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公开(公告)号：CN108118068A
公开(公告)日：2018-06-05
申请号：CN201711382247.4
申请日：2017-12-20
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/82
Abstract: 本发明公开了一种高效快速的菊花转基因方法，属于菊花遗传育种及分子生物学领域。该方法包括：(1)取菊花茎段作为外植体置于预培养基上进行预培养；(2)将转化有重组表达载体的农杆菌菌液进行活化和培养，然后富集菌体，并用MS液体培养基重悬作为侵染液；(3)将步骤(1)中预培养后的外植体浸入侵染液中采用真空负压法对其进行侵染；(4)将侵染后的外植体置于预培养基上在黑暗条件下进行共培养；之后在脱羧培养基上进行脱羧培养，最后依次使用选择培养基1和选择培养基2进行选择培养，确定无农杆菌爆发后，继代至生根培养基进行进一步的生根筛选得到菊花转基因植株。与传统叶盘法菊花转基因相比，本发明显著缩短了转基因的时间，提高了菊花转基因的转化效率，减少了科研工作者的工作量，为菊花的高效转化和基因功能分析提供新途径，也为其他植物的转基因提供了新思路。
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公开(公告)号：CN107182772A
公开(公告)日：2017-09-22
申请号：CN201710428255.1
申请日：2017-06-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高效选育无花粉污染菊花的方法及应用，该方法包括：(1)根据菊花亲本花粉污染程度和亲本生殖发育特性情况，合理选配杂交亲本开展人工杂交实验；(2)人工授粉后统计各个组合中花粉在柱头上的萌发数量；(3)统计子房饱满率和结实率；(4)测定杂交F1代散粉特性，分析花粉污染程度，从而得到获得无花粉污染菊花杂交后代，其中部分后代经过综合评价后可以作为新品种直接进行推广，而另外一部分可以作为无花粉污染菊花育种的中间材料。本发明提供了一种科学、快速、高效选育无花粉污染菊花的方法，该方法选育的杂交后代中无花粉株系最高比例是42％，而传统方法的比例通常不超过10％。因此，该方法将为培育无花粉污染菊花新品种提供理论指导。
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公开(公告)号：CN106342795A
公开(公告)日：2017-01-25
申请号：CN201610724868.5
申请日：2016-08-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01N3/02
CPC classification number: A01N3/02
Abstract: 本发明公开一种红色菊花干燥花保色的方法，该方法为：选取盛花期的红色菊花花瓣用保色剂浸泡后，除去其表面多余的保色剂，将花瓣平整地夹放在吸水纸中，而后用硬纸板和夹子夹住，烘干。本发明采用化学、物理相结合的方法对红色菊花品种进行保色。具有简单、易操作、效果好、成本低的特点，可操作性强，实用性突出。
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公开(公告)号：CN105671056A
公开(公告)日：2016-06-15
申请号：CN201610134871.1
申请日：2016-03-09
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/66 , C12N15/8205 , C12N15/827 , C12Q1/6895 , C12Q2600/13 , C12Q2600/158
Abstract: 本发明属于植物基因工程和转基因育种领域，涉及一种通过转CmTCP20基因调控菊花花瓣生长的方法，包括以下步骤：从切花大菊‘神马’中克隆CmTCP20基因；构建CmTCP20基因植物表达载体；采用农杆菌介导法将其转入菊花中，进行培养初步获得抗性植株。对转化植株进行PCR、定量RT-PCR检测证实CmTCP20内源基因已经整合到转基因植株的基因组DNA中并发生转录。对转基因植株进行表型观察与统计分析，发现与未转基因植株相比，转基因植株的花瓣生长量明显变大。本发明通过转化内源CmTCP20转录因子并正常转录表达，从而调控了切花菊花瓣的生长，为利用基因工程技术提高切花菊观赏品质提供新颖而实用的方法，将有效推动菊花生物技术育种进程。
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公开(公告)号：CN105510292A
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201610031066.6
申请日：2016-01-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N21/64
