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    UBIQUITIN CHAIN ASSEMBLY
    1.
    发明公开
    UBIQUITIN CHAIN ASSEMBLY 审中-公开

    公开(公告)号：EP2758420A1

    公开(公告)日：2014-07-30

    申请号：EP12766386.2

    申请日：2012-09-24

    申请人： Medical Research Council

    发明人： HOSPENTHAL, Manuela K. ,  KOMANDER, David

    IPC分类号： C07K1/08 ,  C07K1/02

    CPC分类号： C12P21/02 ,  C07K14/00 ,  C07K2319/95

    摘要： There is provided a method for producing free polyubiquitin chains linked through a single desired lysine residue, comprising the steps of: (a) selecting an E3 ubiquitin ligase enzyme which is homologous to mammalian HECT E3 ligases and possesses the desired lysine residue specificity; (b) incubating the E3 enzyme with an E1 ubiquitin activating enzyme, an E2 ubiquitin conjugating enzyme and monomeric ubiquitin; and (c) if undesired linkages are present, removing the undesired linkages by exposure to a DUB enzyme having the appropriate specificity.

    摘要翻译： 提供了一种产生通过单个所需赖氨酸残基连接的游离多聚遍在蛋白链的方法，该方法包括以下步骤：（a）选择与哺乳动物HECT E3连接酶同源且具有所需赖氨酸残基特异性的E3泛素连接酶; （b）将E3酶与E1泛素激活酶，E2泛素缀合酶和单体泛素温育; 和（c）如果存在不需要的连接，通过暴露于具有适当特异性的DUB酶除去不需要的连接。

    FLUORESCENT -LABELLED DIUBIQUITIN SUBSTRATE FOR A DEUBIQUITINASE ASSAY
    3.
    发明公开
    FLUORESCENT -LABELLED DIUBIQUITIN SUBSTRATE FOR A DEUBIQUITINASE ASSAY 有权
    荧光标记的二硫苏糖酸底物用于DEUBIQUITIITINASE测定

    公开(公告)号：EP2580344A1

    公开(公告)日：2013-04-17

    申请号：EP11729135.1

    申请日：2011-06-14

    申请人： Medical Research Council

    发明人： KOMANDER, David ,  YE, Yu

    IPC分类号： C12Q1/37

    CPC分类号： C07K17/00 ,  C12Q1/37 ,  G01N2440/36 ,  G01N2500/04

    摘要： There is described a substrate for measuring the activity of a deubiquitinating enzyme (DUB), comprising a diubiquitin molecule, wherein an ubiquitin monomer is labeled with a fluorescent label, as well as an assay for DUB enzymes using such substrates.

    摘要翻译： 描述了用于测量脱遍在蛋白化酶（DUB）活性的底物，其包含二泛素分子，其中泛素单体用荧光标记物标记，以及使用这种底物的DUB酶测定法。