一种重金属吸附与逃逸控制工程菌株及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN113999864B

    公开(公告)日:2024-08-27

    申请号:CN202010736685.1

    申请日:2020-07-28

    发明人: 薛宇斌 杜沛 于波

    摘要: 本发明公开了重金属吸附及逃逸控制的工程菌株及其构建方法与应用。所述工程菌株是将成套系统导入宿主菌后得到的菌;所述成套系统包括重金属离子调控蛋白、冰核蛋白表面展示的重金属离子吸附蛋白、冰核蛋白表面展示的链霉亲和素结合蛋白和逃逸控制元件;所述逃逸控制元件包括阻遏蛋白PhlF、TetR、LacI与致死蛋白。本发明基于合成生物学技术,提供了在大肠杆菌或恶臭假单胞菌中实现重金属吸附、吸附后微生物富集及逃逸控制等功能于一体的水体重金属吸附及逃逸控制微生物,利用标准化的生物元件实现了复杂、精细和可预测遗传回路的搭建,经过优化设计后能够实现在不同浓度汞离子条件下完成吸附、富集和死亡行为的基因线路。

    一株耐受L-高丝氨酸的大肠杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN113956992B

    公开(公告)日:2023-09-01

    申请号:CN202110290555.4

    申请日:2021-03-18

    摘要: 本发明公开了一株耐受L‑高丝氨酸的大肠杆菌及其应用。本发明提供的耐受L‑高丝氨酸的大肠杆菌为大肠杆菌HS02CGMCC No.21837。本发明还提供了一种重组菌,是通过改造底盘宿主菌中的两条代谢途径,使两者代谢通量1:1匹配后得到的重组菌;两代谢途径为:从草酰乙酸合成天冬氨酸再到L‑高丝氨酸;从富马酸合成天冬氨酸再到L‑高丝氨酸;所述底盘宿主菌为在具有L‑高丝氨酸耐受性且具有天冬氨酸到苏氨酸通路的出发细菌中进行降低lacI、metA、lysA、thrB、sthA和iclR的活性或其编码基因的表达量,并提高ppc和pntAB的活性或其编码基因的表达量后得到的菌。本发明所获得的L‑高丝氨酸高水平发酵工程菌株,其L‑高丝氨酸的发酵强度可高达2.10g/L/h。

    PaDP蛋白和其突变体在普瑞巴林手性中间体酶法合成中的应用

    公开(公告)号:CN116515800A

    公开(公告)日:2023-08-01

    申请号:CN202310269495.7

    申请日:2023-03-16

    发明人: 刘菲霞 于波

    IPC分类号: C12N9/78 C12P13/02

    摘要: 本发明属于生物技术领域。本发明提供了一种PaDP蛋白,其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示。本发明提供的经过氨基酸位点的组合突变获得了一个活力和热稳定性提高的突变体,同时经过大肠杆菌杂酸途径的敲除进一步提高了蛋白的表达量。经过高密度发酵后的全细胞催化可以实现24h内酶解150g/L底物3‑异丁基戊二酰亚胺,且保持较高的光学纯度,可以很好的满足现在的工业化生产。

    一种重金属吸附与逃逸控制工程菌株及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN113999864A

    公开(公告)日:2022-02-01

    申请号:CN202010736685.1

    申请日:2020-07-28

    发明人: 薛宇斌 杜沛 于波

    摘要: 本发明公开了重金属吸附及逃逸控制的工程菌株及其构建方法与应用。所述工程菌株是将成套系统导入宿主菌后得到的菌;所述成套系统包括重金属离子调控蛋白、冰核蛋白表面展示的重金属离子吸附蛋白、冰核蛋白表面展示的链霉亲和素结合蛋白和逃逸控制元件;所述逃逸控制元件包括阻遏蛋白PhlF、TetR、LacI与致死蛋白。本发明基于合成生物学技术,提供了在大肠杆菌或恶臭假单胞菌中实现重金属吸附、吸附后微生物富集及逃逸控制等功能于一体的水体重金属吸附及逃逸控制微生物,利用标准化的生物元件实现了复杂、精细和可预测遗传回路的搭建,经过优化设计后能够实现在不同浓度汞离子条件下完成吸附、富集和死亡行为的基因线路。

