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公开(公告)号：CN114606253B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202210244457.1
申请日：2022-03-14
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种无外源氨基酸作用下高产L‑甲硫氨酸的重组大肠杆菌及其应用，所述重组大肠杆菌以赖氨酸途径敲除的L‑甲硫氨酸高产菌株E.coliW3110M2/pAm为出发菌株，在基因组上对lysA基因进行原位回补，并将lysA基因的启动子替换为PfliA启动子，再在pAm的质粒上过表达gltA基因和malY基因获得的；本发明菌株在发酵过程中无需外源添加必需氨基酸也可以生长良好，降低了发酵成本，解决了发酵过程中必需氨基酸添加时机的不确定性，降低了发酵调控的操作难度，使摇瓶中L‑甲硫氨酸产量从添加赖氨酸获得的2.44g/L提高至无外源氨基酸添加时的2.96g/L。
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公开(公告)号：CN117660391A
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202311695741.1
申请日：2023-12-12
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明提供一种鼠李糖基转移酶突变体、重组工程菌及其应用，所述鼠李糖基转移酶突变体是通过对rhlA的氨基酸序列第43位和第130位进行单突变或多突变获得的。本发明有益效果主要体现在：增强其rhlA酶活性与催化功能，由此造成鼠李糖脂产量提升；与对照rhlAB‑pBB相比，突变点F43W使产量提高了51％，突变点G130D提高了27％，突变点G130N使产量提高了17％，突变点F43W‑G130D提高了24％，突变点F43W‑G130N使产量提高了64％。
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公开(公告)号：CN117623670A
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202311608420.3
申请日：2023-11-29
申请人： 舟山市丰翔预拌混凝土有限公司 , 浙江工业大学 , 杭州来宝得新材料科技有限公司 , 浙江大学舟山海洋研究中心
IPC分类号： C04B24/38
摘要： 本发明提供了一种具有水化硬化调控功能的混凝土速干粒化剂，以实现废弃塑性混凝土的无水清理与速干粒化，并通过调控其中未水化水泥颗粒的水化凝结与硬化，实现其中未水化水泥颗粒的高质量资源化利用，本发明混凝土速干粒化剂主要由吸水组分、增稠组分、缓凝组分按比例制备而成，其中吸水组分由废弃加气混凝土、矿山酸性废水中和沉渣经破碎、烘干、混合球磨后，再进一步进行煅烧处理后加工而成，增稠组分由纤维素醚和聚丙烯酰胺混合而成，缓凝组分为蔗糖或蔗糖与氢氧化锌的混合物。本发明速干粒化剂有助减轻废弃混凝土洗刷回收处理的压力，同时可充分利用废弃混凝土中的未水化水泥颗粒，减少碳排放。
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公开(公告)号：CN117603894A
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202311370175.7
申请日：2023-10-20
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种基于甲醇同化高产D‑泛酸的基因工程菌、构建方法及应用。本发明通过在底盘菌基因组中插入Mdh基因、AOX1基因或AOX2基因，强化底盘菌甲醇同化途径，可以使得底盘菌发酵生产D‑泛酸的产量得以提高。frmA基因是甲醛脱氢酶编码基因，并进一步地，通过敲除底盘菌的frmA基因，抑制底盘菌的甲醛消耗途径，进而进一步提高底盘菌发酵生产D‑泛酸的产量。基于此，本发明构建得到了一种高产D‑泛酸的基因工程菌。
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公开(公告)号：CN117448292A
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202311390497.8
申请日：2023-10-25
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种17β‑羟基类固醇脱氢酶突变体及其在制备甾体激素宝丹酮中的应用。本发明将来源于Brettanomyces naardenensis的17β‑羟基类固醇脱氢酶（17β‑HSDbn）进行突变得到突变体17β‑HSDbnN222W、17β‑HSDbnG151Y、17β‑HSDbnF212I，分别于重组大肠杆菌中进行异源表达，其酶活较野生型17β‑HSDbn提高了1.7~2.4倍。本发明进一步将上述突变体应用于Mycobacterium sp.中进行异源表达，所构建的基因工程菌其宝丹酮产量均有较大提升，更适合工业应用，可降低宝丹酮的生产成本，进一步提高生产效率。
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公开(公告)号：CN116875519A
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202310808901.2
申请日：2023-07-04
申请人： 浙江工业大学
