公开(公告)号：EP2730655A1

公开(公告)日：2014-05-14

申请号：EP12007663.3

申请日：2012-11-12

申请人： Evonik Industries AG

发明人： Schaffer, Steffen, Dr. ,  Andrea, Heiko ,  Wessel, Mirja, Dr. ,  Hennemann, Hans-Georg, Dr. ,  Häger, Harald, Dr.

IPC分类号： C12N15/52 ,  C12N9/02 ,  C12N9/18 ,  C12P7/62 ,  C12P7/64

CPC分类号： C12P7/62 ,  C12N9/18 ,  C12P7/6436 ,  C12Y301/01085 ,  Y02P20/582

摘要： Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Umsetzung eines Carbonsäureesters der Formel (I)

        R 1 -A-COOR 2      (I),

wobei R 1 aus der Gruppe ausgewählt ist, die Wasserstoff, -CH 2 OH, -CHO, -COOR 3 , -CH 2 SH, -CH 2 OR 3 und -CH 2 NH 2 umfasst,
wobei R 2 aus der Gruppe ausgewählt ist, die Alkyl, bevorzugt Methyl, Ethyl und Propyl, umfasst,
wobei R 3 aus der Gruppe ausgewählt ist, die Wasserstoff und Alkyl, bevorzugt Methyl, Ethyl und Propyl, umfasst,
und wobei es sich bei A um einen Alkylrest mit wenigstens vier Kohlenstoffatomen handelt,
mittels einer Zelle, umfassend den Schritt
a) Kontaktieren der Zelle mit dem Carbonsäureester in einer wässrigen Lösung,

wobei es sich bei der Zelle um eine rekombinante Zelle handelt, bei der die Aktivität eines Polypeptides umfassend SEQ ID NO 2 oder eine Variante davon gegenüber dem Wildtyp der Zelle verringert ist, sowie eine dazu geeignete Zelle und deren Verwendungen.

摘要翻译： 通过电池转化羧酸酯（I）包括在水溶液中使细胞与羧酸酯（I）接触。 细胞是重组细胞。 包含与说明书或其变体中给出的256个氨基酸（SEQ ID NO：2）的肽序列的多肽的细胞活性相比，野生型的细胞减少。 通过电池转化式（R1-A-COOR2）（I）的羧酸酯包括（使细胞与羧酸酯在水溶液中接触，细胞是重组细胞，细胞活性为 包含与说明书或其变体中给出的256个氨基酸（SEQ ID NO：2）的肽序列的多肽相比，野生型的细胞R1：H，-CH 2 OH，-CHO，-COOR 3，-CH 2 SH， -CH 2 OR 3或-CH 2 NH 2; R 2：烷基，优选CH 3，C 2 H 5，C 3 H 8; R 3：H，烷基，优选CH 3，C 2 H 5，C 3 H 8;和A 4 C 4烷基独立 还包括：（1）表达重组烷烃羟化酶的细胞;和（2）包含在水溶液中的细胞和式（R1-A1-COOR2）（II）的羧酸酯的反应混合物。 A1：任选取代的，任选支链和/或环状的4C，优选8C烷基，4C，优选8C芳基或4C，优选8C芳烷基。

公开(公告)号：EP2607491A1

公开(公告)日：2013-06-26

申请号：EP12197644.3

申请日：2012-12-18

申请人： Evonik Industries AG

发明人： Hennemann, Hans-Georg, Dr. ,  Schaffer, Steffen, Dr. ,  Wessel, Mirja, Dr. ,  Haas, Thomas, Dr. ,  Gielen, Jasmin ,  Berse, Katharina ,  Hafkemeyer, Sabine ,  Pötter, Markus, Dr. ,  Erhardt, Frank, Dr. ,  Schiebelhut, Marion

