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公开(公告)号:JPWO2007058376A1
公开(公告)日:2009-05-07
申请号:JP2007545346
申请日:2006-11-16
Applicant: 株式会社ポストゲノム研究所 , 国立大学法人岐阜大学
CPC classification number: C12P21/00
Abstract: N末端標識法は,タンパク質のN末端のメチオニン残基のαアミノ基特異的に標識されたタンパク質を合成する方法である。従来法では,標識効率(合成されたタンパク質のうち,標識されたタンパク質の割合)が1−2%程度と極めて低かった。本願発明者らは、(1)開始tRNAを除いた実質的に伸長tRNAのみからなるtRNA混合液を用い,さらにメチオニルtRNAトランスフォルミラーゼ,10−フォルミル5,6,7,8−テトラヒドロ葉酸を含まない合成系(in vitro転写・翻訳系)を利用する、(2)標識されたメチオニル開始tRNAを分離精製する、及び/又は(3)標識タンパク質合成反応時間も制御することによって、標識効率を大幅に改善した。
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公开(公告)号:JPWO2006054807A1
公开(公告)日:2008-06-05
申请号:JP2006545222
申请日:2005-11-22
Applicant: 国立大学法人岐阜大学
Abstract: 本願発明は、トリプトファンアナログを含む非天然アミノ酸含有蛋白質製造において、(イ)非天然型アミノ酸を運ぶtRNAは内在性のアミノアシルtRNA合成酵素(aaRS)には認識されず、非天然型アミノ酸専用のaaRSにのみ認識され、(ハ)また内在性のtRNAは非天然型アミノ酸専用のaaRSに認識されない蛋白質合成系を提供することを課題とする。真核生物由来の無細胞蛋白質合成系で、酵母ミトコンドリアのトリプトファニルtRNA合成酵素をミトコンドリア tRNATrp(mt tRNATrp)と組み合わせて使用すること。
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公开(公告)号:JPWO2013154208A1
公开(公告)日:2015-12-21
申请号:JP2014510225
申请日:2013-04-10
Applicant: 国立大学法人岐阜大学 , 一般財団法人ケケン試験認証センター
IPC: G01N27/62
CPC classification number: C07K7/06 , C07K5/06078 , C07K5/06104 , C07K5/1008 , C07K5/1021 , C07K7/08 , G01N33/362 , G01N33/6848
Abstract: 獣毛を含む試料について存在量の少ないDNAではなく、獣毛の主たる成分であるタンパク質を直接分析し、前記獣毛の種類の特定および定量ができる方法を提供することを課題とする。本願発明は、獣毛の主要なタンパク質成分であるケラチンなどのタンパク質成分について、獣毛サンプルを質量分析することで、分析結果として質量、質量電荷比(m/z)、前記質量電荷比についてのLC溶出時間、及びマーカーとして有用な部分配列を特定して、これらを基に、獣毛の種類の特定及び定量を行う方法を提供する。
Abstract translation: 而不是DNA丰度少含有动物毛发样品,它直接分析蛋白是动物毛发的主要成分,并以提供能够识别和量化动物毛发的类型的方法。 本发明提供了用于蛋白质组分,如角蛋白,动物毛发的主要蛋白质成分,通过质谱分析法动物毛发样品,分析的结果的质量,质荷比(M / Z),对于质荷比 LC洗脱时间,并基于这些识别有用部分序列作为标记,执行特定和定量的类型的动物毛发的方法。
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公开(公告)号:JPWO2007061128A1
公开(公告)日:2009-05-07
申请号:JP2007546539
申请日:2006-11-22
Applicant: 国立大学法人岐阜大学
Abstract: 本願発明は、N末端を修飾したタンパク質を大量に提供することを課題とする。本願発明は、N末端にArg又はLysを有する蛋白質については、当該末端にLeu又はPheを付加する能力を備えたロイシン/フェニルアラニン−tRNAタンパク質転移酵素(LFPT)を用いて、修飾フェニルアラニンtRNAPheから修飾フェニルアラニンをN末端アルギニンに付加させることにより、N末に修飾されたフェニルアラニンを有するタンパク質を調製する方法を提供する。
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公开(公告)号:JPWO2006135096A1
公开(公告)日:2009-01-08
申请号:JP2007521381
申请日:2006-06-14
Applicant: 国立大学法人岐阜大学
CPC classification number: C12P21/02
Abstract: 目的の遺伝子に変異を導入することなく、アンバーコドン等ストップコドン以外の、アミノ酸をコードするコドンにチロシンアナログを含む変異タンパク質の製造方法を提供することを1つの課題とする。(イ) 酵母由来のチロシンtRNAに変異を導入し、AGU用に改変し、(ロ) 酵母由来のチロシルtRNA合成酵素の変異体を利用し、(ハ) 大腸菌細胞抽出液タンパク質合成系から全種類tRNAを選択的に分離し、全種類tRNAからAGU用のtRNAのみを除去し、AGU用tRNA以外を再度大腸菌由来無細胞タンパク質合成系に戻す。上記tRNATyr改変体及びチロシルtRNA合成酵素の変異体を用いて、AGU用tRNAを除いた大腸菌由来の無細胞タンパク質合成系により、非天然アミノ酸含有タンパク質を合成できることを見い出した。
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