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公开(公告)号：CN113122487A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN202010025126.X
申请日：2020-01-10
申请人： 中国科学院微生物研究所
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/77 , C12N15/75 , C12N15/78 , C12P13/08 , C12P13/06 , C12R1/19 , C12R1/15 , C12R1/07 , C12R1/38
摘要： 本发明公开了一种高产L‑高丝氨酸的重组菌及其制备方法与应用。本发明提供了的重组菌，通过改造底盘宿主菌中的如下A)和B)的2个途径，得到的重组菌：A)加强底盘宿主菌中富马酸到天冬氨酸的代谢途径，使从草酰乙酸到L‑天冬氨酸和从富马酸到L‑天冬氨酸这2个途径代谢流量1:1匹配，B)加强所述底盘宿主菌中的天冬氨酸到高丝氨酸代谢途径；本发明优点如下：1、敲除iclR基因；2、使用L‑高丝氨酸外排泵基因rthB；3、精确调控L‑天冬氨酸的2条合成途径，即从草酰乙酸OAA合成途径和从富马酸FUM合成途径，使这两个合成通量达到1:1匹配，从而实现L‑高丝氨酸发酵过程还原力平衡，使L‑高丝氨酸产量最大化。
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公开(公告)号：CN113956992B
公开(公告)日：2023-09-01
申请号：CN202110290555.4
申请日：2021-03-18
申请人： 中国科学院微生物研究所
摘要： 本发明公开了一株耐受L‑高丝氨酸的大肠杆菌及其应用。本发明提供的耐受L‑高丝氨酸的大肠杆菌为大肠杆菌HS02CGMCC No.21837。本发明还提供了一种重组菌，是通过改造底盘宿主菌中的两条代谢途径，使两者代谢通量1:1匹配后得到的重组菌；两代谢途径为：从草酰乙酸合成天冬氨酸再到L‑高丝氨酸；从富马酸合成天冬氨酸再到L‑高丝氨酸；所述底盘宿主菌为在具有L‑高丝氨酸耐受性且具有天冬氨酸到苏氨酸通路的出发细菌中进行降低lacI、metA、lysA、thrB、sthA和iclR的活性或其编码基因的表达量，并提高ppc和pntAB的活性或其编码基因的表达量后得到的菌。本发明所获得的L‑高丝氨酸高水平发酵工程菌株，其L‑高丝氨酸的发酵强度可高达2.10g/L/h。
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公开(公告)号：CN108070606A
公开(公告)日：2018-05-25
申请号：CN201711335483.0
申请日：2017-12-14
申请人： 河北省微生物研究所 , 中国科学院微生物研究所
IPC分类号： C12N15/57 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N15/75 , C12N15/10 , C12N9/54 , C12N1/21 , C12R1/125 , C12R1/19
摘要： 本发明属于新基因的制备及工程菌的构建，特别是指一种利用分子伴侣prsA构建的中性蛋白酶基因、蛋白、枯草芽孢杆菌及制备和应用。本发明运用分子生物学技术，将分子伴侣PrsA与中性蛋白酶基因进行整合，构建了pHT43-npr-PrsA重组质粒，最后转化到宿主菌枯草芽孢杆菌WB800N中，构建了一株新的枯草芽孢杆菌工程菌株CGMCC No.14837，使分子伴侣PrsA与中性蛋白酶基因共表达，有效提高了中性蛋白酶的表达水平。
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公开(公告)号：CN114015633B
公开(公告)日：2024-09-27
申请号：CN202111253877.8
申请日：2021-10-27
申请人： 中国科学院微生物研究所
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/78 , C12N15/60 , C12N15/54 , C12N15/53 , C12N15/52 , C12N15/31 , C12N9/88 , C12P7/52 , C12R1/38 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了重组菌所述重组菌表达2‑酮异戊酸脱酸酶(也叫酮酸脱羧酶)。所述重组菌为将受体菌的基因组进行改造得到的重组菌，所述改造包括使所述受体菌表达所述2‑酮异戊酸脱酸酶，所述受体菌为假单胞菌或大肠杆菌。本发明所述重组菌合成丙酸的途径为2‑酮丁酸经2‑酮异戊酸脱酸酶催化合成丙酸。提供了丙酸合成的新的代谢途径。本发明改造获得的假单胞菌重组菌PS32，催化24小时的苏氨酸合成丙酸的转化率为为96.67％；补料后所述PS32催化苏氨酸合成丙酸的转化率可为98.47％。本发明改造获得的重组大肠杆菌24小时转化400mM的L‑苏氨酸为丙酸盐393mM，转化率为98.25％。