CPC classification number: G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种体外检测菊花胚胎败育过程中Caspase活性的方法及其应用，该方法包括：1)获得菊花远缘杂交后不同发育时期的正常与败育胚珠；2)采用TCA/丙酮沉淀法分别提取步骤1)中所取得的胚珠样品的蛋白质；3)将步骤2)中的蛋白质预处理后分别用Bradford法进行蛋白质定量，并分别调整蛋白浓度；4)用Caspase活性荧光检测方法对正常与败育胚珠的蛋白进行Caspase活性检测。本发明针对菊花远缘杂交后胚胎败育的细胞衰老和凋亡现象，提供了一种快速、准确鉴定菊花胚胎败育过程中诱导细胞死亡的关键Caspase酶，为研究菊花胚胎败育的分子机理，挖掘调控胚胎败育的关键基因和蛋白提供了研究基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103828710B
公开(公告)日：2016-03-23
申请号：CN201410100386.3
申请日：2014-03-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H1/02
Abstract: 本发明为一种高效率菊花杂交育种的方法，属于生物技术育种领域，本发明选择杂交后代种子，经75%乙醇消毒1min及5%次氯酸钠消毒50min后，播种于含15g·L-1蔗糖的MS培养基上，并结合组织培养技术，进一步扩繁和继代培养，获得大量的无菌苗。本方法切实提高了杂交种子发芽率和成苗率，并且对于部分存在杂交不亲和性的菊花品种，可将由少量的杂交后代种子获得的无菌苗于当年进行继代扩繁，以获得较大群体的株系，从而缩短育种周期，并进一步丰富了菊花育种手段。
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公开(公告)号：CN103233074B
公开(公告)日：2015-04-15
申请号：CN201310170609.9
申请日：2013-05-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种菊花SSR引物的开发方法。利用NCBI数据库现有的序列数据，结合Perl编程语言方法，对大量序列信息进行批量处理，进行SSR序列查找和SSR标记引物设计，克服了SSR开发效率低、耗时久、成本高等障碍。以不同栽培菊花品种为材料，对设计的SSR引物进行验证，若有条带检测出，即为成功的SSR引物。应用本方法成功地设计了363对SSR引物，为菊花SSR引物开发进而实现分子标记辅助选择育种和比较基因组学研究等提供了新的方法和思路。
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公开(公告)号：CN104313150A
公开(公告)日：2015-01-28
申请号：CN201410568698.7
申请日：2014-10-22
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q1/6895 , C12Q2600/124 , C12Q2600/156
Abstract: 本发明属于生物技术领域，提供菊花抗蚜性关联分子标记、分子标记引物、分子标记筛选方法及上述三者在菊花新品种培育上的应用。菊花抗蚜性关联分子标记包括主效QTL位点NoaE2G1、NoaE2G7、NoaE1H3、NoaE2H7、NoaE2H8的分子标记。其筛选方法包括：(1)试验材料及其表型数据的获得；(2)菊花连锁图谱构建；(3)菊花抗蚜性状的QTL定位；(4)菊花抗蚜性状关联分子标记的确定。解决了目前菊花抗蚜性状基因的精确定位和克隆的研究在国内外几乎空白这一现状，筛选出与菊花蚜虫抗性基因紧密关联的分子标记，建立菊花抗蚜性分子标记辅助选择体系，提高菊花抗蚜性选择效率，为菊花新品种的选育奠定基础。
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公开(公告)号：CN102860222B
公开(公告)日：2014-02-26
申请号：CN201210259784.0
申请日：2012-07-25
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01G7/00
Abstract: 本发明公开了一种通过叶型特征鉴定菊花品种的方法，属于菊花品种资源鉴别与品种权保护领域，该方法包括：测定菊花植株不同叶位的叶型指标，确定植株叶型保守的叶位；采集菊花品种不同单株间保守的叶位的叶型指标，并将该叶型指标在不同品种间作差异显著性分析，确定在不同品种间存在显著性差异的叶型指标为特异性叶型特征指标；将多个特异性叶型特征指标通过多元判别分析法进行品种判定。本发明鉴定方法通过对品种成熟叶片特征的测定，综合品种的叶型特征指标进行类别（品种）判定，检测成本低廉，易实施，特异性强，准确度高。
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公开(公告)号：CN102559923B
公开(公告)日：2014-01-08
申请号：CN201210073698.0
申请日：2012-03-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于植物病原菌的分子生物学检测领域，公开了一种快速鉴定菊花真菌病害病原菌种类的方法。该方法包括：(1)植物病样制备；(2)聚合酶链式反应(PCR)、电泳检测及片段纯化；(3)测序及结果比对确定病原菌种类。本方法突破了传统的植物真菌病害鉴定周期长、专业性强等局限性，提供的检测方法可在6小时内即可完成检测与鉴定菊花真菌病害，检测广谱性强，灵敏度高，工序简单。
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