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公开(公告)号：CN106591447A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201611126784.8
申请日：2016-12-09
申请人： 上海美吉医学检验有限公司
摘要： 本发明提供了一种单细胞全基因组的测序方法，包括以下步骤：对单细胞进行分离并裂解；对单细胞的全基因组DNA进行单细胞全基因组扩增；对扩增产物进行质量检测；对检测合格的扩增产物进行捕获并构建DNA测序文库；高通量测序；其中，对扩增产物进行质量检测包括步骤：检测该扩增产物中的DNA片段长度，将最大DNA片段的长度与预设值进行比较，判断扩增产物的质量是否合格，最大DNA片段的长度大于预设值的扩增产物，其质量检测合格。本发明对于扩增后扩增产物质量的检测方法步骤简单，不需要另外合成引物，成本低，而且检测扩增产物需要的起始量少，检测结果准确有效，具有很强的实用性。
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公开(公告)号：CN106970221B
公开(公告)日：2019-01-04
申请号：CN201710168597.4
申请日：2017-03-21
申请人： 上海美吉医学检验有限公司
IPC分类号： G01N33/574 , G01N33/58
摘要： 本发明提供了一种基于液体活检的前列腺癌检测的试剂盒，包括：用于增强染色效果的染色增强液和带荧光染色标记的特异性抗体；其中所述特异性抗体包括：PSA抗体、CD45抗体和PSMA抗体；所述染色增强液包括浓度为0.001～1mg/mL的表面活性剂。本发明的试剂盒可以有效的富集目标细胞，并且确认富集的目标细胞是否来源于前列腺癌的早期患者，并对CTC进行分型。同时，本发明通过双瘤标检测增加肿瘤检测灵敏度并且进一步通过CEP8的检测保证检测的准确性。此外，本发明通过染色增强液加强染色效果，使多种带荧光染色标记的抗体都可以与目标细胞结合，对目标细胞染色，染色效果更好，荧光更强，而且边界清晰。
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公开(公告)号：CN107557874A
公开(公告)日：2018-01-09
申请号：CN201710867619.6
申请日：2017-09-22
申请人： 上海美吉医学检验有限公司
IPC分类号： C40B50/06 , C12Q1/6869
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，具体公开了一种适用于单细胞的全基因组甲基化与转录组共测序的文库建立方法，包括如下步骤：（1）细胞裂解；（2）对细胞裂解液进行反转录，使细胞裂解液中的RNA反转录成为cDNA；（3）步骤（2）处理后的基因组DNA和cDNA分离；（4）以分离后基因组DNA构建甲基化文库，cDNA构建转录组文库；其中，步骤（4）中所述基因组DNA甲基化文库构建包括以下步骤：（4-1）对所述基因组DNA进行重亚硫酸盐转化；（4-2）对步骤（4-1）中转化后的基因组DNA进行线性扩增；（4-3）对步骤（4-2）中线性扩增的扩增子进行指数扩增，所述指数扩增的扩增子用作文库。
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公开(公告)号：CN107501388A
公开(公告)日：2017-12-22
申请号：CN201710864001.4
申请日：2017-09-22
申请人： 上海美吉医学检验有限公司
CPC分类号： C07K1/10 , C07K1/1077
摘要： 本发明利用酶法和化学法相结合，提供一种最佳的抗体-分子定点偶联方案：首先通过酶法对抗体Fc片段的糖苷位点进行脱糖基化暴露出不同位置和个数的GlcNAc位点；然后由相应的酶或突变体通过转糖基作用将半乳糖UDP-Gal或修饰有特殊官能团的供体半乳糖衍生物修饰到抗体的GlcNAc位点，其中对于修饰有半乳糖Gal末端的抗体还需利用唾液酸糖基转移酶将修饰有特殊官能团的供体唾液酸衍生物修饰到抗体的Gal末端位点，从而获得带有特殊官能团修饰的抗体；最后利用化学反应将带有特殊官能团的其他分子物质定点偶联在抗体的Fc区。本方案可以准确、可控地得到不同位置和个数的裸露的抗体的GlcNAc位点，使得抗体定点偶联上相同个数的其他分子，实现抗体-分子定点偶联。
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公开(公告)号：CN107488725A
公开(公告)日：2017-12-19
申请号：CN201710864047.6
申请日：2017-09-22
申请人： 上海美吉医学检验有限公司
CPC分类号： C12Q1/6869 , C12N15/1065 , C40B50/06 , C12Q2535/122 , C12Q2523/125 , C12Q2531/119
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，具体公开了一种适用于单细胞基因组甲基化测序的文库建立方法及其应用。本发明提供的适用于单细胞基因组甲基化测序的文库建立方法包括如下步骤：（1）对样本的基因组DNA进行重亚硫酸盐转化；（2）对步骤（1）中转化后的基因组DNA进行线性扩增；（3）对步骤（2）中线性扩增的扩增子进行指数扩增，所述指数扩增的扩增子用作测序文库。所述文库建立方法的样本基因组DNA起始量可低至pg级，采用所述方法建立的文库进行测序，可对全基因组的绝大多数胞嘧啶进行检测，可以覆盖到全基因组的绝大多数区域。
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公开(公告)号：CN106834511B
