一种高产乳酰-N-四糖的微生物的构建方法及应用

    公开(公告)号:WO2023011576A1

    公开(公告)日:2023-02-09

    申请号:PCT/CN2022/110181

    申请日:2022-08-04

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 提供了一种高产乳酰-N-四糖的微生物的构建方法及应用。以前期构建完成的高效生产前体物质乳酰-N-三糖II的菌株为出发菌株,过表达合成乳酰-N-四糖的关键基因,使其拥有生产乳酰-N-四糖的合成能力。通过筛选高效的β-1,3-半乳糖基转移酶基因,并合理设计在载体pCDFDuet-1上共表达β-1,3-半乳糖基转移酶基因和强化UDP-半乳糖途径关键基因UDP-葡萄糖4差向异构酶基因(galE),从而提高乳酰-N-四糖的合成,在摇瓶实验中,大肠杆菌生产乳酰-N-四糖的能力为3.04g/L,在3L发酵罐中,乳酰-N-四糖的产量达到25.49g/L。

    α-N-アセチルグルコサミニダーゼの変異体

    公开(公告)号:WO2022045273A1

    公开(公告)日:2022-03-03

    申请号:PCT/JP2021/031431

    申请日:2021-08-27

    Abstract: 本発明は,ヒトα-N-アセチルグルコサミニダーゼ(hNAGLU)の変異体に関し,詳しくは,hNAGLUのアミノ酸配列に変異を加えることにより,hNAGLUをコードする遺伝子を導入した宿主細胞におけるhNAGLUの発現量を,野生型hNAGLUをコードする遺伝子を導入した場合と比較して高めることのできるhNAGLU変異体に関する。かかるhNAGLU変異体は,例えば配列番号3,配列番号5,配列番号9,配列番号11,配列番号15,又は配列番号19で示されるアミノ酸配列を有するもの,若しくはこれらのアミノ酸配列に変異を加えたアミノ酸配列を有するものである。

    一种噬热β-葡萄糖苷酶的制备及应用

    公开(公告)号:WO2021217902A1

    公开(公告)日:2021-11-04

    申请号:PCT/CN2020/102671

    申请日:2020-07-17

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种噬热β-葡萄糖苷酶的制备及应用,属于基因工程和发酵工程技术领域。通过构建重组菌,异源表达了来源于嗜热真菌Talaromyces piceae的β-葡萄糖苷酶TpBgl3A,所述重组菌在3.6L发酵罐中产酶可达2324U/mL。生产得到的β-葡萄糖苷酶TpBgl3A能在较低加酶量下利用葡萄糖为底物高转化率制备低聚龙胆糖,显著降低生产成本;在以葡萄糖和纤维二糖为底物的反应体系中,低聚龙胆糖转化率达到26.2%,具有工业化生产低聚龙胆糖的潜力。

    一种β-半乳糖苷酶GALA及其应用
    9.
    发明申请

    公开(公告)号:WO2021212723A1

    公开(公告)日:2021-10-28

    申请号:PCT/CN2020/113644

    申请日:2020-09-06

    Applicant: 青岛大学

    Abstract: 提供了一种β-半乳糖苷酶GalA及其应用。所述β-半乳糖苷酶GalA氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。所述β-半乳糖苷酶GalA的重组表达及纯化制备方法,发酵液酶活力可达3795.6U/mL,一步纯化纯度>97%,回收率为79.5%。所述β-半乳糖苷酶GalA具有良好的热稳定性和储存稳定性,最适反应温度为50℃,在50℃下持续孵育24h仍保留89.7%的酶活力,室温下(30℃)储存30天,仍然能保留81.5%的酶活力。所述β-半乳糖苷酶GalA活力高、稳定性好,降解乳糖能力强,具有良好的应用潜质。

    一种沙质微泡菌β-半乳糖苷酶及其编码基因与应用

    公开(公告)号:WO2021155674A1

    公开(公告)日:2021-08-12

    申请号:PCT/CN2020/122118

    申请日:2020-10-20

    Abstract: 提供一种沙质微泡菌β-半乳糖苷酶及其编码基因与应用。所述沙质微泡菌β-半乳糖苷酶为序列表的序列2所示的蛋白质。该酶酶学性质优异,对天然底物乳糖的比酶活为38.69U/mg。同时可高效水解乳糖,冷藏温度4℃下以1U/mL加酶量,反应36h后,水解牛奶中80%以上的乳糖,反应48h后,牛奶中90%以上的乳糖被水解,反应72h后,全部水解牛奶中乳糖。另外,反应84h后,水解5%(w/v)的乳清溶液中90%以上的乳糖。该酶对于食品工业中低乳糖或无乳糖乳制品的生产,具有重要的应用价值。

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