本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种高产L‑2‑氨基丁酸的无质粒基因工程菌及其应用。本发明提供的产L‑2‑氨基丁酸的无质粒基因工程菌，以Escherichia coli THR为底盘细胞经代谢工程和基因编辑技术改造得到，该基因工程菌菌株能以葡萄糖为原料，通过发酵培养得到L‑2‑氨基丁酸，在无质粒增加外源酶活的情况下，5L发酵罐分批补料发酵产量达到13.81g/L，发酵成本低，产物浓度高，没有副产物影响，产物易于纯化，适用于工业应用。