公开(公告)日：2020-03-31
申请号：CN201710168601.7
申请日：2017-03-21
申请人： 上海美吉医学检验有限公司
IPC分类号： C12Q1/6841
摘要： 本发明提供了一种基于液体活检的乳腺癌检测的试剂盒，所述试剂盒包括：用于增强染色效果的染色增强液和带荧光染色标记的特异性抗体；其中所述特异性抗体包括：ERα抗体、VIM抗体、CD45抗体和HER2抗体；所述染色增强液包括浓度为0.001～1mg/mL的表面活性剂。本发明的试剂盒，可以有效的富集目标细胞，并且确认是否来源于乳腺癌的早期患者，以及进行肿瘤分型。同时，通过三瘤标检测增加肿瘤检测灵敏度并且进一步通过CEP8的检测保证检测的准确性。此外本发明通过染色增强液加强染色效果，使多种带荧光染色标记的抗体都可以与目标细胞结合，对目标细胞染色，染色效果更好，荧光更强，而且边界清晰。
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公开(公告)号：CN107475779A
公开(公告)日：2017-12-15
申请号：CN201710864035.3
申请日：2017-09-22
申请人： 上海美吉医学检验有限公司
CPC分类号： C40B50/06 , C12Q1/6858 , C12Q1/6869 , C12Q2535/122 , C12Q2523/125 , C12Q2525/191
摘要： 本发明涉及分子生物学技术领域，具体公开了一种适用于单细胞RRBS测序的文库建立方法及其应用。本发明公开的适用于单细胞RRBS测序的文库建立方法包括如下步骤：（1）对样本的基因组DNA依次进行酶切、末端补平和加A、加接头以及重亚硫酸盐转化；（2）对步骤（1）中转化后的基因组DNA进行线性扩增；（3）对步骤（2）中线性扩增的扩增子进行指数扩增，所述指数扩增的扩增子用作测序文库。该方法测序所需的DNA起始量低，可以对单个细胞的基因组进行甲基化测序；具有有效的文库片段控制步骤，通过线性扩增步骤控制最终产物的片段，避免繁复操作的同时提高覆盖率。
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公开(公告)号：CN106970221A
公开(公告)日：2017-07-21
申请号：CN201710168597.4
申请日：2017-03-21
申请人： 上海美吉医学检验有限公司
IPC分类号： G01N33/574 , G01N33/58
CPC分类号： G01N33/57434 , G01N33/582
摘要： 本发明提供了一种基于液体活检的前列腺癌检测的试剂盒，包括：用于增强染色效果的染色增强液和带荧光染色标记的特异性抗体；其中所述特异性抗体包括：PSA抗体、CD45抗体和PSMA抗体；所述染色增强液包括浓度为0.001～1mg/mL的表面活性剂。本发明的试剂盒可以有效的富集目标细胞，并且确认富集的目标细胞是否来源于前列腺癌的早期患者，并对CTC进行分型。同时，本发明通过双瘤标检测增加肿瘤检测灵敏度并且进一步通过CEP8的检测保证检测的准确性。此外，本发明通过染色增强液加强染色效果，使多种带荧光染色标记的抗体都可以与目标细胞结合，对目标细胞染色，染色效果更好，荧光更强，而且边界清晰。
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公开(公告)号：CN106591447B
公开(公告)日：2020-06-12
申请号：CN201611126784.8
申请日：2016-12-09
申请人： 上海美吉医学检验有限公司
IPC分类号： C12Q1/6869 , C12Q1/6806 , G16B25/00 , G16B20/00 , G16B50/00
摘要： 本发明提供了一种单细胞全基因组的测序方法，包括以下步骤：对单细胞进行分离并裂解；对单细胞的全基因组DNA进行单细胞全基因组扩增；对扩增产物进行质量检测；对检测合格的扩增产物进行捕获并构建DNA测序文库；高通量测序；其中，对扩增产物进行质量检测包括步骤：检测该扩增产物中的DNA片段长度，将最大DNA片段的长度与预设值进行比较，判断扩增产物的质量是否合格，最大DNA片段的长度大于预设值的扩增产物，其质量检测合格。本发明对于扩增后扩增产物质量的检测方法步骤简单，不需要另外合成引物，成本低，而且检测扩增产物需要的起始量少，检测结果准确有效，具有很强的实用性。
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公开(公告)号：CN106834511A
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201710168601.7
申请日：2017-03-21
申请人： 上海美吉医学检验有限公司
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 本发明提供了一种基于液体活检的乳腺癌检测的试剂盒，所述试剂盒包括：用于增强染色效果的染色增强液和带荧光染色标记的特异性抗体；其中所述特异性抗体包括：ERα抗体、VIM抗体、CD45抗体和HER2抗体；所述染色增强液包括浓度为0.001～1mg/mL的表面活性剂。本发明的试剂盒，可以有效的富集目标细胞，并且确认是否来源于乳腺癌的早期患者，以及进行肿瘤分型。同时，通过三瘤标检测增加肿瘤检测灵敏度并且进一步通过CEP8的检测保证检测的准确性。此外本发明通过染色增强液加强染色效果，使多种带荧光染色标记的抗体都可以与目标细胞结合，对目标细胞染色，染色效果更好，荧光更强，而且边界清晰。
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