NK-92细胞，其不能增殖并且保留了有效的细胞毒活性。 本发明还提供了用编码促进NK-92细胞生长的细胞因子的载体转染的修饰的NK-92细胞。 在促进细胞因子分泌的条件下，细胞分泌细胞因子，此外在引入哺乳动物体内分泌细胞因子。 在一个重要的实施方案中，细胞因子是白细胞介素2.本发明还提供从生物样品中清除癌细胞，在哺乳动物中离体治疗癌症以及在使用天然杀伤剂的哺乳动物体内治疗癌症的方法 细胞，例如NK-92本身，不能增殖并保留有效细胞毒活性的NK-92细胞，或用编码细胞因子的载体转染的天然杀伤细胞。

    NATURAL KILLER CELL LINES AND METHODS OF USE
    69.
    发明授权
    NATURAL KILLER CELL LINES AND METHODS OF USE 失效
    自然杀伤细胞系和使用方法

    公开(公告)号：EP1007630B1

    公开(公告)日：2006-04-19

    申请号：EP98920012.6

    申请日：1998-04-30

    申请人： Klingemann, Hans

    发明人： Klingemann, Hans

    IPC分类号： C12N5/00 ,  C12N5/08 ,  C12N5/22 ,  C12N15/00 ,  C12N15/63 ,  C12N15/85 ,  A01N63/00

    CPC分类号： C12N5/0093 ,  A61K2035/124 ,  C07K14/55 ,  C12N5/0646 ,  C12N2510/00

    摘要： The invention relates to a natural killer cell line termed NK-92. The invention provides a vector for transfecting a mammalian cell which includes a nucleic acid sequence encoding a cytokine that promotes the growth of NK-92. Additionally, the invention provides an NK-92 cell, or an NK-92 cell modified by transfection with a vector conferring advantageous properties, which is unable to proliferate and which preserves effective cytotoxic activity. The invention further provides a modified NK-92 cell that is transfected with a vector encoding a cytokine that promotes the growth of NK-92 cells. The cell secretes the cytokine upon being cultured under conditions that promote cytokine secretion, and furthermore secretes the cytokine in vivo upon being introduced into a mammal. In a significant embodiment, the cytokine is interleukin 2. The present invention also provides methods of purging cancer cells from a biological sample, of treating a cancer ex vivo in a mammal, and of treating a cancer in vivo in a mammal employing a natural killer cell, such as NK-92 itself, an NK-92 cell which is unable to proliferate and which preserves effective cytotoxic activity, or natural killer cells transfected with a vector encoding a cytokine.