部位特異的にタンパク質にチロシンアナログを導入する方法

    公开(公告)号:JPWO2006135096A1

    公开(公告)日:2009-01-08

    申请号:JP2007521381

    申请日:2006-06-14

    CPC classification number: C12P21/02

    Abstract: 目的の遺伝子に変異を導入することなく、アンバーコドン等ストップコドン以外の、アミノ酸をコードするコドンにチロシンアナログを含む変異タンパク質の製造方法を提供することを1つの課題とする。(イ) 酵母由来のチロシンtRNAに変異を導入し、AGU用に改変し、(ロ) 酵母由来のチロシルtRNA合成酵素の変異体を利用し、(ハ) 大腸菌細胞抽出液タンパク質合成系から全種類tRNAを選択的に分離し、全種類tRNAからAGU用のtRNAのみを除去し、AGU用tRNA以外を再度大腸菌由来無細胞タンパク質合成系に戻す。上記tRNATyr改変体及びチロシルtRNA合成酵素の変異体を用いて、AGU用tRNAを除いた大腸菌由来の無細胞タンパク質合成系により、非天然アミノ酸含有タンパク質を合成できることを見い出した。

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