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/55 , C12N15/60 , C12N15/52 , C12N15/70 , C12P13/12 , C12R1/19
摘要： 本发明涉及微生物代谢工程技术领域，尤其涉及高产L‑半胱氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用。采用组合的辅因子工程策略，通过对大肠杆菌内源性NADPH再生基因的筛选，提高L‑半胱氨酸工程菌株中NADPH的供给，促进硫代谢途径的代谢通量，提高L‑半胱氨酸的生产。随后，通过引入NADP‑依赖型甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶，修改L‑半胱氨酸工程菌株中糖酵解途径的辅因子偏好性，通过和碳代谢偶联的方式提高NADPH的再生，改善L‑半胱氨酸合成途径的碳代谢与硫代谢之间平衡。本发明中构建的基因工程菌的L‑半胱氨酸产量得到了显著的提升，为实现L‑半胱氨酸微生物发酵法的工业化生产提供了有效的代谢工程改造方法和具有高产L‑半胱氨酸的基因工程菌。
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公开(公告)号：CN114350585B
公开(公告)日：2023-08-18
申请号：CN202210078036.6
申请日：2022-01-24
申请人： 浙江工业大学
IPC分类号： C12N1/21 , C12N15/113 , C12N15/75 , C12N15/52 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N9/00 , C12N9/02 , C12N9/04 , C12N9/10 , C12N9/12 , C12P13/02 , C12R1/125
摘要： 本发明涉及一种高产D‑泛酸的基因工程菌株及其构建方法，以及其在微生物发酵制备D‑泛酸中的应用。本发明通过(1)利用起始密码子TTG替换coaA基因原始起始密码子GTG的同时，敲除了coaX基因，弱化了D‑泛酸降解途径，减少了CoA的合成；(2)使用弱启动子PresD表达ilvE的同时，运用Cre/loxP基因编辑技术敲除了原有ilvK基因，在减少竞争支路代谢流的基础上进一步弱化了支链氨基酸合成途径代谢流；(3)运用Cre/loxP基因编辑技术敲除了poxB和lctE，为D‑泛酸合成提供了充分的代谢流。最后通过异源表达来源于谷氨酸棒杆菌的panB及panC，强化了D‑泛酸合成途径中关键酶的表达，最终使得D‑泛酸产量相较于出发菌株从几乎检测不到提高到了67.4 g/L。
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公开(公告)号：CN116355972A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202310208931.X
申请日：2023-03-07
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明涉及生物发酵技术领域，公开了一种重组大肠杆菌生产L‑高丝氨酸的发酵工艺。本发明提供的重组大肠杆菌生产L‑高丝氨酸的发酵工艺主要针对现有重组大肠杆菌生产L‑高丝氨酸发酵工艺过程中存在的发酵进程中菌体生长难以控制、进而高产量难以重现的问题。本发明通过使发酵过程中的pH、温度、葡萄糖含量、OD600值及DO值控制在一定范围内，最终使菌体生长的各个阶段都可以保持最佳生产状态，实现发酵进程中菌体生长的控制，最终提升L‑高丝氨酸的产量,且该高产量重现性好。
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公开(公告)号：CN116121162A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202211616232.0
申请日：2022-12-15
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明涉及一种消除副产物AmA且高产两性霉素B的重组结节链霉菌，由如下方法构建获得：由如下方法构建获得：以结节链霉菌CCTCC NO：M 2017426为底盘菌，突变其聚酮合酶ER5结构域关键结催化位点，将其氨基酸序列中的QSFDLAFVDPEVIGAMGR突变为QSFDLAFVAPEVIGAMGR获得。本发明有益效果主要体现在：(1)本发明获得的突变菌株具有完全不产副产物AmA的特性，便于工业化生产分离纯化；(2)本发明获得的突变菌株具有较高的两性霉素B产量。
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公开(公告)号：CN116103215A
公开(公告)日：2023-05-12
申请号：CN202310210617.5
申请日：2023-03-07
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明涉及基因工程技术领域，公开了一种高产L‑2‑氨基丁酸的无质粒基因工程菌及其应用。本发明提供的产L‑2‑氨基丁酸的无质粒基因工程菌，以Escherichia coli THR为底盘细胞经代谢工程和基因编辑技术改造得到，该基因工程菌菌株能以葡萄糖为原料，通过发酵培养得到L‑2‑氨基丁酸，在无质粒增加外源酶活的情况下，5L发酵罐分批补料发酵产量达到13.81g/L，发酵成本低，产物浓度高，没有副产物影响，产物易于纯化，适用于工业应用。
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