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公开(公告)号：CN104630209A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201510114907.5
申请日：2015-03-17
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12N15/10
摘要： 一种无损伤冷抽提小型昆虫基因组DNA的方法，包括以下几个步骤：1）配制基因组DNA提取缓冲液；2）用95%酒精小心清洗昆虫体表的杂质，再用蒸馏水清洗；3）将昆虫放入离心管内，加入3～6倍虫体体积的提取缓冲液，50±5℃水浴； 4）-20℃放置14～17 h，冷抽提基因组DNA；5）加入蛋白酶K，使其终浓度为0.6 mg/mL，50±5℃水浴；6）95℃水浴灭活蛋白酶K；7）将昆虫从离心管中取出，管内溶液即含有该昆虫的基因组DNA。该提取方法不仅能够保持虫体的完整性，而且经过-20℃冷抽提，使昆虫的基因组DNA在低温条件下从虫体内充分释放，避免了基因组DNA的降解，提高了基因组DNA的质量。
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公开(公告)号：CN104152475A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410405714.0
申请日：2014-08-18
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明公开了一种烟草ε-番茄红素环化酶基因，其碱基序列如SEQIDNO：1所示。本发明通过同源克隆的方式，从栽培烟草红花大金元体内克隆获得Ntε-LCY基因序列，并且进行了表达模式及亚细胞定位分析。利用烟草脆裂病毒（Tobaccorattlevirus，TRV）诱导基因沉默注射本氏烟草，结果表明ε-LCY的部分沉默可以提高烟叶中类胡萝卜素含量，并且增强烟株抵御光抑制的能力。该研究结果能够为利用基因工程技术培育优良品种提供理论依据和基因资源。
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公开(公告)号：CN101731286B
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN200910227273.9
申请日：2009-12-04
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 一种合欢提取液及其应用，是以合欢为原料，通过以下方法制得：将合欢叶片粉碎，然后在磷酸盐缓冲液中浸提，离心，得合欢粗提液；在合欢粗提液中加入固体硫酸铵，两次盐析，透析除盐，即得合欢提取液。将本发明的合欢提取液应用于烟草具有以下优点：(1)本发明的合欢提取液属于天然植物提取液，基本对人畜和环境无害，具有高效、低毒、无残留的特点。(2)合欢提取液对烟草花叶病毒(TMV)有较强的抗病毒活性，对TMV的抑制效率达到90％以上。(3)合欢提取液可有效用于烟草育苗阶段、移栽期、团颗期及旺长期的烟草花叶病毒病的预防与控制。(4)本发明制备方法简单、成本低，易于进行规模化生产，具有较大的应用价值。
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公开(公告)号：CN101717431B
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN200910227668.9
申请日：2009-12-28
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 一种菠菜蛋白提取物，其特征在于：将菠菜叶片粉碎，然后在磷酸盐缓冲液中浸提，离心后得蛋白粗提液；加入固体硫酸铵，两次盐析，透析除盐，得菠菜盐析蛋白组分；再通过强阳离子交换层析分离获得菠菜活性蛋白组分。本发明的菠菜蛋白提取物在防治烟草花叶病上的应用：可有效防治烟草花叶病毒病。本发明与现有烟草花叶病毒病的防治方法相比，其优点为：(1)菠菜蛋白提取物属于天然植物提取物，基本对人畜和环境无害，具有高效、低毒、无残留的特点。(2)菠菜蛋白提取物对TMV有较强的抗病毒活性，对TMV的抑制效率达到90％以上。(3)菠菜蛋白提取物可有效用于烟草育苗阶段、移栽期、团颗期及旺长期的烟草花叶病毒病的预防与控制。
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公开(公告)号：CN101762583A
公开(公告)日：2010-06-30
申请号：CN200910227492.7
申请日：2009-12-16
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 一种产地特色烟叶外观颜色的表征方法，其特征在于：把颜色在烟叶表面的随机分布在统计意义上看成一个分形结构，通过获得较高精度的烟叶数字图像并进行背景去除和分割处理；计算烟叶颜色各分量(红色、绿色、蓝色、亮度)不同阈值参数对应的分形维数，将其作为定量描述烟叶颜色表面分布状态的指标，绘制各颜色分量的分形维数变化曲线，分形维数变化曲线可以全面的反映烟叶颜色的表面分布状态；运用分形维数变化曲线能很好的表征产地特色烟叶外观颜色。采用此法建立的烟叶外观颜色的表征方法，既能够反映颜色的空间分布特征，又包含其累计特性。分形维数变化曲线可以全面的反映烟叶颜色的表面分布状态，体现了我国不同产地间烟叶颜色表达方式的区域特征。
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公开(公告)号：CN117025631A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202311006124.6
