本发明公开了一种高产L‑高丝氨酸的重组菌及其制备方法与应用。本发明提供了的重组菌，通过改造底盘宿主菌中的如下A)和B)的2个途径，得到的重组菌：A)加强底盘宿主菌中富马酸到天冬氨酸的代谢途径，使从草酰乙酸到L‑天冬氨酸和从富马酸到L‑天冬氨酸这2个途径代谢流量1:1匹配，B)加强所述底盘宿主菌中的天冬氨酸到高丝氨酸代谢途径；本发明优点如下：1、敲除iclR基因；2、使用L‑高丝氨酸外排泵基因rthB；3、精确调控L‑天冬氨酸的2条合成途径，即从草酰乙酸OAA合成途径和从富马酸FUM合成途径，使这两个合成通量达到1:1匹配，从而实现L‑高丝氨酸发酵过程还原力平衡，使L‑高丝氨酸产量最大化。