犬恶丝虫ELISA检测试剂盒及制备方法

    公开(公告)号:CN102798716B

    公开(公告)日:2014-10-29

    申请号:CN201110419523.6

    申请日:2011-12-15

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了用于犬的犬恶丝虫ELISA检测试剂盒及制备方法,利用从犬恶丝虫成虫cDNA表达文库中筛选出的与编码马来丝虫肌球蛋白尾家族蛋白的同源基因命名为MTFP(同源性88%),在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)表达的MTFP蛋白作为抗原,建立了检测犬的犬恶丝虫感染的间接ELISA方法。该检测特异性高、灵敏度高、准确性高、稳定性好。具有操作简单、检测快速,易于判断等优点,适合于临床的快速诊断和基层、农村等流行病学调查大规模应用。

    一种布鲁氏菌抗体免疫胶体金检测试纸条及其制备方法

    公开(公告)号:CN101441215B

    公开(公告)日:2013-06-26

    申请号:CN200810051726.2

    申请日:2008-12-31

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开一种布鲁氏菌抗体免疫胶体金检测试纸条,用金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)标记胶体金制成本发明的胶体金抗体检测试纸条的金胶垫。L7/L12蛋白是布鲁氏菌高特异性、免疫原性蛋白。从牛布鲁氏菌基因组中克隆出L7/L12基因,把它连接到pET-28a上,构建成原核表达重组质粒,把这个质粒转化到大肠杆菌中,表达出L7/L12蛋白,蛋白纯化后,以它为抗原包被硝酸纤维膜,作为检测线(T线),同金胶垫一起装备成本发明的免疫胶体金试纸条。本发明试纸条可用于检测动物血清中的布鲁氏菌抗体,具有特异性强,灵敏度高、稳定性好、方便、快捷的特点,对布鲁氏菌的监测、诊断、净化和控制具有重要意义和实际应用价值。

    鸡球虫ADF重组卡介苗及制备方法

    公开(公告)号:CN102552893A

    公开(公告)日:2012-07-11

    申请号:CN201110439688.X

    申请日:2011-12-26

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明提供了一种鸡球虫ADF重组卡介苗,同时还提供了该疫苗的制备方法,获得鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊,提取RNA,反转录成cDNA,根据已克隆的柔嫩艾美耳球虫ADF基因序列的开放阅读框设计引物进行PCR,与PMD-18T载体连接进行克隆,测序鉴定正确后,酶切回收目的片段,再分别与用同种酶进行酶切反应的大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体PMV261和整合表达载体PMV361相连,连接正确的重组质粒转化到BCG中,经抗性筛选和PCR鉴定,获得阳性鸡柔嫩艾美耳球虫重组卡介苗。该活载体疫苗稳定性好,运输和保存较为容易,易于生产,产品不需纯化,可直接用于免疫保护试验.免去了蛋白质后处理的复杂工序,从而大大降低了成本,适宜于广大农村。

    一种新的犬新孢子虫速殖子的体外培养和染色方法

    公开(公告)号:CN102533556A

    公开(公告)日:2012-07-04

    申请号:CN201010593980.2

    申请日:2010-12-17

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明涉及了一种新的犬新孢子虫速殖子的体外培养和染色方法,其特征在于培养的具体步骤为:首先常规培养MCF-7乳腺癌细胞,当其长成细胞单层后,按104/ml接种1ml犬新孢子虫;之后用含2%胎牛血清的RPIM-1640培养基进行培养,每天利用倒置显微镜观察胞外新孢子虫速殖子的数目;染色的具体步骤为:新孢子虫速殖子经多聚甲醛固定,吖啶橙染色后经普通荧光显微镜照相观察;该培养方法简单实用,可快速培养新孢子虫速殖子,并且经吖啶橙染色后利用普通荧光显微镜即可快速、直观、清晰的观察到胞内寄生虫。

    一种牛结核杆菌抗体免疫胶体金检测试纸条及其制备方法

    公开(公告)号:CN101846677A

    公开(公告)日:2010-09-29

    申请号:CN200910218156.6

    申请日:2009-12-30

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明公开一种结核杆菌抗体免疫检测胶体金试纸条及其制备方法。用金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)标记胶体金制成胶体金抗体检测试纸条的金胶垫。CFP10和MPT64蛋白是致病性结核杆菌高特异性、免疫原性蛋白。从结核杆菌基因组中克隆出CFP10和MPT64基因,把它连接到pET-28a上,构建成两个原核表达重组质粒,把这两个质粒转化到大肠杆菌中,表达出CFP10和MPT64蛋白,蛋白纯化后,以混合蛋白为抗原包被硝酸纤维膜作为检测线,同金胶垫一起装备成本发明的免疫胶体金试纸条。本发明试纸条能区分人与动物是接种BCG还是野毒感染。可用于检测动物血清中的结核杆菌抗体,具有特异性强,灵敏度高、稳定性好、方便、快捷的特点,对结核杆菌的监测、诊断、净化和控制具有重要意义和实际应用价值。

    微小隐孢子虫双价蛋白疫苗及其制备方法

    公开(公告)号:CN101658667A

    公开(公告)日:2010-03-03

    申请号:CN200910066479.8

    申请日:2009-01-16

    Applicant: 吉林大学

    CPC classification number: Y02A50/489

    Abstract: 本发明提供一种微小隐孢子虫双价蛋白疫苗,其特征在于:以原核表达载体pET28a为载体,将两个微小隐孢子虫保护性抗原基因串联插入到pET28a原核表达载体的多克隆位点区,获得了微小隐孢子虫双价蛋白疫苗。本发明疫苗选用了两个优势保护性抗原,两者优势组合,能够引起机体更强的细胞免疫和体液免疫作用,从而可以达到更好的预防动物微小隐孢子虫病的目的。

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