IPC分类号： C12P7/62 ,  C12N15/52

CPC分类号： C12P7/6436 ,  C12N9/001 ,  C12P13/04 ,  C12Y103/99003

摘要： Die vorliegende Anmeldung betrifft ein Verfahren zur verbesserten Abtrennung einer hydrophoben organischen Lösung von einem wässrigen Kulturmedium umfassend die Schritte, Bereitstellen eines wässrigen Kulturmediums umfassend eine stoffwechselaktive Zelle, Kontaktieren des wässrigen Kulturmediums mit einer hydrophoben organischen Lösung, Abtrennen der hydrophoben organischen Lösung von dem wässrigen Kulturmedium, wobei die Zelle eine ihrem Wildtyp gegenüber verringerte Aktivität wenigstens eines Enzyms aufweist, das eine der Reaktionen der β-Oxidation von Fettsäuren katalysiert. Weiterhin betrifft die Erfindung die Verwendung einer stoffwechselaktiven Zelle, die eine ihrem Wildtyp gegenüber verringerte Aktivität eines Enzyms aufweist, das eine der Reaktionen der β-Oxidation von Fettsäuren katalysiert, bevorzugt eines Enzyms ausgewählt aus der Gruppe umfassend FadA, FadB, FadD, FadL und FadE sowie Varianten davon, bevorzugter FadE oder einer Variante davon, zur verbesserten Abtrennung einer hydrophoben organischen Lösung von einem wässrigen Kulturmedium umfassend die stoffwechselaktive Zelle.

摘要翻译： 改进从在wässrige培养基的疏水性有机溶液中分离，包括：制备于wässrige培养介质，其包括代谢活性细胞，与疏水性有机溶液接触的wässrige培养基，然后分离从wässrige培养基，其中所述疏水性有机溶液 的代谢活性细胞的活性降低是相比于活性的野生型细胞，和降低的活性是在一种酶的至少催化那样的脂肪酸β-氧化的一个反应。 独立权利要求中包括了：（1）利用代谢活性细胞的方法，包括具有降低的活性，相比野生型细胞，其中所述酶是被配置为提高分离脂肪酸的β-氧化的酶的 从培养基wässrige包含的代谢活性细胞中的疏水性有机溶剂; （2）利用酶的基因敲除的催化那样的脂肪酸的β-氧化的一种反应，作为代谢活性的基因组成的一部分，以提高疏水性有机溶剂的从培养基中wässrige包括的分离 代谢活性细胞; （3）的细胞，具有降低的活性，相比野生型细胞，和重组单加氧酶，优选烷烃羟化酶脂肪酸的β-氧化的酶，包括： 和（4）的反应混合物，wässrige溶液，其包含的代谢活性细胞的包含具有降低的活性，和疏水性有机溶液，其中所述代谢活性细胞的活性降低是相比于野生型的活性细胞和的 降低的活性是在一种酶的至少催化那样的脂肪酸β-氧化的一个反应。

公开(公告)号：EP2639308A1

公开(公告)日：2013-09-18

申请号：EP12159087.1

申请日：2012-03-12

申请人： Evonik Industries AG

发明人： Schaffer, Steffen, Dr. ,  Hauberg, Michaela ,  Wessel, Mirja, Dr. ,  Hennemann, Hans-Georg, Dr. ,  Pfeffer, Jan-Christoph, Dr. ,  Hass, Thomas, Dr. ,  Häger, Harald, Dr.

IPC分类号： C12N15/52 ,  C12N9/00 ,  C12N9/10 ,  C12P7/42 ,  C12P7/62 ,  C12P7/64 ,  C12P13/00

CPC分类号： C12P7/6436 ,  C07K14/21 ,  C07K14/79 ,  C12N9/0006 ,  C12N9/0016 ,  C12N9/0077 ,  C12N9/0095 ,  C12N9/1096 ,  C12P7/42 ,  C12P7/62 ,  C12P7/6409 ,  C12P13/005 ,  C12Y114/14001

摘要： Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Oxidation einer Fettsäure oder eines Esters davon der Formel (I)

         H 3 C - (CH 2 ) n - COOR     (I),

wobei R aus der Gruppe ausgewählt ist, die H, Methyl, Ethyl, Propyl und Butyl umfasst,
wobei n 0 bis 30, bevorzugt 6 bis 24 ist,
umfassend den Schritt Oxidieren der Fettsäure oder des Esters davon durch Kontaktieren mit einer Cytochrom P450-Monooxygenase der CYP153-Familie in Anwesenheit von molekularem Sauerstoff und NAD(P)H und einen Ganzzellkatalysator exprimierend eine rekombinante Cytochrom P450-Monooxygenase der CYP153-Familie, eine rekombinante Alkoholdehydrogenase, eine rekombinante Transaminase und optional ein oder mehr als ein rekombinantes Enzym aus der Gruppe umfassend Alanindehydrogenase, Ferredoxin und Ferredoxin-Reduktase sowie die Verwendung dieses Ganzzellkatalysators zur Oxidation einer Fettsäure oder eines Esters davon.

