公开(公告)号：JPWO2007058376A1

公开(公告)日：2009-05-07

申请号：JP2007545346

申请日：2006-11-16

申请人： 株式会社ポストゲノム研究所 ,  国立大学法人岐阜大学

发明人： 崇 金森 ,  崇 金森 ,  一八 西川 ,  一八 西川 ,  隆志 横川 ,  隆志 横川 ,  敏 大野 ,  敏 大野

IPC分类号： C12P21/00 ,  C12N15/09

CPC分类号： C12P21/00

摘要： N末端標識法は,タンパク質のN末端のメチオニン残基のαアミノ基特異的に標識されたタンパク質を合成する方法である。従来法では,標識効率(合成されたタンパク質のうち,標識されたタンパク質の割合)が1−2%程度と極めて低かった。本願発明者らは、(1)開始tRNAを除いた実質的に伸長tRNAのみからなるtRNA混合液を用い,さらにメチオニルtRNAトランスフォルミラーゼ,10−フォルミル5,6,7,8−テトラヒドロ葉酸を含まない合成系(in vitro転写・翻訳系)を利用する、(2)標識されたメチオニル開始tRNAを分離精製する、及び/又は(3)標識タンパク質合成反応時間も制御することによって、標識効率を大幅に改善した。