申请日：2023-08-10
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H6/82 , A01H5/12
摘要： 本发明公开烟草萜类物质合成相关转录因子NtGATA8及其编码基因、载体和应用。本发明的烟草萜类物质合成相关转录因子编码基因NtGATA8基因，其核苷酸序列为：(1)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；(2)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经取代和/或缺失和/或添加一个或多个核苷酸且表达相同功能蛋白的核苷酸序列。经检测发现，NtGATA8基因能够通过调控NtGGPPS4基因的表达，进一步地调控烟草叶片中萜类物质的合成。过表达该基因，可以降低烟草中萜类物质的含量；而通过沉默的方式降低该基因的表达，可以提高烟草中萜类物质的含量，这为烟叶品质改善、烟草品种遗传改良提供遗传材料和理论依据。
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公开(公告)号：CN111549009B
公开(公告)日：2022-10-28
申请号：CN202010452821.4
申请日：2020-05-26
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本申请属于烟草基因工程技术领域，具体涉及GGPPS定向突变蛋白。现有GGPPS蛋白的154、161和218这三个位点位于酶的催化口袋，209和233这两个位点位于酶分子表面；基于这五个位点，本申请提供了GGPPS系列定向突变蛋白，其中包括：系列单位点突变蛋白、双位点突变蛋白、三位点突变蛋白、四位点突变蛋白、五位点突变蛋白。发明人利用CAST技术构建“小而精”的突变体文库，通过进一步筛选以及基于定向进化需要，发明人对特定位点氨基酸突变类型做了详细分析。初步实验结果表明，特定位点氨基酸突变后，β‑胡萝卜素合成量得到了明显提高，为进一步作物新品种培育奠定了一定技术基础。
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公开(公告)号：CN110923246B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN201911355067.6
申请日：2019-12-25
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
摘要： 本发明属于烟草基因工程领域，具体涉及一个烟草NtMYB12基因及其在调控脂肪酸合成中的应用专利申请。该基因全长2530bp，其中编码区全长1254bp，包含3个内含子和4个外显子，其碱基序列如SEQ ID NO.1所示。NtMYB12蛋白在细胞内定位为细胞核内，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。该转录蛋白表达量或含量升高后，脂肪酸含量降低；而降低该转录蛋白含量后，脂肪酸含量升高。发明人通过对烟草NtMYB12基因的初步研究，发现该基因与种子脂肪酸合成紧密关联。基于此，可为植株生理代理调节、新品种培育奠定良好技术基础。
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公开(公告)号：CN113174395B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN202110480149.4
申请日：2021-04-30
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12N15/53 , C12N9/04 , A01H1/02 , A01H1/04 , C12Q1/6895
摘要： 本发明属于烟草生物技术领域，具体涉及若干与烟气苯酚释放量相关的突变基因序列。与烟气苯酚释放量相关的突变基因DHQ‑SDH1为烟草脱氢奎尼酸脱氢酶/莽草酸脱氢酶突变基因。本申请中，发明人通过对烟草DHQ‑SDH1、TyrA基因的进一步研究，发现这两个基因与烟草酪氨酸和烟气苯酚释放量含量高度相关。基于此发现，进一步结合Tilling筛选技术，通过分析预测编码蛋白发生的有义突变，进行蛋白三级结构预测，同时结合实际大田实验验证，结果表明，这两个基因突变后，烟草中酪氨酸含量和烟气苯酚释放量发生了明显降低。基于这些研究结果，可为烟草低苯酚含量烟叶新品种培育奠定一定理论基础和技术基础。
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公开(公告)号：CN111996277B
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202010894385.6
申请日：2020-08-31
申请人： 中国烟草总公司郑州烟草研究院
IPC分类号： C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/29 , C12N15/11
摘要： 本发明属于烟草基因组解析和烟草栽培技术领域，具体涉及烟草马铃薯Y病毒病预警基因及其应用专利申请事宜。预警基因Ntab0691000碱基序列分别如SEQ ID No.2所示。本申请所提供的预警基因，具有响应快速、灵敏度高的技术优点，而且由于是检测烟草基因组（现有技术，多是检测病菌基因组），因此具有便捷的技术优势。本申请不仅可为马铃薯Y病毒病的监测和早期预防奠定一定技术基础，也为其他烟草病害防控提供了借鉴和参考，因此具有较好的应用和科研价值。
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