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公开(公告)号：CN100558888C
公开(公告)日：2009-11-11
申请号：CN200710022406.X
申请日：2007-05-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种利用黑曲霉生产β-甘露聚糖酶的方法，属于酶工程技术领域。本发明采用麸皮、玉米粉和菜籽饼粉等农副产品为基料，并添加适量的魔芋粉、玉米浆、无机盐和自来水等，利用黑曲霉(Aspergillus niger)WA9024菌株固态发酵生产β-甘露聚糖酶，提供了小试生产和产业化生产的发酵培养基配方和发酵条件，小试生产成熟发酵曲的β-甘露聚糖酶活性达18912～22185IU/g干曲，比WA9024菌株原小试生产固态发酵的酶活性(8984IU/g干曲)提高了2.11～2.47倍，高于目前国内水平；产业化生产产品酶活性为12678～15921IU/g干曲。本发明用廉价的麸皮、玉米粉和菜籽饼粉等为发酵主原料，是一种充分利用自然界可再生资源，又是一种绿色环保且可持续的生产方法。
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公开(公告)号：CN108559734B
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN201810033895.7
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的L‑乳酸脱氢酶突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明在L‑乳酸脱氢酶基础上，通过定点突变生物技术改造L‑乳酸脱氢酶分子结构，得到一株L‑乳酸脱氢酶大肠杆菌工程菌，突变酶比酶活提高5.2倍，催化活性提高3.8倍。本发明解决了L‑乳酸脱氢酶催化活性低的限制性问题，为L‑乳酸脱氢酶分子改造提供了一条新的思路。
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公开(公告)号：CN108034644B
公开(公告)日：2020-03-06
申请号：CN201810033897.6
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的L‑乳酸脱氢酶突变体及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明在L‑乳酸脱氢酶基础上，通过定点突变生物技术改造L‑乳酸脱氢酶分子结构，得到一株L‑乳酸脱氢酶大肠杆菌工程菌，突变酶比酶活提高6.1倍，催化活性提高4.2倍。本发明解决了L‑乳酸脱氢酶催化活性低的限制性问题，为L‑乳酸脱氢酶分子改造提供了一条新的思路。
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公开(公告)号：CN105969837B
公开(公告)日：2019-12-24
申请号：CN201610535106.0
申请日：2016-07-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酶法制备(S)‑环氧苯乙烷的方法，属于生物催化技术领域。本发明在正己醇/缓冲液的双相体系中，利用来源于宇佐美曲霉的环氧化物水解酶催化外消旋环氧苯乙烷的水解动力学拆分，制备(S)‑环氧苯乙烷的方法；与单相反应体系相比，动力学拆分rac‑SO的浓度从24g/L提高至120g/L；时空产率从为3.1g/L/h提高至20.3g/L/h；动力学拆分120g/Lrac‑SO制备(S)‑SO的ee值从36.8％提高至98.3％，并实现了(S)‑SO的克级制备。本发明方法工艺简单、产物的对映体纯度和得率高、催化效率高和环境友好，具有较大工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN106047834B
公开(公告)日：2019-11-08
申请号：CN201610534898.X
申请日：2016-07-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种对映选择性提高的宇佐美曲霉环氧化物水解酶突变体，属于酶工程和生物催化技术领域。本发明基于理性设计对宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)环氧化物水解酶(AuEH2)进行分子改造，结合基因的定点饱和突变方法，获得多个对映选择性提高的环氧化物水解酶突变体。本发明获得的6个对映选择性提高的突变体：AuEH2A250I、AuEH2A250M、AuEH2A250Y、AuEH2A250S、AuEH2A250L和AuEH2A250V催化外消旋环氧苯乙烷(rac‑SO)的对映体比率(E值)相比野生型，从16分别提高至48、27.2、23.9、21.8、20.0和19.4。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106244637B
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201610926649.5
申请日：2016-10-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种双酶催化外消旋环氧苯乙烷制备(R)‑苯乙二醇的方法，属于生物催化技术领域。本发明以外消旋环氧苯乙烷(rac‑SO)为底物，以双环氧化物水解酶：环氧化物水解酶突变体AuEH2A250I和环氧化物水解酶VrEH3对映归一性水解外消旋环氧苯乙烷(rac‑SO)制备高对映纯产物(R)‑苯乙二醇(PED)。本发明是首次把来源于绿豆的VrEH3和来源于宇佐美曲霉的AuEH2A250I结合对映归一性水解rac‑SO。催化10mM rac‑SO制备(R)‑PED的ee值为96.0％。具有适合于工业应用的理想特性，本发明为该酶的产业化生产奠定了理论基础，有较大的工业化应用潜力及经济价值。
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公开(公告)号：CN109609479A
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201811633720.6
申请日：2018-12-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种对映选择性提高的宇佐美曲霉环氧化物水解酶突变体，属于酶工程和生物催化技术领域。本发明基于理性设计对宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)环氧化物水解酶(AuEH2)进行分子改造，结合基因的定点饱和突变方法，获得多个对映选择性提高的环氧化物水解酶突变体。本发明获得的9个对映选择性提高的突变体催化外消旋对甲基苯基缩水甘油醚(rac-pMPGE)的对映体比率(E值)相比野生型，从12.7分别提高至32.4、31.1、27.8、25.8、23.5、22.4、20.2、14.1、13.6。
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公开(公告)号：CN109486789A
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201811653120.6
申请日：2018-12-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种立体选择性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体，属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明通过菜豆来源的环氧水解酶1(PvEH1)进行饱和突变，获得对映选择性与对映归一性(即立体选择性)提高的突变酶PvEH1 Z4X4-59。PvEH1 Z4X4-59对外消旋间氯环氧苯乙烷(rac-mCSO)的最终eep，在25℃下从3.1％提高到92.3％，E值从2.6提高至26.5。
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公开(公告)号：CN108034644A
公开(公告)日：2018-05-15
申请号：CN201810033897.6
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的L‑乳酸脱氢酶突变体及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明在L‑乳酸脱氢酶基础上，通过定点突变生物技术改造L‑乳酸脱氢酶分子结构，得到一株L‑乳酸脱氢酶大肠杆菌工程菌，突变酶比酶活提高6.1倍，催化活性提高4.2倍。本发明解决了L‑乳酸脱氢酶催化活性低的限制性问题，为L‑乳酸脱氢酶分子改造提供了一条新的思路。
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公开(公告)号：CN104450801B
公开(公告)日：2018-04-13
申请号：CN201410759167.6
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种共表达羰基还原酶和葡萄糖脱氢酶的大肠杆菌系统在不对称还原制备(R)‑2‑氯‑1‑(3‑氯苯基)乙醇中的应用。以含有羰基还原酶(SyS1)基因和葡萄糖脱氢酶(SyGDH)基因的共表达重组菌E.coil BL21(pETDuet‑Sygdh‑Sys1)为催化剂，并添加一定量的NADP+和葡萄糖，在缓冲溶液/二甲亚砜两相反应体系中实现不对称还原3‑氯苯酰甲基氯高效制备(R)‑2‑氯‑1‑(3‑氯苯基)乙醇。其收率为98％，产物的对映体过量(e.e.)>99％。
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