摘要翻译： 氧化脂肪酸或其酯（I）包括（a）在分子氧和NADPH存在下，使（I）与细胞色素P153（CYP153）家族的细胞色素P450-单加氧酶接触。 氧化脂肪酸或其式（H 3C-（CH 2）n-COOR）（I）的酯包括（a）在分子氧存在下使（I）与细胞色素P153（CYP153）家族的细胞色素P450-单加氧酶 NADPH。 R：H，CH 3，乙基，丙基或丁基; 和n：0-30，优选6-24。 还包括表达重组细胞色素P450单加氧酶，重组醇脱氢酶，重组转氨酶和任选的至少一种重组酶，优选丙氨酸脱氢酶，铁氧还蛋白或铁氧还蛋白还原酶的全细胞催化剂的独立权利要求。

公开(公告)号：EP2607490A1

公开(公告)日：2013-06-26

申请号：EP11195221.4

申请日：2011-12-22

申请人： Evonik Industries AG

发明人： Hennemann, Hans-Georg, Dr. ,  Schaffer, Steffen, Dr. ,  Wessel, Mirja, Dr. ,  Haas, Thomas, Dr. ,  Gielen, Jasmin ,  Berse, Katharina ,  Hafkemeyer, Sabine ,  Pötter, Markus, Dr. ,  Erhardt, Frank, Dr. ,  Schiebelhut, Marion

IPC分类号： C12P7/62 ,  C12N15/52

CPC分类号： C12P7/6436 ,  C12N9/001 ,  C12P13/04 ,  C12Y103/99003

摘要： Die vorliegende Anmeldung betrifft ein Verfahren zur verbesserten Abtrennung einer hydrophoben organischen Lösung von einem wässrigen Kulturmedium umfassend die Schritte, Bereitstellen eines wässrigen Kulturmediums umfassend eine stoffwechselaktive Zelle, Kontaktieren des wässrigen Kulturmediums mit einer hydrophoben organischen Lösung, Abtrennen der hydrophoben organischen Lösung von dem wässrigen Kulturmedium, wobei die Zelle eine ihrem Wildtyp gegenüber verringerte Aktivität wenigstens eines Enzyms aufweist, das eine der Reaktionen der β-Oxidation von Fettsäuren katalysiert. Weiterhin betrifft die Erfindung die Verwendung einer stoffwechselaktiven Zelle, die eine ihrem Wildtyp gegenüber verringerte Aktivität eines Enzyms aufweist, das eine der Reaktionen der β-Oxidation von Fettsäuren katalysiert, bevorzugt eines Enzyms ausgewählt aus der Gruppe umfassend FadA, FadB, FadD, FadL und FadE sowie Varianten davon, bevorzugter FadE oder einer Variante davon, zur verbesserten Abtrennung einer hydrophoben organischen Lösung von einem wässrigen Kulturmedium umfassend die stoffwechselaktive Zelle.

摘要翻译： 改进从在wässrige培养基的疏水性有机溶液中分离，包括：制备于wässrige培养介质，其包括代谢活性细胞，与疏水性有机溶液接触的wässrige培养基，然后分离从wässrige培养基，其中所述疏水性有机溶液 的代谢活性细胞的活性降低是相比于活性的野生型细胞，和降低的活性是在一种酶的至少催化那样的脂肪酸β-氧化的一个反应。 独立权利要求中包括了：（1）利用代谢活性细胞的方法，包括具有降低的活性，相比野生型细胞，其中所述酶是被配置为提高分离脂肪酸的β-氧化的酶的 从培养基wässrige包含的代谢活性细胞中的疏水性有机溶剂; （2）利用酶的基因敲除的催化那样的脂肪酸的β-氧化的一种反应，作为代谢活性的基因组成的一部分，以提高疏水性有机溶剂的从培养基中wässrige包括的分离 代谢活性细胞; （3）的细胞，具有降低的活性，相比野生型细胞，和重组单加氧酶，优选烷烃羟化酶脂肪酸的β-氧化的酶，包括： 和（4）的反应混合物，wässrige溶液包含含有代谢活性细胞，其具有降低的活性，和疏水性有机溶液，其中所述代谢活性细胞的活性降低是相比于野生型活性的细胞，并 降低的活性脂肪酸的β-氧化的至少之一该酶催化做一个反应。