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公开(公告)号：CN113122487B
公开(公告)日：2022-05-24
申请号：CN202010025126.X
申请日：2020-01-10
申请人： 中国科学院微生物研究所
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/77 , C12N15/75 , C12N15/78 , C12P13/08 , C12P13/06 , C12R1/19 , C12R1/15 , C12R1/07 , C12R1/38
摘要： 本发明公开了一种高产L‑高丝氨酸的重组菌及其制备方法与应用。本发明提供了的重组菌，通过改造底盘宿主菌中的如下A)和B)的2个途径，得到的重组菌：A)加强底盘宿主菌中富马酸到天冬氨酸的代谢途径，使从草酰乙酸到L‑天冬氨酸和从富马酸到L‑天冬氨酸这2个途径代谢流量1:1匹配，B)加强所述底盘宿主菌中的天冬氨酸到高丝氨酸代谢途径；本发明优点如下：1、敲除iclR基因；2、使用L‑高丝氨酸外排泵基因rthB；3、精确调控L‑天冬氨酸的2条合成途径，即从草酰乙酸OAA合成途径和从富马酸FUM合成途径，使这两个合成通量达到1:1匹配，从而实现L‑高丝氨酸发酵过程还原力平衡，使L‑高丝氨酸产量最大化。
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公开(公告)号：CN107881181A
公开(公告)日：2018-04-06
申请号：CN201711335714.8
申请日：2017-12-14
申请人： 河北省微生物研究所 , 中国科学院微生物研究所
摘要： 本发明属于新基因的制备及工程菌的构建，特别是指一种利用分子伴侣DnaK构建的中性蛋白酶基因、蛋白、枯草芽孢杆菌及制备和应用。本发明运用分子生物学技术，将分子伴侣DnaK与中性蛋白酶基因进行整合，构建了pHT43-npr-DnaK重组质粒，最后转化到宿主菌枯草芽孢杆菌WB800N中，构建了一株新的枯草芽孢杆菌工程菌株CGMCC No.14836，使分子伴侣DnaK与中性蛋白酶基因共表达，有效提高了中性蛋白酶的表达水平。
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公开(公告)号：CN114015633A
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN202111253877.8
申请日：2021-10-27
申请人： 中国科学院微生物研究所
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/78 , C12N15/60 , C12N15/54 , C12N15/53 , C12N15/52 , C12N15/31 , C12N9/88 , C12P7/52 , C12R1/38 , C12R1/19
摘要： 本发明公开了重组菌所述重组菌表达2‑酮异戊酸脱酸酶(也叫酮酸脱羧酶)。所述重组菌为将受体菌的基因组进行改造得到的重组菌，所述改造包括使所述受体菌表达所述2‑酮异戊酸脱酸酶，所述受体菌为假单胞菌或大肠杆菌。本发明所述重组菌合成丙酸的途径为2‑酮丁酸经2‑酮异戊酸脱酸酶催化合成丙酸。提供了丙酸合成的新的代谢途径。本发明改造获得的假单胞菌重组菌PS32，催化24小时的苏氨酸合成丙酸的转化率为为96.67％；补料后所述PS32催化苏氨酸合成丙酸的转化率可为98.47％。本发明改造获得的重组大肠杆菌24小时转化400mM的L‑苏氨酸为丙酸盐393mM，转化率为98.25％。
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公开(公告)号：CN113956992A
公开(公告)日：2022-01-21
申请号：CN202110290555.4
申请日：2021-03-18
申请人： 中国科学院微生物研究所
摘要： 本发明公开了一株耐受L‑高丝氨酸的大肠杆菌及其应用。本发明提供的耐受L‑高丝氨酸的大肠杆菌为大肠杆菌HS02CGMCC No.21837。本发明还提供了一种重组菌，是通过改造底盘宿主菌中的两条代谢途径，使两者代谢通量1:1匹配后得到的重组菌；两代谢途径为：从草酰乙酸合成天冬氨酸再到L‑高丝氨酸；从富马酸合成天冬氨酸再到L‑高丝氨酸；所述底盘宿主菌为在具有L‑高丝氨酸耐受性且具有天冬氨酸到苏氨酸通路的出发细菌中进行降低lacI、metA、lysA、thrB、sthA和iclR的活性或其编码基因的表达量，并提高ppc和pntAB的活性或其编码基因的表达量后得到的菌。本发明所获得的L‑高丝氨酸高水平发酵工程菌株，其L‑高丝氨酸的发酵强度可高达2.10g/L/h。
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