本发明公开了一种当归六黄汤组合物的指纹图谱构建方法和检测方法，该构建方法包括以下步骤：(1)取5‑羟甲基糠醛、绿原酸、盐酸黄柏碱、阿魏酸、黄芩苷和盐酸小檗碱为对照品，分别制成各参照物溶液；(2)取当归、生地黄、熟地黄、黄芩、黄连、黄柏和黄芪，制成当归六黄汤组合物，将当归六黄汤组合物制成供试品溶液；(3)精密吸取供试品溶液和各参照物溶液，注入液相色谱仪进行色谱分析，检测波长为280nm～320nm，得到供试品指纹图谱和参照物色谱图谱，制定当归六黄汤组合物的标准指纹图谱。该指纹图谱构建方法可准确检测当归六黄汤组合物品质的标准指纹图谱，获得能有效的控制当归六黄汤制剂产品质量。