    重组恶臭假单胞菌的构建及其在生产丙酸中的应用

    公开(公告)号:CN111197054A

    公开(公告)日:2020-05-26

    申请号:CN201811381133.2

    申请日:2018-11-20

    摘要: 本发明公开了重组恶臭假单胞菌的构建及其在生产丙酸中的应用。本发明提供了一种制备重组菌的方法,包括如下步骤:缺失或者失活假单胞菌基因组上prpC基因,得到的重组菌。本发明以苏氨酸为原料,以重组的恶臭假单胞菌KT2440为工程菌,生产丙酸。此方法既可以避免化学合成法高温高压、强酸强碱对环境的污染,又能够解决微生物发酵法产生甲酸乙酸等副产物的弊端,从而提供了一种具有重要前景的生物转化法合成丙酸的技术路线。

    一种利用固定化细菌生产罗伊氏素的方法

    公开(公告)号:CN104611384B

    公开(公告)日:2017-12-15

    申请号:CN201510032747.X

    申请日:2015-01-22

    发明人: 刘菲霞 于波

    IPC分类号: C12P7/42 C12R1/225

    摘要: 本发明公开了一种利用固定化细菌生产罗伊氏素的方法。本发明所提供的生产罗伊氏素的方法,包括如下步骤:(1)采用磁性纳米颗粒和卡拉胶的混合物对罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)进行固定,得到固定有所述罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)的胶粒;(2)配制含有步骤(1)所得胶粒的反应体系,将所述反应体系于30℃静置反应2h,从反应液中获得罗伊氏素;在所述反应体系中,含有浓度为200‑250mmol/L的甘油。该方法与传统方法相比,提高了甘油的转化率,大幅提升了罗伊氏素的产量。另外,本发明所采利用菌株为生物安全菌株,可直接用于食品领域;并且利用该方法制备的细胞催化剂具有磁性,可以很方便的从水相中分离菌体,便于罗伊氏素的纯化,固定化的细胞催化剂可以重复利用,降低了成本。

    一种生产L-乳酸的方法及其专用金橙黄微小杆菌

    公开(公告)号:CN102864105B

    公开(公告)日:2013-10-23

    申请号:CN201210356837.0

    申请日:2012-09-21

    IPC分类号: C12N1/20 C12P7/56 C12R1/01

    摘要: 本发明公开了一种生产L-乳酸的方法及其专用金橙黄微小杆菌。本发明所提供的金橙黄微小杆菌具体为金橙黄微小杆菌(Exiguobacterium aurantiacum)8-11-1,它在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC No.6154。本发明所提供的金橙黄微小杆菌(Exiguobacterium aurantiacum)8-11-1 CGMCC No.6154均有良好的钠盐耐受能力;以葡萄糖为底物,采用氢氧化钠调酸方式,在37℃条件下利用其发酵生产L-乳酸,L-乳酸浓度达133克/升,光学纯度大于99.9%,糖酸转化率超过93%。本发明所提供的金橙黄微小杆菌(Exiguobacterium aurantiacum)8-11-1 CGMCC No.6154可采用氢氧化钠调酸方式发酵生产高浓度、高光学纯的L-乳酸,有利于降低乳酸纯化成本,减少环境污染,具有重要的实际工业应用价值。

    采用棉籽蛋白同步酶解发酵生产D-乳酸的方法

    公开(公告)号:CN103184244A

    公开(公告)日:2013-07-03

    申请号:CN201310090261.2

    申请日:2013-03-20

    IPC分类号: C12P7/56 C12R1/01

    摘要: 本发明公开了一种发酵生产D-乳酸的方法。本发明所提供的发酵生产D-乳酸的方法,包括如下步骤:将芽孢乳杆菌(Sporolactobacillus sp.)接种到以棉籽蛋白作为唯一氮源的发酵培养基中进行发酵培养,所得发酵液中即含有D-乳酸;所述棉籽蛋白在所述发酵培养基中的终浓度为10-60g/L;所述芽孢乳杆菌(Sporolactobacillus sp.)为左旋芽孢乳杆菌(Sporolactobacillus laevolacticus)。本发明所提供的发酵生产D-乳酸的方法大大降低了原料成本,且酶解过程和发酵过程同步进行,大大简化了操作步骤,本发明在分批补料发酵中,发酵时间为35h,发酵液中D-乳酸的浓度可达144.4g/L,糖酸转化率达到96.1%,D-乳酸的光学纯度达到99%。